奶牛轮状病毒与纽布病毒混合感染诊断

吕珽，汤承，岳华

（西南民族大学畜牧兽医学院，四川 成都 610041）

引起犊奶牛腹泻的病因大致可分为感染性因素和非感染性因素两大类。感染性因素包括细菌、病毒、寄生虫等，非感染性因素主要包括营养条件和环境因素等。常见的引起牛腹泻的病原微生物有牛轮状病毒（BRV）、牛冠状病毒（BCoV）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、产肠毒素大肠杆菌（ETEC）、沙门氏菌（Salmonella）等。近期研究表明，牛诺如病毒（BNoV）和牛纽布病毒（BNeV）是新发腹泻病毒，已广泛流行。实验室检测对犊牛腹泻的准确诊断有重要作用。

1 材料与方法

1.1 临床样本 某牛场20～40 日龄犊牛暴发腹泻，临床表现为精神沉郁，水样腹泻，呼吸急促，体温升高等。采集4份犊奶牛腹泻粪便样本进行实验室检测。

1.2 核酸提取 采用酚-氯仿法提取DNA。采用TrizolTMReagent 试剂盒提取RNA，并用Prime ScriptTM试剂盒反转录合成cDNA。

1.3 七种病原的PCR 检测 检测BRV、BCoV、BVDV、BNoV、BNeV、ETEC、Salmonella等7 种病原的PCR方法按照相关文献报道进行，引物信息见表1。

2 结果

如表1所示，用RT-PCR方法在4份犊奶牛腹泻粪便样本中扩增出了4个长度为231 bp的BRV目的条带和3 个长度为194 bp 的BNeV 的目的条带，BRV检出率为4/4，BNeV检出率为3/4；BCoV、BVDV、BNoV、ETEC 和Salmonella五种病原未检出。

表1 引物序列

根据临床症状及实验室诊断，确诊这起犊奶牛腹泻是由BRV和BNeV混合感染所致。

3 小结

BRV是引起犊牛腹泻的常见病原，BRV感染临床上常采用对症治疗方式进行治疗。由于BRV基因型众多，不同基因型的疫苗缺乏交叉保护，故给疫苗研制造成了困难。

NeV 是杯状病毒科纽布病毒属的唯一成员，能引起犊牛肠道损伤（尤其是十二指肠和空肠）和严重腹泻。目前对其感染只能采取对症治疗，如补液及调节酸碱和电解质平衡，使用抗生素防止继发感染等。