23%溴氰虫酰胺·三氟苯嘧啶悬浮剂高效液相色谱分析

李广泽，王 芳，戴兰芳，李欧燕

(深圳诺普信农化股份有限公司,广东深圳 518102)

三氟苯嘧啶(triflumezopyrim)是美国杜邦公司开发的一种新型介离子类杀虫剂，作用于烟碱型乙酰胆碱受体正构结合位点，抑制乙酰胆碱受体。与现有药剂不存在交互抗性，安全性好，选择性强，对稻飞虱特效且持效期长，是吡蚜酮之后防治稻飞虱的最佳药剂品种。

溴氰虫酰胺(cyantraniliprole)是继氯虫苯甲酰胺后杜邦公司开发的第二代鱼尼丁受体抑制剂类杀虫剂，通过激活靶标害虫的鱼尼丁受体释放横纹肌和平滑肌细胞内贮存的钙离子，导致肌肉运动失衡、肌肉麻痹，最终导致害虫死亡。其杀虫谱更广，对鳞翅目、鞘翅目和半翅目等害虫均有良好杀虫效果，且兼具触杀与内吸性，市场前景广阔[1]。

23%溴氰虫酰胺·三氟苯嘧啶悬浮剂复配制剂以二化螟和稻纵卷叶螟等鳞翅目害虫及稻飞虱为防治靶标，具有降低用工成本、方便省事等优点，符合国家环保减量要求，是一种广谱高效绿色杀虫剂。

目前，溴氰虫酰胺原药[2]和可分散油悬浮剂[3]中有效成分分析方法已有报道， 10%三氟苯嘧啶悬浮剂[4]和20%三氟苯嘧啶水分散粒剂的高效液相色谱分析方法也有报道[5]，但关于溴氰虫酰胺和三氟苯嘧啶混配制剂的分析方法尚未公开报道。本文采用反相高效液相色谱，使用ODS-BP反相柱和可调波长紫外检测器，对溴氰虫酰胺和三氟苯嘧啶同时进行分析和定量。该方法简便快速，分离效果好，准确度和精密度均达到定量分析的要求，适用于产品的质量分析。

1 试验部分

1.1 试剂和溶液

乙腈(色谱纯)、磷酸(分析纯)、水(超纯水，电阻率18.2 MΩ·cm)、溴氰虫酰胺标准品(质量分数99.2%)、三氟苯嘧啶标准品(质量分数98.8%)均由杜邦公司提供；23%溴氰虫酰胺·三氟苯嘧啶悬浮剂由深圳诺普信农化股份有限公司提供。

1.2 仪器

U3000型高效液相色谱仪配DAD检测器、紫外检测器和自动进样器，变色龙色谱工作站(美国赛默飞世尔科技有限公司)；SinoChrom ODS-BP色谱柱(大连依利特分析仪器有限公司，200 mm×4.6 mm，内装5 µm填充物)；过滤器及滤膜(孔径0.22 µm，天津津腾科技有限公司)。

1.3 高效液相色谱操作条件

检测器：紫外检测器；流动相：乙腈+0.05%磷酸水(40+60，体积比)；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：260 nm；进样体积：5 μL。在该色谱条件下，三氟苯嘧啶和溴氰虫酰胺的保留时间分别约为6.7 min和11.5 min。

溴氰虫酰胺、三氟苯嘧啶及其混剂样品的典型液相色谱图见图1和图2。

图1 溴氰虫酰胺和三氟苯嘧啶混合标样的高效液相色谱图

图2 23%溴氰虫酰胺·三氟苯嘧啶悬浮剂试样的高效液相色谱图

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的配制

分别称取溴氰虫酰胺标样0.08 g、三氟苯嘧啶标样0.05 g (精确至0.000 02 g)于同一50 mL容量瓶中，加入30 mL乙腈超声溶解，冷至室温后用乙腈定容至刻度，摇匀。用移液管移取上述溶液10 mL于50 mL容量瓶中，乙腈定容，过滤备用。

