非小细胞肺癌患者血清Periostin表达水平及其诊断价值

尹小波 赵靖 刘菲菲 罗坤 牛春密 王晓杰 田祺 石珊珊 宋丽英 徐淑凤

秦皇岛市第一医院呼吸与危重症医学一科 066000

Periostin又称为成骨细胞特异性因子2，是一种细胞外基质分泌性蛋白，其在骨组织中呈高表达，并与心脏发育和心脏疾病密切相关[1]。研究发现，Periostin在多种肿瘤实体或细胞系中呈高表达，如肺癌、食管癌、胃癌、结肠癌等[2-3]。Periostin通过促进肿瘤细胞存活、迁移、侵袭及血管生成，从而增强肿瘤转移能力，提示其可能成为肿瘤诊断及治疗新的靶点[4]。研究发现，非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)患者血清Periostin水平增高，有可能作为肿瘤转移和术后复发的预测指标[5]。本研究通过检测NSCLC患者血清Periostin的表达水平，分析其与肺癌临床病理特征的关系，进一步探讨其在肺癌诊断中的应用价值。

1 对象与方法

1.1 一般资料 前瞻性研究。选取2018年4月至2019年11月在秦皇岛市第一医院收治的50例NSCLC患者作为肺癌组。其中，男38例，女12例；年龄(61.4±10.3)岁，年龄范围为45～74岁。纳入标准：(1)所有患者经影像学检查发现，最终病理学确诊为NSCLC；(2)术前未行放化疗或其他生物免疫治疗；(3)经秦皇岛市第一医院伦理委员会批准(2020B021)，患者知情同意，自愿参加。50例NSCLC患者中，鳞癌21例，腺癌29例；根据国际抗癌联盟2009年修订的肺癌TNM分期标准(第七版)进行分期：Ⅰ～Ⅱ期13例，Ⅲ～Ⅳ期37例；无淋巴结转移11例，有淋巴结转移39例。

肺部良性病变患者20例，其中男13例，女7例；年龄(58.6±8.2)岁，年龄范围为31～67岁；肺炎球菌性肺炎8例，肺炎克雷伯菌肺炎6例，支气管扩张5例，支原体肺炎1例。

另选取同期健康体检者20名作为正常对照组，其中男13名，女7名；年龄(57.3±12.4)岁，年龄范围为32～68岁。3组性别、年龄比较，差异均无统计学意义(P值均＞0.05)。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 采集受试者空腹静脉血3 ml，500×g离心15 min，取上清液并标记，在-80℃冰箱保存，集中待测。

1.2.2 血清Periostin检测 人Periostin酶联免疫吸附法试剂盒购自北京易科攀搏生物科技有限公司。采用酶联免疫吸附法，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 统计学分析 采用SPSS 18.0软件进行数据分析，计量资料以x-±s表示，两组间比较采用t检验；多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用SNK-q检验法；绘制受试者工作特征曲 线(receiver operating characteristic curve，ROC)，计算出曲线下面积(area under the curve，AUC)，以约登指数最大值对应的检测值作为截断值，计算敏感度和特异度。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清Periostin水平比较 3组血清Periostin水平比较，差异有统计学意义(F=21.157，P＜0.01)；进一步两两比较，肺癌组血清Periostin水平高于肺部良性病变组(P＜0.01)和正常对照组(P＜0.01)，肺部良性病变组略高于正常对照组，差异无统计学意义(P＞0.05)。见图1。

图1 3组血清Periostin水平比较

2.2 血清Periostin与NSCLC临床病理特征的关系 肺癌组血清Periostin水平与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移有关(P值均＜0.05)，与性别、年龄、分化程度、病理类型无关(P值均＞0.05)。见表1。

表1 血清Periostin水平与NSCLC临床病理特征的关系(±s)

表1 血清Periostin水平与NSCLC临床病理特征的关系(±s)

项目 例数 Periostin水平(mg/L) t值 P值年 龄 0.379 0.706≥60岁 27 35.45±10.50＜60岁 23 34.34±10.02性 别 0.560 0.248男31 33.63±10.93女19 37.08±8.72病理类型 0.701 0.487鳞癌 21 36.13±11.94腺癌 29 34.08±8.84分化程度 0.844 0.403高分化 20 36.43±12.07中低分化 30 33.94±8.81 TNM分 期 2.095 0.042Ⅰ～Ⅱ期 13 30.01±9.96Ⅲ～Ⅳ期 37 36.67±9.82淋巴结转移 3.340 0.002无11 26.69±4.85有39 37.27±10.12肿瘤大小 2.968 0.005≥3 cm 34 37.66±10.08＜3 cm 16 29.15±7.94

2.3 血清Periostin诊断肺癌的效能 血清Periostin诊 断 肺 癌 的AUC为0.880(95%CI：0.812～0.949，P＜0.001)，当 截 断 值 为27.84 mg/L时，敏感度和特异度分别为78%和85%。见图2。

