当地羊小反刍兽疫血清学免疫抗体调查

蒋泽敏

（贵州省平塘县农业农村局 558300）

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性病毒性传染病，主要感染小反刍动物，以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征。由于小反刍兽疫发病率高、死亡率高，暴发后传播迅速，如不采取有效措施，能造成巨大经济损失，使防治工作更加复杂，因此，小反刍兽疫已成为世界各国重视的疫病之一。笔者通过ELISA方法对2020年5月至11月期间当地抽检的羊免疫血清进行了小反刍兽疫抗体检测和分析。

1 材料与方法

1.1 被检血清

2020年4月至12月由当地抽检的305份羊免疫血清，其中200份来自10个规模养羊场，105份来自10个散养户，被检血清按规模场和散养户进行小反刍兽疫免疫抗体检测。

1.2 检测试剂

小反刍兽疫病毒抗体检测ELISA试剂盒（间接法），试剂盒为无锡优联生物科技有限公司产品。

1.3 操作方法

（1）取出抗原包被板加洗涤液洗涤拍干，记录好样本的位置。（2）在血清稀释板中按1∶40稀释待检样品、1∶4稀释对照血清。（3）将稀释好的待检血清、阳性对照、阴性对照按每孔100μL加入抗原包被板中。（4）每次试验均设置阳性对2孔、阴性对照2孔。（5）轻微震荡混匀，盖上封板膜，置37℃温育30min。（6）甩掉板孔中的溶液，每孔加入洗涤液200μL，甩去孔内溶液，以上步骤重复5次，最后在干净吸水纸上拍干。（7）每孔加酶标抗体100μL，盖上封板膜，置37℃温育30min。（8）甩掉板孔中的溶液，洗涤5次，洗涤方法同（6）。（9）每孔加显色液A 50μL,再加显色液B 50μL，室温（20℃～25℃）闭光反应10min。（10）每孔加终止液50μL，10min内测定结果（对照的吸光度OD630nm）

1.4 结果判定

检测结果判定：阳性对照孔OD630nm值均应≥0.6，阴性对照孔OD630nm值均应≤0.3,实验成立，否者实验不成立。小反刍兽疫免疫抗体检测结果根据S/P=样品OD630nm值/阳性对照OD630nm平均值≥03时被检样品判为阳性；当S/P<03时被检样品则判为阴性。

2 结果与分析

2.1 规模化养羊场抗体检测结果

对当地送检的规模化羊场血清进行小反刍兽疫抗体检测。检测结果表明，规模羊场送检 200份血清，阳性血清176份，合格率88%，其中有7个规模化羊场的合格率达90%以上。

表1 规模化羊场小反刍兽疫抗体检测结果

2.2 散养户抗体检测结果

对抽检的散养户羊血清进行小反刍兽疫抗体检测。检测结果表明，散养户抽检的105份血清，阳性血清67份，合格率64.5%，其中只有6户的合格率达70%以上。

表2 养羊散养户小反刍兽疫抗体检测结果

3 小结与讨论

此次试验采用的ELISA试剂盒，灵敏性高、特异性强、稳定性良好，使检测结果更加可靠准确，真实的反应了当地小反刍兽疫免疫抗体水平高低，为动物防疫工作提供可靠的依据。

通过对送检的10个规模场，10个散养户的305份血清进行了检测，小反刍兽疫免疫抗体合格率为79.67%，总体达到农业部规定的70%以上。虽然规模养殖场的免疫合格率为88%，但散养户的免疫合格率只为64.5%，规模养殖场高于散养户。可见规模养殖场对防疫比较重视，免疫规范，科学养殖。散养户免疫不理想，养殖方式传统，对防疫不够重视。

此次血清学免疫抗体的检测调查，准确地掌握了当地各养羊场（户）的免疫效果，然后对疫情进行预警预报和风险评估，最后对免疫效果不佳的养羊场（户）制定科学的补免程序，有效的指导了当地养羊场（户）科学的养殖。