柬埔寨双瓣茉莉全封闭紧贴覆膜扦插繁殖技术研究

李先民，卜朝阳，李春牛*，卢家仕，黄展文，唐美婵

1. 广西农业科学院 花卉研究所，广西 南宁 530007；2. 横县茉莉花研究所，广西 横县 530300

茉莉花（Jasminum sambac（L.）Aiton），系木犀科（Oleaceae）素馨属（Jasminum）常绿植物，原产于印度，于汉代传入我国，在我国种植已有2000多年的历史[1]。现在我国广西、福建、四川及云南等地规模种植，是重要的“一带一路”经济植物[2]。茉莉花花量大，花期长，花香持久，被誉为“天下第一香”[3]，是著名的花茶和香精原料[4]，也具有较高的观赏和药用价值。目前，有关茉莉花的研究主要涉及种质资源收集评价[5]、种苗繁育[6-7]、生理生化[8]、解剖学[9]、化学成分鉴定[10]、分子生物学[11]、诱变育种[12]、花茶加工[13-14]、产业发展[15]等方面。

柬埔寨双瓣茉莉（Jasminum sambac），由广西农业科学院花卉研究所从柬埔寨引进，属观赏型茉莉花，也可窨制花茶。其根茎粗壮；叶对生，深绿，质较厚，呈卵型，叶片边缘褶皱；聚伞花序，顶生或腋生1 ～ 4朵花；花苞紧结，花苞大而尖；花冠洁白，2 ～ 3层且直径较大，花冠裂片细长；花芳香；花期4月中旬至10月上旬，由初夏到深秋花开不绝，具有极高的观赏价值[16]。柬埔寨双瓣茉莉结实率较高，是理想的茉莉花杂交育种材料。柬埔寨双瓣茉莉以扦插繁殖为主，但在自然条件下扦插效果并不理想。目前，已有许多探索简单高效的扦插育苗技术的报导[17-18]，国内外涉及茉莉花等素馨属植物扦插繁殖技术的研究也有报道[19]，但尚未见针对柬埔寨双瓣茉莉这个品种扦插繁殖技术的。为提高繁育效率、扩大柬埔寨双瓣茉莉可利用资源，本试验研究探索了扦插后全封闭覆膜以及插穗留芽数、留叶片数、促根剂应用等对柬埔寨双瓣茉莉扦插繁殖的影响，以期为其资源的扩繁和推广应用提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验地概况

试验在广西农业科学院花卉研发中心温室内进行，温室外盖一层遮光率为75%的遮阳网，温室内温度控制在25℃ ～ 32℃。试验地海拔 73 m，属南亚热带季风气候区（22°48′N、108°22′E）[20]，年平均气温 21.6℃，年均降雨量1304.2 mm，平均相对空气湿度79%，无霜期334 d[21]。

1.2 试验材料

试验材料均采自广西农业科学院科研基地茉莉花种质资源圃，母本3 ～ 4 a生、健康无病虫害。采集当年生半木质化健康饱满的枝条剪制插穗，采用多菌灵浸泡插穗杀菌消毒5 min。扦插基质采用品氏（PINDSTRUP）泥炭土，将泥炭土填充于32孔育苗穴盘（单孔长4 cm*宽4 cm*高10 cm），扦插前三天用多菌灵对扦插基质进行杀菌消毒，扦插前将基质浇透水，每穴扦插一根插穗，扦插时插穗叶片展开方向一致，尽量避免叶片重叠。

1.3 试验方法

1.3.1 覆膜试验

试验于2019年9月21日进行。插穗长度控制在9 ～ 15 cm。设置全封闭紧贴覆膜扦插（T1）和不覆膜扦插（T2）两种处理。全封闭紧贴覆膜扦插处理：扦插后，向叶片及插穗均匀喷施促根剂，用量为 250 ～ 350 mL/育苗穴盘，之后用塑料薄膜（厚度0.1 ～ 0.3 mm）紧贴插穗上切口，薄膜四周压在育苗穴盘底部将育苗穴盘完全封闭，封闭后不再浇水；不覆膜扦插处理：扦插前先用促根剂浸泡处理插穗3 h，扦插过程采用间歇喷雾及时保持扦插基质湿润。促根剂统一采用200 mg/L IBA。每处理重复3次，每次重复样本数64株。于扦插25 d后分别调查生根率、根系数量、根系长度（每次各处理随机选取20株插穗进行统计求平均）与新梢率。

