胥 冀,李荣杰,麻明彪,史应萍,杨光能,杜 立,孙载鑫,张应娇,许 彬
昆明市儿童医院检验科,云南昆明 650228
儿童时期腹泻发病率较高,严重威胁着小儿的健康成长。小儿腹泻是由多种病原体引起的,其中病毒感染占85%~90%,细菌及其他感染占0%~15%,病毒感染在腹泻中占重要地位,而诺如病毒(NoV)及轮状病毒(RV)则是众多病毒性致病因子中最重要的两种[1]。病毒性腹泻具有明显的季节性,主要在秋冬两季[2],但随着外界环境的变化,病毒性腹泻季节性高发的界限已经越来越不明显。为了解昆明市儿童医院腹泻患儿NoV和RV感染状况、季节及人群分布情况,本研究对2018年本院收治的2 021例腹泻患儿粪便样本进行NoV和RV病原检测,分析两种病毒感染与年龄的关系等流行病学特征,为本地区儿童腹泻的防治提供科学依据。
1.1一般资料 所有患儿均在家属知情同意下,经本院医学伦理委员会批准后,选取2018年1-12月在本院就诊的2 021例腹泻患儿的临床资料,患儿均来自于昆明地区,年龄最小为出生后26 d,最大为72个月,平均年龄(13±2)个月。纳入标准:(1)年龄≤72个月;(2)72 h内呕吐或腹泻(稀便或水样便≥3次);(3)粪便中不含黏液或血液。诊断标准参照文献[3]。
1.2方法
1.2.1NoV检测 收集3~5 mL符合纳入标准的患儿粪便样本,冷冻于-80 ℃冰箱中,集中待测,吸取0.4 mL粪便样本置于1.5 mL的离心管中,12 000 r/min离心3 min,吸取200 μL样本上清液添加5 μL内标,进行NoV核酸提取。采用 AB7300仪器进行PCR扩增,所有操作严格按照试剂盒说明书制订的标准操作规程进行。所有试剂盒均在有效期内进行使用,所用的检测系统及质控合格。试剂盒购买于湖北朗德医疗科技有限公司。
1.2.2RV检测 所有样本在收集当日采用金标法检测A群RV(胶体金法),严格按照试剂说明书进行操作及结果的判读。所有样本检测当日质控在控,使用的试剂均在有效期内。试剂盒购买于北京万泰生物药业股份有限公司。
1.3统计学处理 采用Excel 2007对病例信息数据进行整理及图表制作,数据处理和统计分析采用SPSS17.0统计软件,计数资料以率表示,组间比较采用χ2检验,P<0.05表示差异有统计学意义。
2.1NoV和RV阳性率 2 021例腹泻患儿粪便样本中,NoV和RV总阳性率为70.06%(1 416/2 021),其中NoV、RV和NoV+RV两种病毒混合感染的阳性率分别为29.29%(592/2 021)、34.83% (704/2 021)和5.93%(120/2 021)。见表1。
2.2流行病学特征
2.2.1流行高峰期分布 NoV和RV全年均有感染,NoV流行高峰期主要集中9-12月,该时间段内NoV阳性数为501例,占总阳性人数的84.6%(501/592),与其他月份总阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=60.138,P<0.05);RV流行高峰期主要集中在1-3月及11-12月,共检出RV阳性数610例,占总阳性人数的86.6%(610/704),与其他月份总阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=148.111,P<0.05);NoV+RV流行高峰期主要集中在1-3月和11-12月,与RV感染时间段分布一致,共检出NoV+RV阳性数101例,占总阳性人数的84.16%(101/120),与其他月份总阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=3.949,P<0.05)。
2.2.2RoV和RV在不同年龄段人群中感染情况 NoV和RV在各年龄段中均能检测到,见表1。其中NoV阳性率较高的年龄段为48~<60个月和12~<24个月,阳性率分别为35.71%和33.97%,NoV阳性率最低的年龄段为36~<48个月,阳性率为17.31%;RV阳性率较高的年龄段为24~<36个月和12~<24个月,阳性率分别为56.96%和53.76%,RV阳性率最低的年龄段为0~<6个月,阳性率为18.45%;NoV+RV阳性率最高年龄段为12~<24个月,阳性率为7.91%。年龄段为0~<24个月的RV阳性率与其他年龄段比较,差异有统计学意义(χ2=4.924,P<0.05),而年龄段为0~<24个月的NoV阳性率与其他年龄段比较差异无统计学意义(χ2=0.129,P>0.05);年龄段为0~<24个月的NoV+RV阳性率与其他年龄段比较,差异有统计学意义(χ2=3.963,P<0.05)。
表1 2018年1-12月本院腹泻患儿不同年龄段NoV和RV检出情况[n(%)]
引起儿童腹泻的病原体有多种,常见的病原体主要为细菌和病毒,但随着抗菌药物有效应用,细菌性腹泻已逐渐得到控制[4],病毒腹泻逐步成为儿童腹泻的主要病因[5],而NoV及RV则是病毒性腹泻的主要病原体。
本研究结果显示,腹泻患儿NoV及RV总阳性率为70.06%,其中NoV、RV和NoV+RV两种病毒混合感染的阳性率分别为29.29%、34.83%和5.93%。本院RV阳性率低于文献[6-7]报道结果,但高于文献[8-9]报道结果。而NoV阳性率低于文献[10]报道结果,高于文献[4,11-12]报道结果,这可能与昆明地区四季如春,有利于病毒的繁殖有关。此外,本地区NoV+RV阳性率高于陈惠芳等[13]报道结果,低于陈玲霞等[14]报道结果,昆明地区NoV与RV混合感染在病毒性感染性腹泻中是不可忽视的问题,是否会加重病情及发病机制有待于进一步更深入的研究。
本研究NoV流行高峰主要在9-12月,而RV及NoV+RV混合感染的流行高峰主要在1-3月和11-12月,与国内报道结果基本一致[3,8,13-14],但NoV感染性腹泻与文献[15]报道的其多发于冬、春季节有差别,可能与饮食习惯及气候有关。因此,加强NoV及RV监测,防止其暴发流行,尤其在腹泻流行高峰期,应加强对学校、医院等集体机构食物和水源的监控和管理,开展有针对性的健康教育。
本研究结果显示,年龄段为0~<24个月的RV阳性率与其他年龄段比较,差异有统计学意义(P<0.05);年龄段为0~<24个月的NoV+RV阳性率与其他年龄段比较,差异有统计学意义(P<0.05),与国内多地报道结果一致[2,8,16],但本研究NoV阳性率最高的年龄段为48~<60个月,可能与本研究中该年龄段患儿数量较少有关,需要进一步行大样本检测。因此,病毒性腹泻患儿应以2岁婴幼儿为重点监测对象,尤其是RV及NoV+RV混合感染,同时加大48~<60个月患儿NoV样本的监测。
综上所述,本院腹泻患儿中NoV及RV阳性率较高,且具有流行病学特征,RV及NoV+RV混合感染好发于2岁以下患儿,本研究对积累相关资料,为当地儿童腹泻防治工作提供了可靠依据。