仙牛腰骶痛颗粒薄层鉴别方法的耐用性研究

吴 萍，鄢必新，于艳辉，白 冰，闫立成，宫海泉，徐 建*

(1.吉林修正药业新药开发有限公司，吉林省中药标准化关键工程技术重点实验室，长春130103；2.修正药业集团长春高新制药有限公司，长春130103)

仙牛腰骶痛颗粒由淫羊藿、牛膝、千年健等4味中药组成，具有温阳祛湿，通经止痛的功效。经过薄层色谱鉴别方法摸索，建立了方中淫羊藿、牛膝、千年健薄层鉴别方法，为验证新建方法在温湿度、薄层板厂家及点样方式变化的情况下对薄层鉴别检查结果产生的影响，故对上述薄层鉴别方法分别进行耐用性试验。

1 仪器与试药

1.1 仪器

AE240型电子分析天平(梅特勒-托利多公司)；SB25-12DT超声波清洗器（宁波新芝生物科技股份有限公司）；SLD-1型薄层色谱摄影仪(天津思利达色谱技术开发公司)。

1.2 试药

样品来源:吉林修正药业新药开发有限公司(批号:20190902)；对照品来源:淫羊藿 （批号:121632-201502）、牛膝（批号:121066-201809）、千年健（批号:121571-201202）、淫羊藿苷（批号:110737-201516）、齐墩果酸（批号:110709-201808），以上均购于中国食品药品检定研究院；薄层板:硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂、烟台市化学工业研究所)；试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 淫羊藿薄层鉴别耐用性试验

2.1.1试验方法

取本品2g，研细，加水20ml，超声处理15分钟，滤过。滤液用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。再取淫羊藿对照药材、缺淫羊藿的阴性样品，同法制成对照药材溶液及阴性样品溶液。另取淫羊藿苷对照品适量，加60%乙醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述四种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10∶1∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%三氯化铝乙醇溶液，105℃加热约数分钟后，置紫外光灯（365nm）下检视。

2.1.2 试验条件

分别在常温低湿 （25℃，18%）、常温高湿 （25℃，58%）、低温低湿（25℃，58%）、高温高湿（35℃，88%）、2种不同厂家硅胶G薄层板、圆形及条形点样方式条件下进行薄层试验，考察方法的耐用性。

2.1.3 试验结果

供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应位置上，均显相同颜色的荧光斑点，表明淫羊藿薄层鉴别方法耐用性较好。

2.2 牛膝薄层鉴别耐用性试验

2.2.1 试验方法

取本品1g，研细，置于锥形瓶中，加水20ml与浓盐酸2ml，加热回流2小时，趁热滤过，滤渣用水洗至中性，80℃烘箱干燥4小时。取滤渣加无水乙醇2ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。再取牛膝对照药材、缺牛膝的阴性样品，同法制成对照药材溶液及阴性样品溶液。另取齐墩果酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述四种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸（8∶1∶2∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸的乙醇溶液，105℃加热约数分钟至斑点显色清晰。

2.2.2 试验条件

分别在常温低湿 （25℃，18%）、常温高湿 （25℃，58%）、低温低湿（25℃，58%）、高温高湿（35℃，88%）、2种不同厂家硅胶G薄层板、圆形及条形点样方式条件下进行薄层试验，考察方法的耐用性。

2.2.3 试验结果

供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应位置上，均显相同颜色的斑点，表明牛膝薄层鉴别方法耐用性较好。

2.3 千年健薄层鉴别耐用性试验

2.3.1 试验方法

取本品0.5g，研细，置具塞锥形瓶中，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。再取千年健对照药材、缺千年健的阴性样品，同法制成对照药材溶液及阴性样品溶液。吸取上述三种溶液各4μl，以三氯甲烷-丙酮-甲酸（8∶2∶0.4）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液（临用新配），105℃加热至斑点显色清晰。

2.3.2 试验条件

分别在常温低湿 （25℃，18%）、常温高湿 （25℃，58%）、低温低湿（25℃，58%）、高温高湿（35℃，88%）、2种不同厂家硅胶G薄层板、圆形及条形点样方式条件下进行薄层试验，考察方法的耐用性。

2.3.3 试验结果

供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，表明千年健薄层鉴别方法耐用性较好。

3 讨论

千年健薄层色谱鉴别受温度影响较大，实验过程中应注意控制温湿度条件。

新建淫羊藿、牛膝、千年健薄层鉴别方法在不同温湿度、不同厂家薄层板、不同点样方式条件下各斑点的分离度均较好，在与对照品相应位置上均显相同斑点或荧光斑点，且斑点显色清晰，表明三种薄层鉴别方法耐用性均较好，可作为仙牛腰骶痛颗粒的质控方法。