1.3.2 插穗类型及促根剂试验

试验于2019年9月21日进行。插穗长度控制在9 ～ 15 cm。扦插方式采用上述全封闭紧贴覆膜扦插方式。采用L9（34）正交设计方案（表1 ～ 表2），设置插穗留芽数、插穗留叶片数、IBA浓度和NAA浓度等4个因素，各因素设置3个水平共9个处理，每处理重复3次，每次重复样本数64株。于扦插25 d后分别调查生根率、根系数量、根系长度（每次各处理随机选取20株插穗进行统计求平均）与新梢率。

表1 插穗类型及促根剂效应试验因素水平Table 1 Factor levels of cutting type and root growth regulator effect test

表2 插穗类型及促根剂效应L9（34）正交试验设计方案Table 2 L9（34）orthogonal design for cuttings type and root growth regulator effect test

1.3.3 插穗生根部位试验

试验于2019年9月21日进行。插穗长度控制在 9 ～ 15 cm。扦插方式采用上述全封闭紧贴覆膜扦插方式，促根剂统一采用300 mg/L IBA＋300 mg/L NAA。插穗规格设置3个处理：含一个芽、含二个芽和含三个芽，每处理重复3次，每次重复样本数64株。于扦插25 d后分别调查各处理生根率和生根插穗中各部位生根占比。

1.4 统计分析

数据统计用Excel 2010软件，方差分析和显著性检验（Duncan 新复极差法）用SPSS 21.0软件。

2 结果与分析

2.1 全封闭紧贴覆膜扦插对柬埔寨双瓣茉莉插穗生根及生长的影响

由表3可知，两种扦插方式对柬埔寨双瓣茉莉插穗的生根率、根系数量、最长根系长度及新梢率的影响均达到显著水平（P＜0.05）。其中采用全封闭紧贴覆膜方式扦插插穗的生根率、根系数量及根系长度均最高，分别为93.84%、12.82条和7.57 cm，显著高于不覆膜扦插处理；但采用不覆膜扦插方式，插穗新梢率（73.07%）显著高于全封闭紧贴覆膜扦插（28.61%）。

表3 不同扦插方式对柬埔寨双瓣茉莉插穗生根及生长的影响Table 3 Effects of different cutting methods on rooting and growth of Cambodian Jasminum sambac cuttings

2.2 插穗类型及促根剂对柬埔寨双瓣茉莉插穗生根的影响

由表4可知，柬埔寨双瓣茉莉扦插的生根率、根系数量、最长根系长度及插穗新梢率在各处理组合间的差异均达到显著水平（P＜0.05）。生根率最高及根系数量最多的处理为组合3，即留一个芽+留两片全叶+ IBA（200 mg/L）+ NAA（80 mg/L），生根率达97.92%，根系数量达27.72条；在生根率方面与组合2、5、6、8、9相比差异不显著（P＞0.05），显著高于组合1、4、7；在根系数量方面显著高于其他处理组合。根系长度最长的处理为组合2，即留一个芽 + 留单片全叶 + IBA（100 mg/L）+ NAA（40 mg/L），最长根系长度达8.66 cm，与组合3、5、6、8相比最长根系长度差异不显著，显著高于其他处理组合。插穗新梢率最高的处理为组合1，即留一个芽+留单片半叶+ IBA（50 mg/L）+ NAA（20 mg/L），新梢率达85.42%，与组合7相比新梢率差异不显著，显著高于其他处理组合。

