白细胞介素-1β、人附睾蛋白4及Sp1对上皮性卵巢癌的诊断及预后预测价值分析

丁竟成，黄磊，李婷，赵玉杰

信阳市中心医院妇产科，河南 信阳 464000

卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤，在女性生殖系统肿瘤中，患病率居于第3位，致死率居于首位；其中，上皮性卵巢癌占卵巢癌的90%以上，严重威胁女性的生殖健康及生命安全。卵巢癌患者的早期症状并不典型，多数患者确诊时已处于中晚期阶段，错过了最佳诊疗时机。研究证实，Ⅰ期确诊患者数量不足25%，Ⅲ、Ⅳ期患者具有较高的复发率，5年生存率不足25%，因此，早期检测至关重要。血清肿瘤标志物水平的动态监测有助于卵巢癌患者临床疗效及预后情况的判断。肿瘤标志物检测是诊断恶性肿瘤的重要手段及肿瘤临床研究领域的热点。人附睾蛋白4（human epididymis protein 4，HE4）属于卵巢癌的新型标志物，多表达于卵巢癌组织中，对卵巢癌具有较高的诊断灵敏度和特异度。转录因子Sp1能够上调HE4的基本转录活性，在卵巢癌发生、发展中具有重要作用。白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）能够参与卵巢细胞的发育、成熟、排卵和妊娠等生殖过程，但是否参与卵巢癌的发生尚有待证实。鉴于此，本研究对IL-1β、HE4和Sp1对卵巢癌的诊断效能及预后预测价值进行分析，以期为卵巢癌的临床早期诊疗提供理论参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2013年1月至2016年1月信阳市中心医院收治的上皮性卵巢癌患者的临床资料。纳入标准：①经组织病理学或细胞学确诊为上皮性卵巢癌；②首发病例；③接受手术+术后辅助化疗；④术前均未接受放化疗及其他抗肿瘤治疗；⑤病历资料及随访资料完整，且均完成随访。排除标准：①生存期不超过半年；②合并其他部位恶性肿瘤；③合并结缔组织疾病及心脏病、糖尿病、冠心病等其他慢性疾病；④病灶发生转移；⑤合并免疫功能缺陷及全身性疾病；⑥合并严重的心、肝、肾功能不全；⑦伴有精神类疾病；⑧并发全身急性、慢性感染；⑨存在严重自杀倾向；⑩妊娠期或哺乳期妇女。根据纳入和排除标准，本研究共纳入90例上皮性卵巢癌患者作为恶性组，年龄28～66岁，平均（49.75±8.69）岁。另选取同期收治的30例良性卵巢肿瘤患者作为良性组，年龄26～65岁，平均（48.76±9.01）岁；选取30例良性妇科疾病（组织病理学证实为健康卵巢组织）患者作为对照组，年龄28～65岁，平均（49.33±8.54）岁。3组患者的年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。分别收集恶性组、良性组和对照组患者的上皮性卵巢癌组织、良性卵巢肿瘤组织和健康卵巢组织。

1.2 检测方法

3组患者均于清晨抽取空腹静脉采血3～5 ml，以3000 r/min的速度离心10 min，离心半径为10 cm，收集上层血清于干燥试管中，并置于-80℃低温保存，于1周内进行检测。采用酶联免疫吸附法检测血清IL-1β、HE4水平。所有操作步骤均严格按照试剂盒说明书步骤进行，所有试剂盒均有正式批文，符合要求。3组患者的组织标本均经固定、染色、切片、脱水、灭活、显色等操作后，采用免疫组织化学染色法检测Sp1的表达情况，根据染色强度和高倍镜下阳性细胞所占百分比进行分析。Sp1阳性细胞主要定位于细胞核，阳性颗粒呈棕黄色或棕褐色，且粗细均匀。阳性细胞染色强度评分：无着色计0分，浅黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分。阳性细胞所占百分比评分：未见阳性细胞计0分，0%＜占比＜10%计1分，10%≤占比＜50%计2分，50%≤占比＜75%计3分，≥75%计4分。Sp1阳性判定标准：阳性细胞占比和染色强度评分相乘，0分为阴性，≥1分为阳性。上述两项得分的乘积为免疫组化最终得分，其中，≤2分为阴性，＞2分为阳性。

