基于血管活性因子特性探讨从脾论治ITP止血机制

王珺 张雅月 王佳 王冲 陈科 陈信义 郎海燕

摘要 目的：基于血管活性因子特性探討“从脾论治”ITP疗效机制。方法：以被动型免疫造模法建立ITP小鼠模型，以强的松、健脾益气方、健脾益气摄血方、归脾汤为干预药物，酶联免疫吸附法（ELISA）检测模型小鼠血清ET-1、NO、NOS3、TXA2、PGI2、vWF、VCAM-1、TM含量。结果：1）升血小板疗效：与正常对照组比较，注射APS后各组小鼠外周血PLT计数明显下降（P<0.01）;与模型对照组比较，给药第8天各组小鼠外周血PLT计数明显升高（P<0.01）。2）止血疗效：给药前除正常对照组外，实验各组均有不同程度出血倾向;给药第6天、第8天，与模型对照组比较，实验各组出血分级下降（P<0.01）。3）血管促凝因子：与正常组比较，各组ET-1检测值明显下调（P<0.01）;与正常对照组、模型对照组比较，实验各组TXA2检测值明显上调（P<0.01）;与正常组比较，实验各组vWF检测值明显下调（P<0.01）;与正常对照组比较，实验各组VCAM-1检测值明显下调（P<0.01）。4）血管抗凝因子：与正常组比较，实验各组NO检测值明显下降（P<0.01）;除归脾汤组外，与正常对照组比较，各组NOS3检测值显示明显下调（P<0.05）;与正常对照组比较，实验各组PGI2检测值明显下调（P>0.01）;与正常对照组比较，实验各组TM检测值明显下调（P>0.05）。结论：从脾论治方升高ITP模型小鼠外周血PLT计数以及有效止血与上调血管促凝因子TXA2、VCAM-1，下调PGI2、TM检测值，平衡促凝与抗凝因子密切相关。

关键词 脾主统血;脾不统血证;从脾论治;健脾益气摄血方;免疫性血小板减少症;血管活性因子;血管促凝因子;血管抗凝因子

Hemostatic Mechanism of “Treated From Spleen” Therapy on ITP Based on the Characteristics of Vasoactive Factors

WANG Jun1，ZHANG Yayue2，WANG Jia3，WANG Chong2，CHEN Ke4，CHEN Xinyi2，LANG Haiyan5

（1 The First Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310006，China; 2 Dongzhimen Hospital，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100700，China; 3 Henan Cancer Hospital，Zhengzhou 450008，China; 4 Shunyi Hospital，Beijing Traditional Chinese Medicine Hospital，Beijing 101300，China; 5 Dongfang Hospital，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100078，China）

Abstract Objective：To explore the ITP hemostatic mechanism of “treating from spleen” therapy based on the characteristics of vasoactive factors.Methods：The ITP mouse model was established by passive immunomodeling method.The prednisone，Jianpi Yiqi Formula，Jianpi Yiqi Shexue Formula and Guipi Decoction were used as intervention drugs.The content of serum ET-1，NO，NOS3，TXA2，PGI2，VWF，VCAM-1 and TM of the model mice were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）.Results：1）Therapeutic effect of platelet enhancement：compared with normal control group，PLT count in peripheral blood of mice in each group was significantly decreased after APS injection （P<0.01）; compared with model control group，PLT count in peripheral blood of mice in each group was significantly increased on the 8th day of injection （P<0.01）.2）Hemostasis effect：except for the normal control group，all experimental groups had bleeding tendency to a greater or lesser extent before injection; compared with model control group，the grade of bleeding in experimental groups decreased on the 6th and 8th day of administration （P<0.01）.3）Vascular coagulation factor：compared with normal group，ET-1 detection value in each group was significantly decreased （P<0.01）; compared with normal control group and model control group，TXA2 detection values in experimental groups were significantly increased （P<0.01）.Compared with normal group，VWF detection values in experimental groups were significantly down-regulated （P<0.01）.Compared with normal control group，VCAM-1 detection value in experimental groups was significantly reduced （P<0.01）.4）Vascular anticoagulant factor：compared with normal group，NO detection value in experimental groups was significantly decreased （P<0.01）; Compared with normal control group，NOS3 values in all groups were expressively reduced （P<0.05） except for Guipi Decoction group.Compared with normal control group，PGI2 detection value in experimental groups was significantly cut down （P<0.01）.Compared with normal control group，TM detection values in experimental groups were greatly reduced （P>0.05）.Conclusion：PLT count in peripheral blood of ITP model mice from the treatment of spleen theory is increased，and effectively hemostasis is taken，which has a close correlation between increasing TXA2 and VCAM-1，PGI2 and TM detection values are decreased，and balancing pro-coagulation and anticoagulation factors.