由表5可知，插穗留芽数对柬埔寨双瓣茉莉扦插插穗的根系数量、根系长度及新梢率的影响达到显著水平（P＜0.05），但对扦插生根率的影响未达到显著水平（P＞0.05）；插穗留叶片数对柬埔寨双瓣茉莉扦插生根率、根系数量、根系长度及新梢率的影响均达到显著水平；IBA及NAA浓度对柬埔寨双瓣茉莉扦插插穗根系数量和新梢率的影响达到显著水平，但对生根率及根系长度的影响未达到显著水平。本试验中的4个因素对生根率影响由大到小排列为留叶片数＞NAA浓度＞留芽数＞IBA浓度，对根系数量影响由大到小排列为留叶片数＞NAA浓度＞留芽数＞IBA浓度，对根系长度影响从大到小排列为留叶片数＞留芽数＞IBA浓度＞NAA浓度，对插穗新梢率影响从大到小排列为留叶片数＞NAA浓度＞IBA浓度＞留芽数。多重比较显示（表4），就生根率而言A2B3C2D3组合为最佳组合，即留两个芽+留两片全叶+ IBA（100 mg/L）+ NAA（80 mg/L）； 就 根 系数量而言A1B3C3D3组合为最佳组合，即留一个芽+留两片全叶+IBA（200 mg/L）+ NAA（80 mg/L）；就根系长度而言A1B2C1D2组合为最佳组合，即留一个芽+留一片全叶+ IBA（50 mg/L）+ NAA（40 mg/L）；就插穗新梢率而言A1B1C3D1组合为最佳组合，即留一个芽+留一片半叶 +IBA（200 mg/L）+NAA（20 mg/L）。

表4 插穗类型及促根剂对柬埔寨双瓣茉莉扦插生根及生长的影响Table 4 Effects of cuttings type and root growth regulator on cutting rooting and growth of Cambodian Jasminum sambac

表5 留芽数、留叶片数、IBA浓度及NAA浓度对柬埔寨双瓣茉莉扦插生根及生长指标的多重比较Table 5 Multiple comparison of the number of bud-retention, leaf-retention, IBA concentration, NAA concentration on cutting rooting and growth indicators of Cambodian Jasminum sambac

2.3 留芽数对生根部位的影响

由表6可知，柬埔寨双瓣茉莉插穗不同留芽处理对其扦插生根率的影响未达到显著水平（P＞0.05），生根率最高的为留两个芽，生根率达89.88%，与留一个芽和留三个芽相比差异不显著（P＞0.05）。不同留芽处理间相比，除插穗下部生根占比达到显著水平外（P＜0.05），其他各部位生根占比均未达到显著水平（P＞0.05）。从各留芽处理来看，留一个芽的插穗其各部位生根比例差异显著（P＜0.05），其生根部位主要集中在插穗上部、中部及切口处，以插穗上部生根比例最高，占50.36%，显著高于其他部位（P＜0.05）；留二个芽的插穗其各部位生根比例差异不显著（P＞0.05），以插穗下部生根比例最高，占39.7%，与上部相比差异不显著（P＞0.05），但显著高于插穗切口和中部（P＜0.05）；留三个芽的插穗其各部位生根比例差异显著（P＜0.05），以插穗下部生根比例最高，占39.39%，显著高于其他部位（P＜0.05）。

表6 留芽数对柬埔寨双瓣茉莉插穗生根部位及生根率的影响Table 6 Effect of bud-retention number on rooting site and rooting rate of Cambodian Jasminum sambac cuttings

3 讨论

扦插繁殖速度快，便于规模生产，能较好保持母本性状[22]。扦插繁殖研究的重点是探索最佳的外部环境条件及内部因素提高插穗成活率和成苗质量[23]。本试验结果表明采用全封闭紧贴覆膜扦插方式对柬埔寨双瓣茉莉插穗生根有显著促进作用，主要是采用全封闭紧贴覆膜方式使插穗及扦插基质包裹于密闭空间，能较好地维持扦插环境中空气湿度与基质湿度恒定，进而维持插穗内水分平衡；泥炭为黑色扦插基质，有较好吸热作用，全封闭紧贴覆膜，能有效减少扦插基质温度的散失，使扦插基质的温度长时间略高于空气温度，有助于插穗营养物质运移、分解与合成，对根的分化有益[24]。此外，全封闭紧贴覆膜扦插方式膜内空气湿度维持在90%以上，基质湿度维持在36% ～ 40%；而扦插不覆膜处理扦插床周围的空气湿度在60% ～ 70%，基质湿度维持在22% ～ 27%，适宜的扦插基质湿度和空气湿度是确保扦插生根的重要条件[25]，全封闭紧贴覆膜扦插方式营造了适宜柬埔寨双瓣茉莉插穗生根的温湿环境，因此有利于插穗生根及不定根生长。而全封闭紧贴覆膜扦插方式不利于柬埔寨双瓣茉莉插穗新梢抽梢，主要是不覆膜处理的插穗上部切口容易干枯，保留叶片容易干枯脱落，不利于保留叶片进行光合作用以产生养分供给插穗根原基的诱导，插穗只能通过养分供给促进抽梢展叶的方式来进行光合作用，这同时也会加大插穗中内含营养物质的消耗，不利于养分供给插穗根原基的诱导[22]。而对比全封闭紧贴覆膜方式，插穗保留叶片的叶形及叶色保持完好，能良好地进行光合作用产生养分，与插穗内部养分形成协同作用，促进生根及根系生长。采用全封闭紧贴覆膜方式可有效缩短柬埔寨双瓣茉莉扦插移栽时间，扦插25 d后侧根已分化形成较为完整的根系，可以进行移栽。

