微波消解–电感耦合等离子体质谱法测定依度沙班原料药中36 种金属元素

徐艳梅，高燕霞，王茉莉，闫凯，苗会娟

（河北省药品医疗器械检验研究院，石家庄 050000）

依度沙班是一种新型Xa 因子抑制剂［1–2］，具有起效快、抗凝效果好、可逆性强等特点。该药物不仅可以用于预防非瓣膜性房颤患者发生脑卒中和系统性栓塞，还能预防和治疗急性静脉栓塞患者深静脉血栓和肺栓塞［3］。随着依度沙班使用范围日趋广泛，其安全性越来越引人关注，重金属含量是体现原料药安全性的一项重要指标。当过量的重金属在人体内富集，会对人体健康造成威胁，因此测定重金属的含量对用药安全具有重大意义［4–11］。

目前依度沙班原料药中的重金属按照《中国药典》（2020 年版）重金属检查法测定，通过与一定浓度的铅标准溶液比色，以控制重金属的限度，该法无法准确测定重金属种类和含量。重金属的测定主要有原子吸收光谱（AAS）、原子荧光光谱（AFS）、电感耦合等离子体发射光谱（ICP–AES）、电感耦合等离子体质谱（ICP–MS）、高效液相色谱–电感耦合等离子体质谱（HPLC–MS）［12–16］等法。AAS 法和AFS 法选择性强，光谱干扰小，但均不能进行多元素的同时分析；ICP–AES 法、ICP–MS 法、HPLC–MS法均具有分析速度快、测定范围广、检出限低、灵敏度高、准确度好、可同时分析多元素等特点。笔者采用ICP–MS 法测定依度沙班原料药中36 种金属元素的含量，以HNO3和H2O2作为消解体系，操作简单，加热快，消解能力强。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

电感耦合等离子体质谱仪：NexION 350X 型，美国珀金埃尔默公司。

微波消解仪：ETHOS ONE 型，意大利莱伯泰科公司。

电子天平：AE240 型，十万分之一，瑞士梅特勒-托利多公司。

超纯水仪：美国Millipore 公司。

硝酸：色谱纯，美国默克公司。

过氧化氢：分析纯，体积分数为30%，国药集团化学试剂有限公司。

依度沙班原料药：批号分别为161111、161112、161113，石家庄医药科技有限公司。

铑、铼单元素标准溶液：1 000 μg／L，标准编号分别为GSB 04–1746–2004，GSB 04–1745–2004，国家有色金属及电子材料分析测试中心。

实验用水为去离子水。

36 种金属元素标准溶液：1 000 µg／L，标准物质编号见表1，钍元素标准溶液生产公司为核工业北京化工冶金研究院，其它元素生产公司为国家有色金属及电子材料分析测试中心。

表1 36 种金属元素标准溶液标准物质编号

1.2 仪器工作条件

射频功率：1.6 kW；等离子体流量：18 L／min；雾化器流量：0.94 L／min；辅助气流量：1.2 L／min；模拟电压：–1 635 V；脉中电压：800 V。选取同位素分别为7Li、9Be、45Sc、51V、52Cr、55Mn、59Co、60Ni、63Cu、75As、85Rb、88Sr、89Y、107Ag、111Cd、115In、133Cs、138Ba、139La、205Ti、208Pb、209Bi、140Ce、141Pr、142Nd、152Sm、153Eu、158Gd、159Tb、164Dy、165Ho、166Er、169Tm、174Yb、175Lu、232Th，其中质量数不大于140 的元素以103Rh 为内标，质量数大于140 的元素以187Re 为内标。

1.3 溶液配制

混合标准储备溶液：分别移取适量36 种金属元素标准溶液，用2%硝酸制得36 种元素质量浓度均为1 000 μg／L 的混合标准储备溶液，于4℃冰箱中储藏。

系列混合标准工作溶液：移取适量混合标准储备溶液，用2%硝酸制得36 种元素质量浓度均分别为0、20、30、40、50 μg／L 系列混合标准工作溶液。

混合内标溶液：分别移取适量Rh、Re 单元素标准溶液，用2%硝酸制得Rh、Re 质量浓度均为20 μg／L 混合内标溶液，采用在线内标加入。

供试品溶液：称取约0.2 g 依度沙班原料药于消解罐中，加3 mL 硝酸，放置过夜，加2 mL 30%过氧化氢溶液，置于微波消解仪中消解完全，取出，转移至25 mL 具塞比色管中，用水反复冲洗消解罐并将洗液并入容量瓶中，用水定容至标线，混匀，待测。

2 结果与讨论

2.1 样品前处理方法的选择

分别比较石墨消解和微波消解两种前处理方式，石墨消解法采用硝酸–盐酸消解，称取样品0.2 g，置于消解罐中，加6 mL 硝酸、2 mL 盐酸，消解温度为180 ℃；微波消解法采用硝酸–过氧化氢消解，称取样品0.2 g 于消解罐中，加硝酸3 mL，放置过夜，加2 mL 30%过氧化氢溶液，采用程序升温，初始温度为120 ℃，升温5 min 至160 ℃，保持3 min；再升温5 min 至180 ℃，保持3 min；再升温5 min，保持20 min。结果表明，石墨消解法速度快，时间短，但易引入Cl–干扰测定。微波消解法操作简单，危险性小，不易引入其它干扰离子。故选择微波消解法进行样品前处理。

2.2 质谱干扰的消除

为降低样品和雾化效率等引起的基质效应和基线漂移，在微波消解同时做空白，采集时用扣除空白和在线加入内标的方法，其中质量数不大于140的元素以103Rh 作为内标，质量数大于140 的元素以187Re 作为内标，对检测结果进行校正。

2.3 仪器条件的优化

采用1.0 μg／L 的Li、Co、In、U、Be、Ce 混合溶液作为质谱调谐液，调整仪器各项指标，使得信号值Li ≥50 000 cps，Co ≥100 000 cps，In ≥200 000 cps，U ≥300 000 cps，(138Be++／137Be+) ≤3.0%，(CeO／Ce)≤2.0%。优化后仪器工作条件见1.2。

2.4 线性方程与检出限

在1.2 仪器工作条件下对系列混合标准工作溶液进行测定，以各元素质量浓度与对应内标浓度比值（x）为横坐标，测量值与内标信号强度比值（y）为纵坐标进行线性回归。采用11 次样品空白测定结果的3 倍标准偏差作为仪器检出限，36 种元素的线性范围、线性方程、相关系数及检出限见表2。

表2 线性范围、线性方程、相关系数及检出限

2.5 准确度与精密度试验

分别称取6 份依度沙班（161111），每份约0.2 g，分别加入0.2、0.375、0.75 mL 混合标准溶液，按1.3方法处理，在1.2 仪器工作条件下测定，结果见表3。

续表3

由表3 可知，36 种金属元素的样品加标回收率为94.7%～106.0%，测定结果的相对标准偏差为0.07%～1.40%（n=6），说明该方法的准确度和精密度均较高。

3 结语

采用微波消解法，以HNO3和H2O2为消解液，Rh、Re 为在线内标，用ICP–MS 法同时测定依度沙班原料药中36 种金属元素，该方法准确可靠，可用于依度沙班原料药的金属元素检测，和后期化学药品重金属检查法的参考方法。