高效液相色谱法快速检测在乳品检测中的应用

秦思文

摘 要：随着社会市场经济的大力发展，人们对更高品质的生活有着更强烈的追求，在日常生活中，对营养的补充也是非常重要的。不少人会选择通过乳制品来补充蛋白质等营养物质，在乳制品中有一款产品就是酸奶，酸奶在牛奶的基础上增加了风味，其本质就是多了一种有机酸，而有机酸的存在就能有效抑制有害菌种的产生，同时还提高了酸奶的口号，因此，为保证乳制品的食品安全，必须进行有机酸的相关检测工作。

关键词：高效液相色谱法;乳制品检测;有机酸

为提高乳制品的食品安全品质，会采用当前科学权威的检查方法，对乳制品中有机酸的成分进行检测。现目前常用的检测方法有以下三种，即离子色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法。本文主要针对高效液相色谱法检测乳制品进行详细分析，得出该方法是当前检测方法中操作最为简单，同时兼具极高的准确度。因此，该方法是乳制品行业应用最广泛的检测途径，并且可以同时完成9种有机酸的检测，在市面上具有超高的实用价值。

一、通过高效液相色谱法检测所需要的材料及检测方法

1、检测中所需要用到的相关仪器

在进行高效液相色谱法检测乳制品的过程中，通常会使用到以下几种仪器，其中包括高效液相色谱仪（ PE -200型）超声、波振荡仪（ KQ -250型）可见分光光度计（ UV -260）离心机。

2、检测中所需要用到的相关试剂

所需运用的实验试剂来检测乳制品中存在有机酸的成分，其中包括乳酸，乙酸、柠檬酸，草酸、酒石酸、丁二酸、丙酸等，将这些试剂日常用于冰箱保存，作为后期检测中所需的贮备液。

3、检测时具体的实验方法及步骤

首先是需要满足色谱条件，将色谱柱设置为C18桂（5u m .250×4.6mm），其中所需的桂温：25C;流动相：甲醇：0.01mol/ L （ NH ） HO 緩冲溶液pH2.8;流速：0.7m1/mnin：可见光一紫外检测器，检测波长215rm。

另外还需通过对检测样品进行处理和测定，选择实验所需的酸奶，将其重量摄取为2g，将其存放于10ml的比色管中，再通过超纯水将其稀释至10ml，将比色管摇匀后进行超声脱气，在已备好的样品中取出400 u L .稀释酸奶于 Eppendof 管中，再在其中加入100 u L 超纯水和3.5mol/ L 高氯酸25uL，将其混匀，再对其进行离心（12000r/ m ，6min），通过以上几个步骤，使得乳制品中的蛋白成分被充分的沉淀，之后再取上清液过0.45u m 滤膜作为样液。样液及自制的混合标准应用液均取10uL，在相同特定的时间内，观察其数量的变化并制定标准的曲线图来判断其量变的效果。

二、对已检测到的实验结果进行深入的研究

当前市面上采用的高效液相色谱法进行乳制品检测，该方法凭借着操作简单，结果准确优点得到乳制品相关行业的广泛应用，高效液相色谱法检测主要是从1970年开始得到全面快速的发展。具体实验操作中，根据不同的分离机制，可以将高效液相色谱法分为以下几种，不同的类型液周色谱法、液相色谱法、离子交换色谱、离子色谱。色谱法应该得到更多更广泛的应用。

具体高效液色谱法所具备的优点和特点如下：

1、高效液相色谱法需要超高的电压

在高效液相色谱法具体的实验中，需要将液体作为流动相的载体，让液体流通色谱柱，需要更大的高电压来辅助完成，促使液体流过的压力较大且速度较快，一般会给予液体的压力为150-350x105pa。

2、高效液相色谱法需要超高的速度及效率

在被检测的样品中，每一个液体都受着高压的影响，导致其流速非常的快，并迅速抵达色谱柱，由于速度过快，因此给与分析所需的时间，就与其他经典液相不足相比要短暂很多。由于速度较快，所以就给后期判断分析的时间较短，因此，需要高效液相色谱柱的效率非常的高。最高可达超过30000板/ m 。

3、高效液相色谱法具有较高的灵敏度和分辨率且适用范围较广

在进行高效液相色谱法快速检测乳制品的应用时，由于本身所需要的相关检测设备具有较高的灵敏度，设备通过设置后可进行自动操作，且具有较高的分析精度，在进行检测的过程中，需要采样的样本量较少。在检测的具体过程中，由于其具有较高的分辨率，所以可以直接将机器设置为固定象，这样在流动性经过时可以达到最佳的分离效果。高效液相色谱法还具有一个非常理想的使用特点，就是其具有较广的适用范围，基本市面上70%以上的有机化合物均可以使用高效液相色谱法来完成物质含量的分析，尤其是分析物质具有高沸点、大分子、极性强、热稳定性差的特点，仍然可以通过高效液相色谱法完成分离和分析，展现出高效液相色谱法在乳制品行业中检测的优点。

但高效液相色谱法在检测中也具有一定的缺点。例如，前文所提到的高效液相色谱法的液体在流向色谱柱时，需要借助较高的电压来辅助完成，另外就是在色谱柱与检测器之间，如果流动相的流行发生任何的变化，那么，分离物质就会进行相应的扩散，这样会造成色谱数据采集的变化显著，从而影响结果的准确率。

高效液相色谱法会根据分离机制的不同，而分为不同的类型，首先，因为分配色谱固定相是液体，不同的液体对于样品的溶解能力有所不同，因此，在进行分配系数时存在着差异。在固定相和流动相的选择中，当固定项选择确定后，通过使用不同极性溶剂作为其流动性来判断每一次样本实现分离的现象。

三、结束语

在完成乳制品检测的过程中，需要通过相关试剂来将乳制品中的蛋白质含量进行沉淀，如果在试剂的选择上不够专业，将会使得检测的操作步骤较多，使得检测较为繁琐，因此，更多的是采用3.5mol/ L 高氣酸来沉淀乳制品中的蛋白质成分，这样可以在一定程度上简化了操作步骤，并且不影响后期的检测数据。综上所述，采用高效液相色谱法在乳制品中的检测已得到市面上的广泛应用，通过此方法，可以很好的避免食品卫生安全问题的发生，具有较高的市场使用价值。

参考文献：

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