本试验结果还表明，全封闭紧贴覆膜扦插条件下柬埔寨双瓣茉莉插穗留芽数对其扦插根系数量、根系长度及新梢率有显著影响，但对扦插生根率的影响不显著；插穗留叶片数对扦插生根率、根系数量、根系长度及新梢率均有显著影响；IBA及NAA浓度对柬埔寨双瓣茉莉扦插插穗根系数量和新梢率有显著影响，但对生根率及根系长度的影响不显著。生根率最高及根系数量最多的为组合3，即留一个芽+留两片全叶 + IBA（200 mg/L）+ NAA（80 mg/L），该处理组合与根系长度最长的组合2相比在根系长度指标方面差异不显著，与插穗新梢率最高的组合1相比在插穗新梢率指标方面差异显著；从生根及根系伸长来看，采用留一个芽+留两片全叶 + IBA（200 mg/L）+ NAA（80 mg/L）的处理组合效果最好。从多重比较的结果看出，就生根率而言理论上的最佳组合为留两个芽 + 留两片全叶 + IBA（100 mg/L）+ NAA（80 mg/L），结合其他扦插指标综合分析，留两片全叶及80 mg/L的NAA浓度对插穗的根系数量和根系长度均有一定的促进作用，插穗仅保留一个芽及更高浓度的IBA诱导更利于插穗的根系数量及抽梢。究其原因，采用全封闭紧贴覆膜扦插方式能较好保持插穗叶片的叶形及叶色，而保留插穗上较多的叶片数量有利于光合作用产生光合同化产物供给插穗生根及抽梢[26]；采用枝条上部剪制的插穗，芽数为1 ～ 2个；枝条中部剪制的插穗，芽数为2个左右；枝条下部剪制的插穗，芽数为3个左右；枝条下部剪制的插穗较中上部木质化程度高，可能内源激素含量相对较少且细胞分生能力低[25]，进而影响插穗生根；插穗的抽芽展叶及根原基诱导均会消耗插穗中的养分[27]。有研究表明，插穗上芽点周围富集了较多的养分[28]及内源激素[29]，插穗留芽数过少也不利于内源激素调节诱导根原基的形成。本试验所设置的促根剂浓度对生根率的影响不显著，可能是设置的促根剂浓度较低或者柬埔寨双瓣茉莉插穗对低浓度的外源促根剂处理响应不明显。

本试验发现柬埔寨双瓣茉莉扦插生根以皮部生根方式为主，即根原基的形成是在插穗皮下组织内发生，与同种的菊花茉莉生根类型相似[1]。不同的留芽数量对扦插生根部位有一定影响，留一个芽的插穗以插穗上部生根比例最高，留二个芽的插穗其各部位生根比例差异不显著，而留三个芽的插穗以插穗下部生根比例最高；从单个插穗来看，生根部位主要集中在插穗芽体及下切口附近。究其原因，剪制插穗时留一个芽的插穗芽体位置均在插穗上部，留两个芽的插穗芽体位置分布在插穗的上部和下部，留三个芽的插穗芽体位置分布在插穗的上、中、下部，插穗芽点周围富集较多的养分及内源激素，更利于皮部开裂及不定根发生。在下一步的研究中可结合生根解剖学观察，进一步探索柬埔寨双瓣茉莉插穗根原基诱导发生的具体部位及不定根发育过程。