饲料中维生素E不同添加水平对香鱼仔稚鱼生长性能及抗氧化酶活力的影响

2021-07-09 06:16王旭李娟
饲料工业 2021年12期
关键词:胰脏成活率抗氧化

■王旭李娟

(辽东学院农学院,辽宁丹东 118003)

香鱼(Pelteobagrus fulvidraco)属鲑形目、香鱼科、香鱼属,是我国广泛分布的小型一年生淡水名贵鱼类[1]。由于野生资源的不断减少和人工苗种繁育技术的突破,香鱼的人工养殖逐步兴起[2]。在香鱼人工养殖过程中,常存在因饲料成分不能满足其营养需求所导致的仔稚鱼抗病性差、成活率不稳定等问题[3]。因此,研究香鱼仔稚鱼对不同营养成分的需求,通过营养调控提高香鱼仔稚鱼的抗病性和成活率具有重要意义。

维生素E是一种常用的鱼类饲料添加成分,其作为一种脂溶性的生物组织抗氧化剂和自由基清除剂,能够保护细胞膜免受自由基攻击,避免细胞氧化损伤,从而提高鱼类机体抗氧化、抗应激能力,提高机体免疫力及繁殖能力[4]。一些学者的研究表明,维生素E缺乏会引起水产动物食欲不振、饵料利用率降低,抗氧化能力下降和幼鱼死亡率增高等问题[5-10]。本试验在香鱼仔稚鱼基础饲料中添加不同水平的维生素E,探究其对香鱼仔稚鱼成活率、特定生长率、饲料系数及相关抗氧化酶活力的影响,以确定香鱼仔稚鱼饲料中维生素E的适宜添加量,为香鱼仔稚鱼养殖阶段的营养需求提供参考数据。

1 材料与方法

1.1 试验用鱼

试验用鱼取自丹东市水产研究所繁育中心,暂养7 d后,挑选体质健壮、规格整齐的仔稚鱼800尾,放入20个90 L饲养箱中(每箱40尾)饲养,并随机分成5个处理,每个处理4个重复,分别对其进行不同水平维生素E饲料的饲养试验,试验周期为60 d。试验用鱼初始平均体长为(5.22±0.32)cm,平均体重(1.38±0.27)g。

1.2 试验饲料

维生素E醋酸酯干粉(含量50%)购自浙江医药股份有限公司新昌制药厂;鱼粉(蛋白含量>65%)购自青岛翔润水产品开发有限公司;去皮豆粕、鱼油等原料购自丹东东方希望强大动物营养有限公司。

试验以鱼粉、去皮豆粕、小麦粉和豆油等为原料,配制等氮等能的半精制基础饲料,在每千克基础饲料中分别添加0、75、150、225 IU和300 IU维生素E醋酸酯。饲料制作过程中,各原料粉碎过40目筛,混合均匀,由小型制粒机在室温下压制成直径2 mm的颗粒饲料,阴干后放入冰箱冷藏备用。实际测得各试验饲料中维生素E的含量分别为8.67、79.34、157.86、229.93 IU/kg和309.27 IU/kg。基础饲料配方及营养水平见表1。

表1 基础饲料配方及营养水平(干物质基础,%)

1.3 养殖管理

试验期间水温保持在(20±2)℃,饲养箱中设一投饵台,每日投喂2次(07:30,16:30)。每10 d对各饲养箱中鱼总质量进行一次称量,以确定各饲养箱投饲量。试验1~30 d,日投饲量为鱼体重的6%。试验31~60 d,日投饲量为鱼体重的5%。每次投喂前用虹吸法清除饲养箱中粪便并记录有无死鱼及死亡鱼的质量,投喂1 h后收集残饵并烘干称重。每日换水1/2左右,保持水质清新。全天充气,溶解氧保持在7.0 mg/L以上。为防止试验鱼受惊扰,饲养箱用深色布遮盖。

1.4 成活率、特定生长率及饲料系数的测定

试验起始和结束时,分别对各试验组香鱼进行记数、称重。参照杨雨生等[11]的方法计算成活率、特定生长率及饲料系数。

成活率(SR,%)=(Nt/N0)×100

特定生长率(SGR,%/d)=(lnWt-lnW0)/t×100

饲料系数(FC)=F/(Wt-W0)

式中:N0、Nt——试验初、末鱼尾数(尾);

Wt——终末体重(g);

W0——初始体重(g);

t——试验天数(d);

F——饲料摄入干重量(g)。

1.5 肝胰脏中抗氧化酶活力及维生素E含量的测定

试验结束后,每个重复随机选取5尾试验鱼取肝胰脏,置于-80℃超低温冰箱保存。参照魏玉婷等[12]的方法制备肝胰脏组织上清液用于抗氧化酶活力及维生素E含量测定。肝胰脏中维生素E含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力测定采用南京建成生物工程研究所试剂盒并参照赵红霞等[13]和吴代武等[14]方法进行。

1.6 数据处理分析

应用软件SPSS18.0对数据进行单因素方差分析,同时进行LSD多重比较,分析试验数据差异显著性,结果以“平均值±标准差(Mean±SD)”表示,以P<0.05为差异显著水平。

2 结果与分析

2.1 维生素E对香鱼仔稚鱼成活率、特定生长率及饲料系数的影响(见表2)

表2 维生素E对香鱼仔稚鱼成活率、特定生长率及饲料系数的影响(n=4)

如表2所示,饲料中不同水平的维生素E对香鱼仔稚鱼的成活率有影响,添加维生素E的各组成活率均显著高于未添加组(P<0.05),其中150 IU/kg添加组成活率最高,达到91.25%。饲料中不同水平的维生素E对香鱼仔稚鱼的特定生长率和饲料系数均未表现出显著影响(P>0.05)。

2.2 维生素E对香鱼仔稚鱼肝胰脏抗氧化酶活力的影响(见表3)

表3 维生素E对香鱼仔稚鱼肝胰脏SOD、CAT和GSH-Px活力的影响(n=4,U/mg prot.)

