宁德市医院体检人群及住院患者HTLV⁃I感染情况分析

叶仁清 叶作东 傅芬蕊 齐育英

作者单位：宁德师范学院附属宁德市医院检验科，福建，宁德352000

人类嗜T 淋巴细胞病毒I 型（Human T⁃lympho⁃tropic virus type⁃I，HTLV⁃I）属逆转录病毒科（Retro⁃viridae），RNA 肿瘤病毒亚科（Oncovirubae），是首个发现的人类逆转录病毒［1⁃2］，临床上可引起成年人T淋巴细胞白血病（Adult T⁃cell leukemia，ATL）、热带痉挛性下肢瘫痪以及HTLV 相关性多肌炎、淋巴结炎及相关性脊髓病等严重疾病［3］。目前全球已有约1 000 万～2 000 万人感染了HTLV⁃I［4］，造成严重的卫生经济负担。研究显示，福建省是我国HTLV⁃I 高流行区，其中宁德市的感染率呈现较高水平［5］。目前关于宁德市HTLV⁃I 具体感染情况相关的报道都是基于献血人群的研究，一定程度上不能代表全体人群。本文通过对体检人群及病患人群的筛查，旨在了解近年来宁德市人群HTLV⁃I 感染的流行情况及分析感染不同年龄段、性别与感染状况的关系。

1 材料与方法

1.1 研究对象

收集2019年4月至2019年12月在宁德市医院体检和住院患者的新鲜血清及部分全血标本9 269份，其中2 274 份为全市体检标本，3 405 份为随机选取的门诊体检标本，3 590 份为随机选取的住院患者标本。9 269 份标本中，男性为4 205 例，女性为5 064 例，标本年龄分布见表1，年龄中位数为46 岁。

表1 研究标本年龄分布表［n（%）］Table 1 Age distribution of sample［n（%）］

1.2 试剂与仪器

1.2.1 试剂

HTLV⁃I/II 抗体检测试剂盒（ELISA 法）（批号：T20190302B，96 人份/盒）、HTLV⁃I 核酸检测试剂盒（PCR⁃荧光探针法）（批号：HPQ20190101，48 人份/盒）和DNA/RNA 提取试剂盒（磁珠法）（批号：20190101，48 人份/盒）均来源于北京万泰生物药业股份有限公司。

1.2.2 仪器

郑州安图生物工程有限公司酶标仪（PHPMO型）、台湾圆点半自动核酸提取仪（SLA⁃32）、美国伯乐实时荧光定量PCR 仪（CFX96）、美国ABI DNA 测序仪（3730XL）。

1.3 方法

1.3.1 抗HTLV⁃I/II 初筛

使用北京万泰HTLV⁃I/II 抗体检测试剂盒（双抗原夹心酶联免疫法）对9 269 份标本进行抗体检测，对初次检测阳性标本进行双孔复查，复查结果仍为阳性者判定为ELISA 初筛阳性。

1.3.2 HTLV⁃I 确证试验

使用北京万泰HTLV⁃I 型核酸检测试剂盒（PCR⁃荧光探针法）对初筛阳性病例的血细胞标本进行PCR 确证实验。

1.3.3 测序分析

据HTLV⁃I 型插入序列pol、tax 基因信息，在NCBI 中查找高度保守参考序列，使用软件Primer Premier 3.0 进行引物设计，将保存初筛阳性者血细胞标本进行核酸提取，目的基因经PCR 扩增后进行测序，测序结果在GenBank 中与NCBI 网站上已发表的HTLV⁃I 型pol 或tax 基因序列进行比对分析。HTLV⁃I pol 基因（上游引物序列5′⁃TGGGC⁃GCTACCTGAACTTC⁃3′，下游引物序列5′⁃GGC⁃CACTGCTGCTTGGACT⁃3′，产物293 bp），HTLV⁃I tax 基因（上游引物序列5′⁃GGCCTTCCTCAC⁃CAATGTTC⁃3′，下游引物序列5′⁃GGATATTT⁃GGGCTCATGGTC⁃3′，产物469 bp），同源性均在98%以上判定为HTLV⁃I 阳性。

1.4 统计学方法

采用SPSS2 6.0 软件进行统计学分析；计数资料以n（%）表示，两组间比较采用χ2检验；检验水准P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HTLV⁃I 检测结果

对宁德市9 269 份血清标本进行HTLV⁃I/II 抗体筛查，经初筛和确证后93 份标本判定为HTLV⁃I抗体阳性，阳性率为1.00%。HTLV⁃I PCR 检测和HTLV⁃I 基因测序分析结果一致率100%。