1.4.2 试样溶液的配制

称取试样0.12 g(精确至0.000 02 g)于50 mL容量瓶中，加入30 mL乙腈超声溶解，冷至室温后用乙腈定容至刻度，摇匀，过滤备用。

1.4.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，待相邻2针三氟苯嘧啶和溴氰虫酰胺标样溶液的峰面积相对变化小于1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.4.4 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中三氟苯嘧啶和溴氰虫酰胺的峰面积，分别进行平均。三氟苯嘧啶和溴氰虫酰胺的质量分数ω(%)，按式(1)计算：

式中：A1为标样溶液中三氟苯嘧啶或溴氰虫酰胺峰面积的平均值；A2为试样溶液中三氟苯嘧啶或溴氰虫酰胺峰面积的平均值；m1为三氟苯嘧啶或溴氰虫酰胺标样的质量，g；m2为试样的质量，g；P为标样中三氟苯嘧啶或溴氰虫酰胺的质量分数，%；5为标准溶液的稀释倍数。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

溴氰虫酰胺和三氟苯嘧啶的紫外波长扫描图分别见图3和图4。从图中可以看出，溴氰虫酰胺的最大吸收波长为197 nm附近，次吸收波长在265 nm附近；三氟苯嘧啶的最大吸收波长在20 5 nm附近，次吸收波长在233 nm附近。考虑到200 nm附近溶剂吸收可能会对分析造成影响，因此将检测波长选为260 nm。

图3 溴氰虫酰胺紫外光谱图

图4 三氟苯嘧啶紫外光谱图

选用SinoChrom ODS-BP 200 mm×4.6 mm(id)反向柱作为分析色谱柱。分别使用甲醇、乙腈、水、磷酸水作为流动相对试样进行检测分析。结果发现，乙腈与磷酸水组合作为流动相时被试物的峰型对称性最好，而用0.05%磷酸水和0.1%磷酸水对分析检测区别不大。通过系列比例试验，最终确定流动相为Ψ(乙腈∶0.05%磷酸水)=40+60(体积比)，流速1.0 mL/min。该条件下，有效成分可以得到很好的分离，基线平稳，峰型对称，分析时间适当。

2.2 分析方法的线性相关性试验

分别称取溴氰虫酰胺标准品0.078 90 g、三氟苯嘧啶标准品0.052 34 g于同一50 mL容量瓶中，乙腈超声溶解定容作为母液。分别移取5 mL母液至10、25、50 mL容量瓶中，再移取1 mL母液至一25 mL容量瓶中，分别用乙腈溶解定容。将5个容量瓶中的混合标样溶液在上述色谱操作条件下进样5 μL进行分析，分别以溴氰虫酰胺或三氟苯嘧啶质量浓度(mg/mL)为横坐标，其相对应峰面积(mAU*min)为纵坐标绘制标准曲线，分别得到其线性方程。当溴氰虫酰胺质量浓度为0.062 6～1.563 8 mg/mL，其线性方程为y=181.976 1x+0.693 5，线性相关系数为1.000 0；当三氟苯嘧啶质量浓度为0.041 4～1.034 2 mg/mL时，其线性方程为y=171.669 9x+0.824 1，线性相关系数为1.000 0。

2.3 分析方法的精密度试验

在相同的色谱条件下，从同一产品中准确称取5个试样，在上述色谱操作条件下进行分析并求平均值、标准偏差和变异系数，结果列于表1。可见，溴氰虫酰胺的标准偏差为0.083 3，变异系数为0.56%；三氟苯嘧啶的标准偏差为0.054 0，变异系数为0.63%。

表1 分析方法的精密度试验结果

2.4 分析方法的准确度试验

取适量已知质量分数的23%溴氰虫酰胺·三氟苯嘧啶悬浮剂试样(14.93%+8.56%) 5份于5个50 mL容量瓶中，分别加入混合标准溶液母液各5 mL，在上述色谱操作条件下进行分析，结果列于表2。可见，溴氰虫酰胺的平均回收率为99.6%，三氟苯嘧啶的平均回收率为100.8%。

表2 分析方法的准确度试验结果

3 结 论

本文采用高效液相色谱技术建立了一种同时测定23%溴氰虫酰胺·三氟苯嘧啶悬浮剂产品中有效成分的方法。该方法具有较高的准确度和精密度，线性关系良好，且操作简便、快速，适于该农药产品质量的控制。