从表3可知,与对照组相比,饲料中维生素E的添加对肝胰脏中SOD活力有显著影响,随着维生素E添加量升高SOD活力呈现上升趋势,但添加量大于225 IU/kg后,SOD活力不再升高,150、225 IU/kg和300 IU/kg添加组之间SOD活力差异不显著(P>0.05)。肝胰脏组织中CAT活力随饲料中维生素E添加水平升高总体呈现逐渐上升趋势,但75 IU/kg添加组与对照组之间差异不显著(P>0.05),150、225 IU/kg添加组和300 IU/kg添加组的CAT活力显著高于对照组(P<0.05),300 IU/kg试验组的CAT活力最高。与对照组相比,饲料中维生素E添加可以显著提高香鱼仔稚鱼肝胰脏组织中GSHPx活力(P<0.05),但75、150、225 IU/kg和300 IU/kg添加组之间GSH-Px活力无显著差异(P>0.05)。

2.3 维生素E的添加对香鱼仔稚鱼肝胰脏中维生素E含量的影响(见表4)

如表4所示,香鱼仔稚鱼肝胰脏中维生素E含量受饲料中维生素E水平变化的影响,75 IU/kg添加组与对照组差异不显著(P>0.05),当饲料中维生素E含量达到150 IU/kg后,肝胰脏中维生素E的含量随着添加量的增加而显著增加(P<0.05)。

表4 饲料中维生素E水平对香鱼仔稚鱼肝胰脏中维生素E含量的影响

3 讨论

3.1 饲料中维生素E水平对香鱼仔稚鱼成活率及其生长性能的影响

从本试验结果来看,饲料中添加不同水平维生素E可以显著提高香鱼仔稚鱼的成活率。维生素E的添加对香鱼和其他鱼类仔稚鱼成活率的提高可能与维生素E清除自由基保护含磷脂生物膜的抗氧化能力的发挥,增强幼鱼对疾病的抵抗力和对不良环境的适应性有关[15-17]。另外,本研究中维生素E的添加对香鱼仔稚鱼特定生长率和饲料系数的影响不显著,表明维生素E不具有促进香鱼仔稚鱼生长的作用。这与陈聘等[18]对黄颡鱼幼鱼的研究结果一致,但与文华等[19]对施氏鲟幼鱼和何敏[20]对斑点叉尾鮰的研究结果不同。造成此结果差异的原因,一方面可能是由于不同鱼类其自身特性不同,另一方面可能是由于香鱼仔稚鱼生长较慢,在60 d的试验周期里增重不明显所致。

3.2 饲料中维生素E水平对香鱼仔稚鱼肝胰脏中抗氧化酶活力的影响

SOD、CAT和GSH-Px是动物体内清除自由基的关键酶,这三种抗氧化酶的酶活力变化能较准确地反映机体内抗氧化系统的情况,可以以此来评价机体的抗氧化能力[21-24]。由于香鱼仔稚鱼个体小,无法取血制备血清进行抗氧化酶活力检测,试验测定了肝胰脏组织中的三种抗氧化酶活力。结果表明,饲料中维生素E的添加提高了香鱼肝胰脏中SOD、CAT活力和GSH-Px活力。由此试验结果可知,维生素E的添加可在一定程度上提高香鱼仔稚鱼机体的抗氧化能力,这也是维生素E添加能显著提高香鱼仔稚鱼成活率的主要原因。这与蔡中华等[25]对鲤鱼和何敏[20]对斑点叉尾鮰的研究结论一致,但与Lygren等[26]对大西洋鲑的研究结论不同,结果差异可能与研究动物种类、器官组织、饲喂方式及其他饲养条件不同有关。

3.3 饲料中维生素E水平对香鱼仔稚鱼肝胰脏中维生素E含量的影响

研究表明,肝脏内维生素E的累积与调节外界环境应激存在相关性,当鱼体受到应激后,肝脏中储存的维生素E可能被释放至血液中,缓解机体因应激所受氧化胁迫而导致抗氧化物质含量的下降[17,27]。本试验测定了香鱼仔稚鱼肝胰脏中维生素E的含量,结果表明,肝胰脏中维生素E含量随饲料中维生素E添加水平的提高而增高,这与张艳亮[28]对云纹石斑鱼幼鱼的研究结论相吻合。

4 结论

综上所述,饲料中维生素E的添加可提高香鱼仔稚鱼的成活率和肝胰脏中抗氧化酶活力及维生素E含量。根据本试验数据及降低饲料生产成本等因素考虑,建议香鱼仔稚鱼饲料中维生素E的添加水平为150 IU/kg。

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