云浮地区RhD阴性献血者抗原分布及不规则抗体调查*

区冠华，区勇勤，黄飞，郭矿玲，谢小琼，高炳谏（云浮市中心血站血型参比室，广东 云浮527300)

人类血型系统分类较为繁杂，可分为血小板特异性、红细胞、白细胞抗原等血型系统，其中红细胞血型系统对输血安全的影响最为明显［1］。红细胞血型系统中ABO血型系统占据首要位置，而Rh血型系统则占据了第二重要位置，属于最为复杂的血型系统，云浮地区Rh系统的抗体也是占比最高的不规则抗体类型［2，3］。通过对云浮地区RhD阴性献血者不规则抗体及抗原分布情况的调查，对于了解本地区RhD阴性献血者血液抗原、抗体特点，对保障用血安全具有重要意义，现将2019年1月～2020年6月云浮地区RhD阴性献血者抗原分布及不规则抗体调查分析情况。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取云浮市中心血站2019年1月～2020年6月接收的101例RhD阴性献血者的血液标本为研究对象，其中男86例，女15例；年龄18～55（32.57±4.98）岁。

1.2 所用设备及试剂本次研究所用设备为：Tecan全自动加样仪、低速离心机、微孔板震荡器、戴安娜卡式离心机、戴安娜孵育器等。所用试剂包括IgM单克隆抗-C、抗-c、抗-E、抗-e血清，均由上海血液生物医药有限责任公司生产，英国Millipore公司提供的抗-D（IgM+IgG）单克隆血清，西班牙Diagnostic Grifols，S.A（盖立复诊断股份公司）提供的抗人球蛋白检测卡（微柱凝胶法），上海血液生物医药有限责任公司生产的抗体筛选红细胞试剂盒。

1.3 检测方法 （1）RhD阴性献血者初筛及确认：采用抗-D（IgM+IgG）单克隆血清对全体献血者进行初步筛查，所应用检测方法为U型板盐水介质法。再应用微柱凝胶法对RhD阴性标本进行鉴定试验，如初筛结果及鉴定结果一致，且均为阴性，则判定为该例献血者RhD阴性，如初筛结果为RhD阴性，鉴定结果为阳性，则进行直接抗人球蛋白试验，若直接抗人球蛋白试验结果为阴性，则该例献血者为不完全D或D变异型；若直接抗人球蛋白试验结果为阳性，则进行放散实验，使之直抗阴性后再进行RhD阴性鉴定试验。（2）抗原表型鉴定：鉴定方法为盐水试管法，所应用试剂为单克隆IgM抗-C/c/E/e试剂。（3）不规则抗体筛查：应用微柱凝胶法对RhD阴性的血液标本进行不规则抗体筛查，严格按照试剂盒说明书要求进行检测。

1.4 统计学处理数据采用SPSS 24.0统计学软件进行处理。计量资料采用x±s表示，行t检验；计数资料采用例（百分率）表示，行χ2检验。P＜0.05示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 云浮地区RhD阴性献血者ABO血型及抗原分布情况分析101例RhD阴性献血者中，ABO血型系统检测结果显示：A型血占比28.71%，B型血占比26.73%，O型血占比43.56%，AB型血占比0.99%；抗原分布结果显示：ccee占比45.54%，Ccee占比44.55%，CCee、ccEE、ccEe、CCEE，分别占比5.94%、1.98%、0.99%、0.99%。见表1。

表1 云浮地区RhD阴性献血者ABO血型及抗原分布情况［n(%)］

2.2 云浮地区不完全D/D变异型献血者ABO血型及抗原分布情况分析2019年1月～2020年6月全体献血者中共检出不完全D/D变异型5例，其中Ccee占比80.00%，CCee占比20.00%。见表2。

表2 云浮地区不完全D/D变异型献血者ABO血型及抗原分布情况

2.3 云浮地区RhD阴性献血者不规则抗体的检出情况分析101例RhD阴性献血者中共检出9例不规则抗体，检出率为8.91%，其中女性RhD阴性献血者的不规则抗体阳性率为26.67%，男性RhD阴性献血者的不规则抗体阳性率为5.81%，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 云浮地区不同性别RhD阴性献血者不规则抗体的检出情况

3 讨论

RhD血型具有极强的免疫原性，其中RhD阴性个体因妊娠或输血等因素与D抗原接触后，自身极易生成抗-D抗体，此类抗体生成后，可迅速破坏输入的红细胞，进而引发严重的溶血性输血反应，因此，对于RhD阴性的患者而言，输血时必须选择同样为RhD阴性献血者的血液［4］。此外，Rh血型系统还存在E/e或C/c抗原，其抗体具有高免疫活性与低效价的特点，这类抗原输血前往往难以检测，但其抗体可在输血后迅速增加并达到高峰值，尽管输血前可采取交叉配血检测相容情况，但仍旧存在较大的风险及隐患，需引起临床的重视。

基于此，本次研究调查分析了云浮地区RhD阴性献血者抗原的分布情况及不规则抗体的检出情况，结果显示：101例RhD阴性献血者中，ccee占比最高，为45.54%，其次为Ccee，占比44.55%，CCee、ccEE、ccEe、CCEE表型的占比则相对较少，且其他表型均未检出。ccee、Ccee两种表型占比为90.09%，与苏州市88.29%、福州地区89.48%的报道结果相近［5，6］。本研究不完全D/D变异型共检出5例，分析其原因：不同表型RBC中D抗原的表达强度也有所差异，因此临床抗-D效价检测多采取纯合子进行，但仍有部分不完全D表型频率难以估算或证实，且检测结果受不同试剂及检测方法的影响较大。实际输血工作中，为防止不完全D/D变异型误检为Rh阳性，此类受血者均应纳入Rh阴性范畴内，而献血者则需纳入Rh阳性范畴内。虽然近年来发现不完全D/D变异型导致输血免疫的情况较为少见，但涉及此类型输血时仍需保持谨慎态度［7，8］。纳入研究的RhD阴性献血者中共检出9例不规则抗体，检出率为8.91%，其中女性RhD阴性献血者的不规则抗体阳性率为26.67%，显著高于男性的5.81%（P＜0.05），分析其原因，可能与女性献血者更易受输血、妊娠刺激作用，因此更易产生不规则抗体相关。

综上所述，云浮地区RhD阴性献血者的抗原表型 分 布 以ccee及Ccee居 多，CCee、ccEE、ccEe及CCEE四类抗原表型其次，其他类型抗原表型则较为少见，加强对RhD阴性献血者抗原分布的检测及不规则抗体的筛查并建立表型库，可以有效降低输血所致免疫学抗体生成风险，对于保障输血安全具有重要意义。