Keywords Spleen governing blood; Splenic failure in controlling blood; Treating from spleen therapy; Jianpi Yiqi Shexue Decoction; Immune thrombocytopenia; Vasoactive factor; Vascular coagulation factor; Vascular anticoagulant factor

中图分类号：R242;R558+.2文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.03.003

免疫性血小板减少症（Immune Thrombocytopenia，ITP）是临床常见的血液系统出血性疾病，主要临床表现为皮肤、黏膜、牙龈、鼻黏膜出血，尿血、便血或月经过多，或月经期长。严重者可有内脏出血。目前，对ITP发病机制尚不完全清晰，公认的发病机制是多因素导致的自身免疫功能紊乱[1-2]。按照中医理论，结合慢性ITP临床特征，其发病是由于脾气虚弱，不能统摄血液而致[3]。因此，“从脾论治”是ITP的基本原则[4-5]。我们在前期临床与实验研究基础上，采用被动免疫造模法复制了ITP动物模型[6-8]，以模型小鼠外周血血小板（Platelet，PLT）计数、出血程度分级与血清内皮素-1（Endothelin-1，ET-1）、血栓素A2（Thromboxane A2，TXA2）、一氧化氮（Nitric Oxide，NO）、一氧化氮合酶NOS3（Nitric Oxide Synthase 3，NOS3）、前列环素（Prostacyclin，PGI2）、血栓调节蛋白（Thrombomodulin，TM）、血管性血友病因子（von Willebrand Factor，vWF）、血管内皮细胞血管细胞黏附分子1（Vascular Cell Adhesion Molecule1，VCAM1）为检测指标。试图从血管活性因子特性角度探索“从脾论治”治疗ITP出血效应机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 豚鼠，100只，雌雄各半，体质量250 g，许可证号：SCXK（陕）2012-001，购于陕西省兴平市天瑞实验动物养殖场，普通环境饲养，室温20～25 ℃，相对湿度50%～60%;BALB/c小鼠，280只，雌雄各半，体质量18～22 g，许可证号：SCXK（陕）2014-002，购于中国人民解放军第四军医大学实验动物中心，SPF级动物实验室饲养，室温20～25 ℃，相对湿度50%～60%。其中，160只用于APS制备，120只用于造模并进行疗效机制研究（伦理审批号：XYLS2019069）。

1.1.2 药物 实验用中药浸膏由西安星华药物研究所按照中药新药药学标准制备并提供，包括：健脾益气摄血浸膏（黄芪、党参、茯苓、白术、阿胶、茜草、炙甘草）;健脾益气浸膏（黄芪、党参、茯苓、白术、炙甘草）;归脾汤浸膏（人参、白术、当归、茯苓、黄芪、龙眼肉、远志、炒酸枣仁、木香、炙甘草）。强的松（上海晶纯生化科技股份有限公司，货号：P116562）。

1.1.3 试剂与仪器 对硝基苯磷酸二钠（上海晶纯生化科技股份有限公司，货号：P118471）;完全弗氏佐剂（Sigma-Aldrich，美国，批号：SLBF2619V）、不完全弗氏佐剂（Sigma-Aldrich，美国，批号：SLBH7317V）;冻干酶联A蛋白（博士德生物，批号：BST07A19B80）;叠氮化钠（派尼化学试剂厂，批号：20140515）;明胶、吐温（科昊生物工程有限责任公司，批号：201409）;小鼠血清ET-1、NO、NOS3、TXA2、PGI2、vWF、VCAM-1、TM试剂盒（武汉基因美生物科技有限公司，批号：201411）。微量高速离心机（长沙湘仪，H1650-W型）;全波长酶标仪（Thermo Fisher，美国，型号：Multiskan GO型）;全自动动物血液分析仪（普朗，型号：XFA6130型）。