1.3 观察指标

比较3组患者的血清IL-1β、HE4水平及组织中Sp1的阳性表达情况，分析IL-1β、HE4、Sp1水平对上皮性卵巢癌的诊断效能。术后，采用门诊、电话或走访等形式对患者均进行了为期4年的随访，每3个月随访1次，随访内容包括常规体格检查、实验室生化指标检测、影像学检查等，随访截止时间为2020年1月。记录所有上皮性卵巢癌患者的生存情况，并依据生存情况将其分为生存组和死亡组，分析临床特征与上皮性卵巢癌患者生存情况的关系及其预后的影响因素。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0软件对数据进行统计学分析。计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ检验。计量资料以均数±标准差（x-±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用两独立样本t检验，组间两两比较采用SNK-q检验。绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线，获取曲线下面积（area under curve，AUC），并通过计算灵敏度、特异度等指标分析IL-1β、HE4及Sp1对卵巢癌的诊断价值，确定临界值。采用多因素Logistic回归模型分析卵巢癌患者预后的影响因素。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清IL-1β、HE4水平及组织中Sp1表达情况的比较

3组患者血清中的IL-1β、HE4水平及组织中Sp1的阳性表达率比较，差异均有统计学意义（P＜0.01）。恶性组患者血清中的IL-1β、HE4水平均高于良性组和对照组患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）；恶性组患者血清中Sp1的阳性表达率高于良性组和对照组患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表1）

表1 3组患者血清中IL-1β、HE4水平及组织中Sp1阳性表达情况的比较

2.2 血清IL-1β、HE4水平及组织中Sp1表达对上皮性卵巢癌的诊断效能

ROC曲线分析结果显示，血清IL-1β、HE4水平及组织中Sp1的表达诊断上皮性卵巢癌的AUC分别为0.872、0.918、0.817。血清IL-1β诊断上皮性卵巢癌的灵敏度最高（88.9%），HE4诊断上皮性卵巢癌的特异度最高（93.3%）。（表2、图1）

表2 IL-1β、HE4及Sp1对上皮性卵巢癌的诊断效能

图1 血清IL-1β、HE4水平及组织中Sp1的表达诊断上皮性卵巢癌的ROC曲线

2.3 生存情况

截至随访结束，所有患者均全部完成随访。90例上皮性卵巢癌患者中，30例患者生存，60例患者死亡，4年生存率为33.33%（30/90）。

2.4 上皮性卵巢癌患者生存情况影响因素的单因素分析

两组患者的年龄、病理类型比较，差异均无统计学意义（

P

＞0.05）；两组患者的肿瘤直径、临床分期、分化程度、淋巴结转移情况、血清IL-1β水平、血清HE4水平及卵巢组织中Sp1的阳性表达率比较，差异均有统计学意义（

P

＜0.05）。（表3）

表3 90例上皮性卵巢癌患者生存情况影响因素的单因素分析

2.5 卵巢癌预后影响因素的多因素Logistic回归分析

将肿瘤直径、临床分期、分化程度、IL-1β水平、HE4水平、Sp1表达情况作为自变量，以患者预后情况作为因变量纳入Logistic多因素回归模型进行分析，结果显示，肿瘤直径、临床分期、分化程度、淋巴结转移情况、IL-1β水平、HE4水平及Sp1表达情况均是上皮性卵巢癌患者预后的独立影响因素（

P

＜0.05）。（表4）

表4 卵巢癌患者预后影响的多因素Logistic回归分析（n=90）

3 讨论

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，在全世界范围内，其患病率仅次于宫颈癌，而且，近年来，其发病率呈明显上升趋势。目前，关于上皮性卵巢癌的发病机制尚未完全明确，患者早期缺乏典型的临床症状，难以进行鉴别诊断，导致患者错过了最佳诊疗时机，因此，早期监测病情并及时诊断治疗有利于改善上皮性卵巢癌患者的预后。