2.2 HTLV⁃I 感染的年龄分布

76～98 岁年龄组阳性率最高达到2.11%，其次是61～75 岁年龄组，HTLV⁃I 阳性率达1.97%，0～17岁年龄组最低为0.00%。见表2。

表2 不同年龄组HTLV⁃I 阳性率［n（%）］Table 2 The infection rate of HTLV⁃I in different age groups［n（%）］

2.3 HTLV⁃I 感染的性别差异

男性HTLV⁃I 抗体阳性率为0.88%，女性HTLV⁃I 抗体阳性率为1.11%，两者比较，差异无统计学意义（P>0.05），不同年龄组间男性、女性HTLV⁃抗体阳性率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表3。

表3 不同性别组HTLV⁃I 阳性率［n（%）］Table 3 The infection rate of HTLV⁃I in different gender groups［n（%）］

2.4 不同年龄及性别组标本HTLV⁃I 阳性率

不同性别组随着年龄增长，HTLV⁃I 阳性率均呈现明显上升趋势。见图1。

图1 不同年龄及性别组标本HTLV⁃I 阳性率Figure 1 The infection rate of HTLV⁃I in different age and gender groups

3 讨论

对HTLV⁃I 感染引起的相关疾病至今尚未成功研究出有效的治疗药物和预防性疫苗，也未发现有效免疫性抗体产生或自行清除的报道［1，6］。目前唯一有效办法就是及时发现HTLV⁃I 感染者，采取措施切断其传播途径［7］。

1985年曾毅等［8］首次对来自全国28 个省市的9269 份血清样本筛查并进一步确证HTLV⁃I 抗体阳性率为0.08%。随着更多的HTLV⁃I 筛查调查的开展，更多地区和人群中HTLV⁃I 感染情况逐渐被发现，其中主要集中在东南沿海地区。季阳等［9］调查了1997年～1998年四川、福建、新疆、浙江、山东和湖北六省区的无偿献血者，血清HTLV⁃I 抗体阳性率为0.02%，感染者均为东南沿海地区献血者。而我国现有报道中，宁德市HTLV⁃1 的感染率呈现较高水平，陈长荣等［10］在2004 至2009年对福建省131 823 份无偿献血标本进行HTLV 抗体筛查后发现，检出阳性标本中来自宁德市的标本远高于其他地区，占比高达33.33%（8/24）。徐东峰等［11］在2013年对福建省宁德地区无偿献血者进行HTLV⁃I抗体筛查，确认阳性率为0.34%。欧山海等［12］对2016年～2018年无偿献血者的⁃I 抗体筛查结果中报道宁德市抗体阳性率为0.18%。本文调查结果说明了宁德市属于HTLV⁃I 高流行地区。与该地区现有报道相比，HTLV⁃I 抗体阳性率显著增加，主要是由于筛查人群的差异，之前有关该地区的研究对象均为献血者，本文筛查对象为体检人群及门诊和住院患者，一定程度上更能代表普遍群体。同时也需要谨防人群的感染率增加。HTLV的传播途径包括垂直感染、性接触传播、共用针头如静脉注射毒瘾者以及输血传播等［13］，研究发现HTLV 感染常表现出明显的家庭聚集性［14］，并具有区域集中的特点［15］，宁德市作为HTLV⁃1 感染率相对较高的地区，若疏于防治可能导致感染率进一步提升。在世界上其他国家和地区的调查中曾提到人群的年龄和性别是HTLV⁃I 的危险因素［16］，本研究结果显示性别因素不是HTLV⁃I 流行的危险因素，与王惠榕等［5］报道结果一致。

本文首次对宁德市医院体检人群及住院患者中HTLV⁃I 感染情况进行调查，统计得到HTLV⁃I感染率为1.00%，高于该地区献血人群HTLV⁃1 感染率的报道，可能由于献血人群整体健康水平更高造成了结果的差异。本文调查结果进一步丰富了HTLV⁃1 流行病统计的样本来源，为制定科学的防控措施提供参考。造成人群差异更深层次的机理在本文中并未开展研究，在后续的调查工作中应关注筛查人群不同导致的流行病统计学结果差异。另外，此次调查结果显示性别对HTLV⁃I 感染率的影响并不显著，而随着年龄增长，HTLV⁃I 感染率呈现明显上升趋势，因此应重点关注对中老年人群HTLV⁃I 的筛查和预防。