蔬菜中农药残留检测样品前处理方法研究

果布次仁

(西藏贡觉县哈加乡农牧综合服务中心，西藏 昌都 854200)

在一定条件下，有机磷和氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶正常功能起到一定的抑制作用，同时抑制率与农药的浓度呈正相关。在正常情况下，酶通过催化神经传导代谢产物乙酰胆碱水解，其水解产物与显色剂发生反应，产生黄色物质，该产物在食品快速检测仪器中用分光光度针在412 nm 处测定吸光度随时间的变化值并计算抑制率，通过抑制率的高低可以判断出蔬菜是否含有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药残留。在蔬菜中高剂量的有机磷和氨基甲酸脂类农药残留会引发食物中毒和影响身心健康，快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留，可及时发现问题，控制高剂量农药残留蔬菜上市，杜绝发生各类食品安全事故。但是，快速检测结果无法保证不出现假阳性等情况，在我国偏远地区和农村普遍使用快速检测来满足和保障农产品使用安全，一旦出现假阳性等情况，无法及时经气相色谱法等实验技术验证快速检测结果，因此规范的样品前处理方法对于快速检测结果的准确性至关重要，以确保减少和避免假阳性等情况频繁出现。

1 材料及方法

1.1 试剂及设备

试剂配置：量取1 mL缓冲液(100x)，加入100 mL纯净水，摇匀，于常温保存。

试剂：缓冲液，显色剂，酶试剂，底物。

设备：食品安全快速检测仪(深圳市易瑞生物技术股份有限公司，中国)、电子天平、比色皿。漏斗、滤纸、移液枪、枪头、试管、菜板、试管架、剪刀。

样品：小白菜、娃娃菜、木耳、西红柿、胡萝卜、黄瓜、土豆、香菜、香菇。

1.2 样品前处理

1.2.1 整珠提取法

选出样品，擦干表面泥土及灰尘，称取2 g非剪碎整珠样品，放入三角瓶或50 mL 离心管中，加入10 mL 缓冲液，轻轻震摇1^2 min，静置5 min 以上，用滤纸过滤，滤液作为样品待测液[8]。

1.2.2 整体测定法

选出样品，擦干表面泥土及灰尘，剪成1 cm 左右见方碎片，称取2 g 剪碎的样品，放入三角瓶或50 mL 离心管中，加入10 mL 缓冲液，轻轻震摇1^2 min，静置5 min 以上，用滤纸过滤，滤液作为样品待测液。

1.3 对照测试

在比色皿中依次加入3.0 mL 缓冲液，100 μL酶试剂和100 μL 显色剂，混匀；静置10 min，加入100 μL 底物，迅速摇匀，立即上机进行对照测试。对照测试△A 值必须大于0.1(1 min 测试)或0.3(3 min测试)。

1.4 样品测试

在比色皿中依次加入3.0 mL 样品待测液，100 μL酶试剂和100 μL显色剂，混匀，静置10 min，加入100 μL 底物，迅速摇匀，立即上机进行样品测试。

蔬菜作为日常生活所必须的食品，它的安全性直接关系到人们的身体健康，由于蔬菜生产方式主要以分散种植为主，且大部分种植户安全生产意识淡薄，农药使用方法和用量上不统一，导致蔬菜上市后农药残留超标现象相对较多。为避免出现大量的蔬菜农药残留超标蔬菜上市现象，国家出台了蔬菜农药残留快速检测方法和检出限标准(表1)。

表1 部分农药的检出限表

2 结果与分析

2.1 结果判定

蔬菜农药残留快速检测抑制率大于等于50%表示检测结果不合格，在出现阳性结果时需做2 次以上重复检测，按照重复检测结果判定，确保检测结果准确无误；蔬菜农药残留检测抑制率小于50%表示农药含量符合相关标准要求，即检测结果合格。

根据整珠提取法检测结果表2 显示，以下9 批次样品检测结果均合格，按照检测结果和叶绿素含量分析，以下样品中小白菜、西红柿、胡萝卜、香菜适合利用整珠提取法进行样品前处理并检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留。

表2 整株提取法检测结果表

根据整体测定法检测结果表3 显示，以下9 批次样品中，西红柿、黄瓜、胡萝卜、土豆、香菜的检测结果明显高于整珠提取法的检测结果，如叶绿素含量越高会导致整体测定法的检测结果越高，西红柿、黄瓜、胡萝卜等5 种样品应按照整珠测定法进行样品前处理，反之采取整体测定法进行样品前处理。

2.2 结果分析

按照试剂的加入顺序和加入量，加入底物，立刻观察溶液颜色变化情况。若试管内溶液颜色立刻变黄，无逐渐过程，说明底物已经分解，不能再用，若试管颜色一直没变化，表明酶已失效；若试管内溶液颜色逐渐变黄，说明试剂基本正常。样品检测时，室内温度低于37 ℃时，酶反应速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间相对延长，同时确保1 min 的对照测试△A0值在0.1 以上。叶绿素含量较高的蔬菜检测农药残留时会对快速检测结果产生影响，因此按照检测结果表2、表3及叶绿素含量显示，西红柿、黄瓜、胡萝卜、香菜应用整珠提取法进行样品前处理，确保检测结果的规范和准确性。

表3 整体测定法检测结果表

2.3 结 论

农产品安全是关系民生问题的主要因素之一，蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测对农产品安全发展具有重要意义，通过对10 个品种蔬菜采取不同的样品前处理方法，分析了2 种样品前处理方法对不同农产品的适应性，从而避免了农药残留检测过程中假阳性等现象的出现。