1.2 方法

1.2.1 分组与模型制备 从120只小鼠尾静脉取血，用全自动血液分析仪检测血小板计数，并随机分为6组，每组20只，分别为正常组、模型组、强的松组、归脾汤组、健脾益气组和健脾摄血组。按照经典被动免疫造模法制备抗小鼠血小板血清。制备步骤如下：160只BALB/c小鼠麻醉取抗凝全血，梯度离心（1 100 r/min，10 min;3 000 r/min，10 min，离心半径：6 cm）得到血小板，用PBS洗涤2次，重悬，计数，调整浓度至2.5×106/mL，与等量完全弗式佐剂和不完全弗式佐剂分别混合均匀做抗原。含完全弗式佐剂抗原于0周注射于豚鼠足掌、背及皮下，共5点，合计1 mL;含不完全弗式佐剂抗原分别于1、2、4周按上述相同部位、点数、剂量注射。第5周从豚鼠心脏取不抗凝全血，静置后，离心分离获得豚鼠抗小鼠血小板血清（GP-APS）。置于56 ℃水浴30 min灭活，红细胞吸附，用生理盐水稀释成1∶4浓度备用。分离所得小鼠血小板用PBS洗涤3次，并调整浓度至6×104/μL。取50 μL血小板悬液加入酶标孔中，以560×g离心13 min。加入緩冲液（0.2%明胶，0.1%叠氮化钠，0.5%吐温，0.15 mol/LPBS）于4 ℃孵育过夜，洗涤。加入50 μL待测血清，37 ℃孵育1 h，洗涤。加入100 μL酶联A蛋白，于22 ℃孵育45 min，洗涤4次，加入200 μL对硝基苯磷酸二钠（溶于二乙醇胺缓冲液中，浓度1.5 mg/mL），于37 ℃孵育30 min，加入50 μL的1N氢氧化钠中止反应。用酶标仪在405 nm波长下测定OD值。

1.2.2 给药方法 除正常组按100 μL/20 g生理盐水腹腔注射外，实验各组按100 μL/20 g剂量注射APS，1次/d至实验结束。注射APS第8天，除模型组外，其余各组均按照0.1 mL/10 g体积灌胃给药，实验结束后进行各项指标检测。

1.2.3 检测指标与方法

外周血PLT计数检测：注射APS前、注射后48 h、第8天（开始给药）、第12天、第15天，分别从造模小鼠尾靜脉取血，用全自动血液分析仪检测模型小鼠外周血血小板计数。

出血程度分级观察：参照2010年卫生部医政司发布的《免疫性血小板减少性紫癜临床路径》[9]，结合动物实验特点，将出血程度分4级。1）0级：无出血现象。2）Ⅰ级：注射部位轻度出血，其他部位有散在出血点。3）Ⅱ级：注射部位明显出血，并见有其他部位瘀斑、瘀点。4）Ⅲ级：注射部位严重出血，皮肤大量瘀斑、瘀点，或皮肤发黑或破溃。注意在观察出血程度时，要以出血面积与出血点密集程度描述，并关注出血部位、出血开始时间、止血时间、出血色泽、形状等。观察时间点为注射GP-APS第8天（用药前）、注射GP-APS第14天（用药第6天）、注射GP-APS第16天（实验结束）3个时间点动态观察出血分级变化。

血管活性因子检测：实验结束后，各组随机取12只小鼠断颈处死，腹主动脉血，静置后离心，收集血清，按照酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒说明书方法进行各项指标检测。其中，6只小鼠血清用于血管促凝活性因子（ET-1、TXA2、vWF、VCAM-1）检测;6只小鼠血清用于血管抗凝活性因子（NO、NOS3、PGI2、TM）检测。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算相应样品浓度。