HE4是一种附着于人附睾上皮细胞中的核心表位蛋白，属于抑蛋白酶家族。研究证实，HE4在卵巢癌组织中呈高表达，在健康卵巢组织或非卵巢肿瘤组织中不表达或呈低表达，是临床诊断卵巢癌的新型肿瘤标志物。国外研究通过免疫组化法检测卵巢癌患者卵巢癌组织中的HE4水平，发现患者的血清HE4水平普遍较高，认为HE4对于卵巢癌具有一定的诊断意义。IL-1β属于IL-1，能够介导机体内IL-1的活性，通过自分泌或旁分泌的方式刺激其他细胞因子和炎性递质的产生，诱发抗原呈递细胞表面免疫分子的表达，为T淋巴细胞的活化提供第二信号，促进B细胞的增生、分化，介导免疫球蛋白的分泌，由此激活补体，增强细胞免疫和体液免疫介导的组织损伤过程。研究表明，IL-1β参与了卵泡发育、卵子成熟及排卵等生殖过程，活性亦受到激素、促性腺激素等的调节，因此，推断其在卵巢癌的发生、发展中具有一定作用。研究指出，卵巢癌的发生还受到多种活性分子的影响，Sp1则是其中一种重要的转录因子。有研究指出Sp1可以结合并激活FOXM1启动子，促进致癌蛋白FOXM1在卵巢癌中高表达进而促进卵巢癌病情进展，干扰Sp1表达后可以下调FOXM1在卵巢癌的表达，提示Sp1可通过参与调控肿瘤细胞增殖相关转录因子FOXM1在卵巢癌中的表达促进卵巢癌病情进展。

本研究结果显示，恶性组患者血清中的IL-1β、HE4水平均高于良性组和对照组患者，Sp1的阳性表达率均高于良性组和对照组患者（P＜0.05），与既往研究结果一致，说明血清高IL-1β、HE4水平及卵巢组织中Sp1阳性表达与卵巢癌的发生具有一定联系，可作为诊断上皮性卵巢癌的重要肿瘤标志物。同时，通过血清IL-1β、HE4水平及卵巢组织Sp1表达诊断上皮性卵巢癌ROC曲线可知，三者诊断卵巢癌的曲线下面积AUC分别为0.872、0.918、0.817，提示血清IL-1β、HE4水平及卵巢组织Sp1表达情况对上皮性卵巢癌均具有较高的诊断价值，能够作为对于上皮性卵巢癌临床诊断的辅助指标。

血清IL-1β、HE4水平及卵巢组织Sp1表达与卵巢癌的进展具有一定的联系，推测其表达情况能够预测卵巢癌患者的预后。本研究通过为期4年的随访发现，90例上皮性卵巢癌患者的4年生存率为33.33%（30/90），与既往研究结果基本相符。单因素分析结果显示，肿瘤直径、临床分期、病理分化程度、淋巴结转移情况、血清IL-1β、血清HE4水平及卵巢组织Sp1表达均可能对上皮性卵巢癌患者的预后产生影响；多因素Logistic回归分析发现，肿瘤直径、临床分期、病理分化程度、淋巴结转移情况、IL-1β水平、HE4水平及卵巢组织Sp1阳性表达情况均是卵巢癌患者预后的独立影响因素（P＜0.05），提示淋巴结转移情况、临床分期为Ⅲ～Ⅳ分期、中低分化、血清IL-1β、HE4高水平及卵巢组织Sp1阳性表达的患者，其预后往往更差，病死率更高，提示血清IL-1β、血清HE4水平及卵巢组织中Sp1表达能够作为上皮性卵巢癌患者预后评估的重要辅助指标。

综上所述，上皮性卵巢癌患者血清中的IL-1β、HE4水平较高，上皮性卵巢癌组织中Sp1的阳性表达率亦较高，均与患者的预后密切相关。临床可将IL-1β、HE4及Sp1作为上皮性卵巢癌临床诊断及预后预测的重要辅助指标。