补气血、保肝肾中草药方剂对孕马血液指标的影响

买占海，卢亚宾，李建龙，徐文慧，李 海，况 玲*

(1.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐 830052；2.昭苏县畜牧兽医站，新疆昭苏 835600)

随着现代马产业的发展，人们越来越倾向于选择养殖高性能的马匹。新疆作为马产业大省也在积极努力的培育属于自己的高性能的伊犁马，但由于新疆冬季寒冷而漫长的特点，饲养环境和饲养方式造成马的流产率高。在基层，马匹保胎由于受到诊疗设备的缺乏，以及马兽医和繁育员等职业技术人员的缺乏而不能得到有效的实施。同时，具有保胎功效的西药多为激素类药物，副作用多，治疗效果不理想，上述各类因素均制约着养马业的发展。

传统的中医学对流产的认识有其独特的见解。中医将流产的病因分为肾虚、热血、气血虚、跌倒伤胎。现代中医学将流产分为脾肾两虚，肝郁气滞，气血虚血淤，血热，痰热，肾虚损等证型[1]。大多数中医认为脾肾亏虚是导致流产的关键，在防治上首要就是健脾补肾。脾肾和洽，气血均补，固胎元主要在先天，养胎体主要在后天，可以补充胞宫的生理功能[2-4]。本实验室研制的补气血、保肝肾中草药方剂具有补气血、和精血、调理胃经、温肝补脾等功效，本试验拟研究补气血、保肝肾中草药方剂对孕马血液指标的影响，观察是否具有保胎的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 13匹怀孕的英国纯血母马，来自新疆伊犁昭苏县某马场。

1.1.2 药材 白术、黄芪、党参、当归、熟地、白芍、续断、黄芩、砂仁、炙甘草等中草药，购自昭苏县安泰大药房。

1.1.3 主要仪器 血常规检测仪(PE-6800VET)和高速离心机(D-78532 Tuttligen)，深圳市普康电子有限公司产品；血液生化仪(VET Test 8008 ANALYZER)，爱德士VT8008公司产品；干烤箱(北京GD65-1型)，北京广营公司产品；采血管、离心管、抗凝管，新疆鼎枫生物科技有限公司产品。

2 方法

2.1 中草药煎制

将中草药方剂(白术、黄芪、党参、当归、熟地、白芍、续断、黄芩、砂仁、炙甘草等)用粉碎机粉碎，把粉剂的中药置于容器内倒入相当中药体积3倍的水，浸泡1 h，先武火煮沸，再用文火煮30 min并不断的搅拌，将药煮至糊状，冷却待用。

2.2 前中期给药及血液指标测定

怀孕4～6个月的英纯血孕马进行2个疗程给药，分别在母马怀孕至4月龄120 d(第1疗程)和6月龄180 d(第2疗程)给药，每个疗程给药5 d。每日晚上入圈后进行喂药。第1个疗程第1次喂药前0.5 h和每个疗程喂药结束后次日早晨采集血样，抗凝血检测血常规，全血分离血清，测定生化指标及IGF-Ⅰ、IFN-γ和雌激素、孕酮。将检测结果运用SPSS16.0分析软件进行单因素方差显著性分析。

2.3 中后期给药及血液指标测定

怀孕8～10个月的英纯血孕马同样进行两个疗程的给药，分别在母马怀孕至8月龄240 d(第3疗程)和10月龄300 d(第4疗程)给药，给药方法和测定指标与前中期的给药相同。

3 结果

3.1 血液生化分析结果

通过前中期给药结果显示，第1、第2疗程后血清白蛋白(ALB)极显著高于疗程前(P<0.01)；直接胆红素含量第1疗程后极显著高于疗程前和第2疗程(P<0.01)；胆固醇(CHOL)第2疗程后显著低于第1疗程(P<0.05)，第1疗程显著高于疗程前(P<0.05)；其余指标差异不显著(P>0.05)(表1)。

中后期给药后的总蛋白(TP)含量第4疗程后极显著高于第3疗程和疗程前(P<0.01)；胆固醇(CHOL)含量第4疗程后极显著高于疗程前和第3疗程(P<0.01)；其余生化指标在疗程前与第3、4疗程间差异不显著(P>0.05)(表2)。