1.3 统计学方法

采用SPSS 23.0统计软件进行数据分析，其中计数资料以（%）表示，采用χ2检验，计量资料以（±s）表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 抗血清效价测定

用酶标仪在405 nm波长下测定OD值，APS血清组OD值平均为0.300，空白孔OD值平均为0.163，相差约2倍（P<0.01），证明血清效价正常[4]。

2.2 外周血小板检测

分别从120只小鼠尾静脉取血，按比例稀释后，用全自动动物血液分析仪检测外周血小板计数，结果见表1。

从表1可以看出：1）注射APS前，各组小鼠外周血PLT计数组间比较，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。2）注射APS后48 h至第8天，实验各组小鼠外周血PLT计数与正常组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）。表明已经成功建立血小板减少模型。3）注射APS第8天（开始给药）到12天，实验各组小鼠外周血PLT计数与正常组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）。证明实验小鼠外周血PLT计数依然处于低水平。4）注射后第15天（给药第8天），模型组小鼠外周PLT计数与正常组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01），仍处于低水平。给药各组小鼠外周PLT与正常组比较，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05），证明实验药物可明显提高实验小鼠外周PLT计数。其中，强的松对照、健脾摄血组与归脾汤对照组、健脾益气组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.05）。表明强的松对照、健脾摄血组提升造模小鼠外周血PLT具有明显优势。

2.3 出血程度分级观察

按照观测时间点，以出血分级标准，每组随机观察10只小鼠出血分级变化，结果见表2。

对表2进一步分析表明：1）注射APS第8天，除正常对照组外，实验各组出血程度组间比较，经χ2检验，P=0.998，具有可比性。说明注射GP-APS后各组小鼠均有不同程度出血倾向。2）注射APS第8天开始给药，药物干预第6天，各组出血等级明显下降，与模型对照组比较，经χ2检验，具有统计学意义（P=0.014）。下降幅度从大到小依次为强的松组（P=0.002）、健脾益气摄血组（P=0.003）、归脾汤对照组（P=0.003）、健脾益气组（P=0.021）。药物干预各组组间比较，经χ2检验，差异无统计学意义（P>0.05）。3）药物干预第8天，各组出血等级明显下降，与模型对照组比较，经χ2检验，差异有统计学意义（P=0.000）。出血等级下降幅度从大到小依次为强的松组（P=0.000）、健脾摄血组（P=0.000）、归脾汤对照组（P=0.001）、健脾益气组（P=0.001）。药物干预各组组间比较，经χ2检验，差异无统计学意义（P>0.05）。

2.4 血管促凝活性因子检测

血管促凝活性因子包括血管收缩与促凝血因子，检测结果见表3。

对表3结果分析如下：1）ET-1：实验各组与正常组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01），显示检测值明显下降。2）TXA2：实验各组与正常对照组、模型对照组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）;组间比较，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05）。3）vWF：实验各组与正常组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01），显示检测值明显下降。4）VCAM-1：实验各组与正常对照组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）;从脾论治各组强的松组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）;组间比较，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05）。

2.5 血管抗凝活性因子检测

血管抗凝活性因子包括血管舒张与抗凝血因子，检测结果见表4。

对表4结果分析如下：1）NO：实验各组与正常组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01），显示检测值下降;组间比较，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05）。2）NOS3：除归脾汤组外，各组检测值与正常对照组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.05），显示检测值下降;组间比较，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05）。3）PGI2：健脾

各组与正常对照组比较，经t检验，差异有统计学意义（P>0.01）;组间比较结果显示，健脾益气摄血组与模型对照组、强的松对照组、健脾益气组、归脾汤组比较，经t检验，差异有统计学意义（P>0.05）。4）TM：實验各组与正常对照组比较，经t检验，差异有统计学意义（P>0.05）。健脾益气组、健脾益气摄血组与模型对照组、强的松对照组归脾汤对照组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