图2 血清Periostin诊断肺癌的受试者工作特征曲线

3 讨论

肺癌是常见的恶性肿瘤之一，其发病率和病死率高[6]。肺癌主要分为小细胞肺癌与NSCLC两大类型，85%新诊断肺癌为NSCLC，15%为小细胞肺癌[7]。由于大部分肺癌患者发现时已属晚期，因此丧失了手术切除的机会，而只能接受放化疗等治疗[8]。尽管医疗技术不断发展，但NSCLC患者的5年生存率仍不到15%[6]。由于NSCLC患者预后不良，因此，寻找新的血清生物标志物或治疗靶点，从而早期发现诊断、及时治疗，对于改善患者预后具有重要的意义。

研究显示，Periostin在炎症微环境如哮喘、动脉粥样硬化、肺间质纤维化，以及肿瘤的发展中起着重要的作用，在炎症及肿瘤中表达水平增高[9-10]。研究证实，Periostin与整合蛋白相结合，激活Akt/PKB和FAK介导的信号通路，延长肿瘤细胞生存时间，促进血管生成，肿瘤侵袭、转移[11]。提示Periostin可能与肿瘤的恶性程度、转移及预后有关。Periostin参与肿瘤的发病机制尚不十分清楚。研究发现，Periostin基因沉默的人类肺癌细胞系A549细胞表现出细胞增殖减少，对顺铂化疗敏感性升高，同时降低了细胞侵袭能力[12]。Periostin通过激活Stat3和Akt，上调存活素表达，增强了A549细胞的顺铂耐药性[13]。上皮间质转化是肿瘤侵袭转移的重要机制，研究证实，Periostin可通过上皮间质转化促进A549细胞增殖和迁移，Periostin是上皮间质转化的标志，同时也是高致瘤性细胞促进肿瘤进展的一个特征[14]。

早期的研究证实，正常健康的肺组织存在Periostin表达，而在肺癌组织其表达水平增高[15-16]。有研究报道，通过质谱分析在肺腺癌恶性胸腔积液中有Periostin表达，并且在NSCLC中血清Periostin表达水平明显高于正常对照，为阐明NSCLC发病机制、筛选其早期诊断标志物提供有益的思路[17]。本研究发现，肺癌组血清Periostin水平明显高于肺部良性病变组和正常对照组，肺部良性病变组略高于正常对照组(P值均＜0.05)，与蔡三立和刘刚[5]研究报道相一致。说明，Periostin在肿瘤环境下表达水平增高。因此，Periostin可能参与了肿瘤的发生、发展过程。

目前已有的研究对血清Periostin水平与NSCLC临床病理特征的关系尚无一致的结论。Murakami等[18]研究发现，血清Periostin水平在NSCLC与正常对照之间差异无统计学意义，并且与性别、肿瘤分期、骨转移、淋巴结转移无关，但术后4周血清Periostin水平明显降低，血清Periostin水平是NSCLC患者独立的预后因素。蔡三立和刘刚[5]研究显示，NSCLC患者血清Periostin水平与年龄、性别、病理类型及病理分级无关，与TNM分期、肿瘤转移有关，术后复发患者血清Periostin水平明显高于未复发患者。Soltermann等[16]研 究 发 现，Periostin水 平 是NSCLC无进展生存率的预后因子，与组织学类型、TNM分期、肿瘤大小、血管浸润及性别有关。本研究结果显示，肺癌组血清Periostin水平与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移相关(P值均＜0.05)。以上研 究表明，血清Periostin水 平 与NSCLC患者的恶性程度、转移及预后有关，在肺癌的发生、发展中起到重要的作用。Xu等[17]研究报道，NSCLC患者的血清Periostin水平高于健康对照组和肺部良性病变患者，当截断值为30.87 mg/L，区分NSCLC和肺部良性病变的敏感度和特异度为48.6%和91.7%，区分NSCLC患者和健康对照组的敏感度和特异度为97.5%和51.4%。Kaplan-Meier分析显示，高血清Periostin水平组无进展生存期和总生存期更低。Cox回归分析表明，血清Periostin是NSCLC患者预后的一个独立危险因素。本研究结果显示，血清Periostin诊 断肺癌的AUC为0.880，截断 值 为27.84 mg/L时，敏感度和特异度分别为78%和85%，具有良好的诊断价值。推测，血清Periostin可被视为NSCLC患者的诊断和预后标志物。

综上所述，NSCLC患者血清Periostin水平增高，与NSCLC肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移相关。血清Periostin作为新的肿瘤标志物对于肺癌具有良好的诊断价值，可用于判断肺癌恶性程度、转移倾向和预后。本研究不足之处在于单中心研究，且样本量偏小，不可避免对结果产生一定的偏倚，对于部分肺癌手术患者未能进行手术前后血清Periostin的比较。未来的研究工作将进一步扩大样本量，与其他肿瘤标志物联合检测，分析其对肺癌的诊断价值，并进行随访，比较复发与未复发患者血清Periostin的差异，并分析对生存时间的影响，从而阐明其在预后判断的价值。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突