3.2 血液生理分析结果

前中期给药的血液各项生理指标检测无显著变化(P>0.05)，均在正常参考范围内(表3)。

中后期给药的血液各项生理指标除淋巴细胞数第4疗程后显著高于第3疗程(P<0.05)，其余指标无显著变化(P>0.05)，变化均在正常参考范围内(表4)。

3.3 细胞因子及激素分析结果

前中期给药第2疗程后孕马雌激素显著高于疗程前(P<0.05)，其余指标孕酮、IGF-Ⅰ及IFN-γ均无显著变化(P>0.05)(表5)。

中后期给药第4疗程后孕马雌激素显著低于疗程前(P<0.05)，其余指标孕酮、IGF-Ⅰ及IFN-γ均无显著变化(P>0.05)(表6)。

4 讨论

安全有效是中药保胎的原则，实验复方保胎中药具有养肝肾、补血等功能，通过血清的生化检测，对肝功能及肾脏功能进行检查。妊娠期孕马给药后，进行肝功和肾功的生化检查，评价实验复方中药对孕马的肝功和肾功的损害作用[5]。

实验复方中药在妊娠前中期用药后，母体血清中白蛋白的含量呈现直线升高的趋势，但总蛋白的含量没有明显的升高。在母体没有造成失水过多的疾病的前提下，血液中白蛋白含量升高，说明肝脏蛋白合成代谢增强，有利于母体内难溶于体液的分子量较小的有机物和无机盐离子的运输。直接胆红素含量在第1疗程急剧升高，但第2疗程又降至疗程前，这可能是机体自我调节的生理过程。由总蛋白、直接胆红素、总胆红素等反应肝功能指标的结果分析可知用药前后比较无统计学意义，说明该方剂对孕马的肝脏功能无损害；肌酐和尿素氮是检查肾脏功能的重要指标，根据实验数据分析发现这两个指标在疗程前后比较差异不显著，说明实验方剂对妊娠前期的孕马的肾脏功能没有损害。通过白蛋白含量及其作用机制，可知中药方剂可以起到保护肾脏的功能。胆固醇含量变化发现第1疗程含量急剧升高并超过正常范围，第2疗程含量又下降并未低于正常范围，这可能因为中药对机体的调节作用造成的。妊娠中后期检查肝功和肾功均正常，总蛋白及胆固醇含量的升高均有利于缓解妊娠中后期胎儿营养需要的压力。

血液生理结果显示，妊娠前中期疗程前与疗程结束后比较均不显著。妊娠中后期给药结果分析发现淋巴细胞在疗程结束后整体呈现显著升高，第1疗程明显降低可能与机体的自我调节有关；粒细胞数和淋巴细胞数升高较明显，造成机体妊娠期的免疫水平不同，中药调节作用不同。试验方剂通过提高淋巴细胞数量及粒细胞数量使得白细胞数目增多，增强孕马免疫力，可以提高由于环境的变化和营养不良引起的免疫力降低对机体带来的危害[6]。

研究表明，孕酮水平在4个疗程中保持相对稳定，孕酮的主要作用是保持胎儿的正常发育以及子宫的稳定，如果孕酮的浓度在妊娠后期下降过快会引起子宫收缩而引发流产。适当的雌二醇(E2)水平对早期妊娠的维持起着重要作用[7]。当E2浓度过低时很难维持妊娠，当E2水平的快速升高到正常范围表现胎儿正常且胎盘功能良好[8-9]。雌激素能促进受体介导的LDL胆固醇的摄取，这对胎盘甾体激素的产生极为重要。雌激素通过改变血管选择性通过，使营养物质输送加快。由分析结果可知中药方剂对E2和孕酮(P4)的作用较显著。妊娠前中期所有治疗结束后E2显著增多，P4显著降低；E2/P4的比值升高可以提高胚胎着床率[10]；妊娠中后期所有疗程结束后E2和P4都降低，但E2/P4的比值变化不大，有利于维持后期妊娠。该方剂可以升高妊娠前中期孕马的E2/P4的比值升高，这与前期胚胎着床的激素要求相一致；E2能使子宫收缩运动增强，使子宫内膜增生、宫颈口松弛、分泌粘液，有促进分娩的作用，尤其在妊娠后期。妊娠后期的激素的比值变化不大，但E2的含量在用药后显著减少。该方剂降低E2的含量，减弱子宫的收缩活性，起到保胎作用，提高妊娠率。该中药方剂对IGF-Ⅰ和IFN-γ的作用效果不显著。IFN-γ在妊娠前后期治疗结束后均呈现减少；IGF-Ⅰ在妊娠前中后期疗程结束后均呈现一定幅度的升高，方剂中药对孕马的细胞因子可能有一定作用，试验的疗程较短，未能达到显著作用。

本研究表明该中草药方剂能够有效调节孕马血液生理及激素水平的变化，对孕马肝、肾功能无损伤，可以适应性调节激素水平，可以应用于防治孕马流产，提高马匹健康繁殖。