从骨髓巨核细胞分化产生的血小板具有凝血/止血与修复破损的血管内皮细胞等多种功能。血小板表面糖衣能吸附血浆蛋白和凝血因子Ⅲ，血小板内颗粒内含有与凝血相关的物质。当血管受损害或破裂时，就会刺激血小板由静止相变为机能相，急速发生变形，表面黏度增大，凝聚成团。同时，在血小板表面第Ⅲ因子作用下，使血浆内凝血酶原变为凝血酶，又催化纤维蛋白原变成丝状纤维蛋白，与血细胞共同形成凝血块以止血。同时，血小板颗粒物质释放，则进一步促进凝血/止血。血小板具有保护血管内皮细胞、参与内皮细胞修复等功效。因此，当患者外周血小板计数低于50×109/L则有出血发生的风险[10]。说明ITP出血与患者外周血PLT数量及其质量密切相关。在临床实际中，许多ITP特别是慢性ITP患者，虽然外周血PLT计数低于50×109/L，甚至低于安全水平（30×109/L），但出血倾向并不明显。有些患者经相关治疗后外周血PLT依然处于较低水平，可出血症状并不明显。显然ITP患者外周血PLT减少并不是出血的唯一因素。很可能是参与凝血机制多个环节共同作用的结果。其中，血管及其血管分泌的活性因子发挥着至关重要的作用[11]。血管是生物体运送血液的管道，除维持血液与组织间物质交换外，正常血管中存在大量的活性物质，以控制血管生理状态。特别是血管内皮细胞是分泌、合成和释放血管活性物质的重要场所，这些活性物质具有舒缩血管、调控血管张力与促进血液凝固的多重效果。

舒张血管活性因子与抗凝机制关系密切，主要包括：1）前列腺素：前列腺素（Prosta Glandin，PG）及其代谢后的衍生物如前列环素（Prostaglandin，PGI2）。其对血液凝固作用主要是导致血管舒张，抑制血小板聚集与调节血小板活化[12]。2）一氧化氮与一氧化氮合酶3：一氧化氮（Nitric Oxide，NO）与一氧化氮合酶3（Nitric Oxide Synthase-3，NOS3）主要作用于平滑肌细胞，使其松弛，扩张血管，并会很快渗透出细胞膜扩散进入血液，作用于血小板细胞，并降低血小板活性，抑制其凝集和向血管内皮黏附[13]。3）血栓调节蛋白：血栓调节蛋白（Thrombomodulin，TM）是使凝血酶由促凝转向抗凝的重要血管内凝血抑制因子，主要是调节机体凝血与抗凝血动态平衡[14]。

收缩血管活性因子与凝血机制密切相关，主要包括：1）血管内皮素：血管内皮素（Endothelin，ET）是调节心血管功能的重要因子，对维持血管张力与心血管系统稳态起重要作用。其中，血管内皮素1（Endothelin-1，ET-1）是迄今为止发现作用最强的缩血管因子，可引起的血管特别是微小血管收缩有利于血液凝固和止血[15]。2）血栓素A2：血栓素A2（Thromboxane，TXA2）是一强血管收缩因子，可以激活血小板、使其聚集，有利于修复组织损伤和止血[16]。3）血管性血友病因子：血管性血友病因子：（von Willebrand Factor，vWF）是一种有黏附性的多聚体糖蛋白。与血小板膜GPⅠb-Ⅸ复合物及细胞内皮下胶原结合，介导血小板在血管损伤部位黏附以及与因子凝血因子Ⅷ结合来有效止血[17]。此外，vWF也能结合GPⅡb-Ⅲa，参与血小板聚集过程。4）血管内皮细胞黏附分子-1：血管内皮细胞黏附分子-1（Vascular Cell Adhesion Molecule1，VCAM1）是一种细胞黏附分子，主要参与细胞之间、细胞与细胞外基质之间相互作用。其活性降低会导致血管通透性增加，组织缺血与缺氧，增加血液外渗[18]。

控制血管张力的舒缩活性因子是一对矛盾的统一体。一般认为，血管舒张活性因子具有抗凝效应，既是预防血栓形成的关键因子，也是影响血液凝固/止血的重要物质;血管收缩活性因子具有促进凝血效应，既是血栓形成的危险因素，也是促进血液凝固/止血的关键。二者的动态平衡在不同的疾病中担当不同角色。当机体发生血小板减少特别是免疫性血小板减少症，紊乱的免疫机制可导致血管内皮细胞损伤，血管分泌、合成和释放血管活性因子比例失调，直接或间接影响了血管舒缩与凝血功能。因此，有效的调节血管舒缩活性因子，能在ITP患者低血小板数值情况下，预防出血风险或达到止血效果。有基于此，我们在临床实践中，确立了“从脾论治”ITP的重要治则[19]，拟定了“从脾论治”的健脾益气摄血方。前期临床试验证明，该方可明显提升ITP患者外周血PLT计数，改善出血与相关临床症状[20-21]。动物实验也证实，该方能够提升模型小鼠外周血PLT计数与良好的止血效果[22-25]，并明确了部分效应机制[26-28]。为进一步探讨“从脾论治”ITP疗效机制，我们以健脾益气摄血方（四君子汤加炙黄芪、阿胶、茜草）为标准观察药物，选择健脾益气方（四君子汤加炙黄芪）、归脾汤原方为“从脾论治”方，观察三方对ITP动物模型外周血PLT计数、出血程度分级与血管活性因子影响。研究结果显示：1）升血小板疗效：注射APS后48 h至第8天（给药时间点），与正常对照组比较，实验各组小鼠外周血PLT计数明显下降，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）;给药第8天与模型对照组比较，实验各组小鼠外周血PLT计数明显升高，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）。其中，强的松对照、健脾摄血组与归脾对照、健脾益气组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.05）。证明强的松对照、健脾摄血组提升造模小鼠外周血PLT具有明显优势。2）止血疗效：注射APS第8天（给药时间点），除正常对照组外，实验各组均有不同程度出血倾向;药物干预第6天、第8天，与模型对照组比较，实验各组出血分级明显下降，经χ2检验，差异有统计学意义（P=0.014、P=0.000）。下降幅度从大到小依次为强的松组（P=0.002、0.000）、健脾益气摄血组（P=0.003、0.000）、归脾汤对照组（P=0.003、0.001）、健脾益气组（P=0.021、0.001）。各组组间比较，经χ2检验，差异无统计学意义（P>0.05）。3）血管促凝因子：ET-1：实验各组ET-1检测值与正常组比较明显下调，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）;TXA2检测值与正常对照组、模型对照组比较明显上调，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）;vWF检测值与正常组比较明显下调，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01）;VCAM-1检测值与正常对照组比较明显下调，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01），从脾论治各组与强的松对照组、模型对照组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01），表明从脾论治各组有提升VCAM-1优势。4）血管抗凝因子：实验各组NO检测值与正常组比较，经t检验，差异有统计学意义（P<0.01），显示检测值下降;组间比较，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05）;除归脾汤组外，各组NOS3检测值与正常对照组比较显示明显下调，经t检验，差异有统计学意义（P<0.05），组间比较，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05）;健脾各组PGI2检测值与正常对照组比较明显下调，经t检验，差异有统计学意义（P>0.01）;组间比较结果显示，健脾益气摄血组与模型对照组、强的松对照组、健脾益气组、归脾汤组比较，经t检验，差异有统计学意义（P>0.05）;TM检测值与正常对照组比较明显下调，经t检验，差异有统计学意义（P>0.05）。健脾益气组、健脾益气摄血组与模型对照组、强的松对照组、归脾汤对照组比较下降明显，经t检验，差异有统计学意义（P<0.05）。结论认为，“从脾论治”方除具有升高ITP模型小鼠外周血PLT计数、降低出血分级效果外，上调血管促凝因子TXA2、VCAM-1，下调下调PGI2、TM检测值，平衡促凝与抗凝活性因子的动态平衡可能是有效止血机制之一。

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（2021-01-05收稿 责任编辑：徐颖）