何长生 王 倩 王 维 周迎春 王 军 沈 艳 刘 华 苗文萍
安徽省动物疫病预防与控制中心,合肥230091
猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2 型(PCV2)引起的猪的一种传染病,包括一系列症候群,如断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、肉芽肿性肠炎、坏死性淋巴结炎及渗出性皮炎等,偶尔也会引起繁殖障碍,因此可以把PCV2 感染的一系列疾病统称为猪圆环病毒相关疾病(porcine circovirus associated diseases,PCADs),临床上的主要表现为体重下降、呼吸困难、皮肤苍白、消瘦和黄疸[1]。自1991年首先在猪群中发现被PCV2 感染以来,该病在全世界各地蔓延,已成为影响养猪业主要疾病之一。国内,自2000年郎洪武等[2]首次证实该病在我国存在以来,PCV2 感染已遍布包括安徽省在内的全国19 个省市[3]。2010年后,随着国产猪圆环病毒疫苗批准上市,安徽省开始大范围使用猪圆环病毒疫苗。为摸清当前安徽省猪群中PCV2 感染状况及疫苗免疫效果,给猪圆环病毒病防控提供科学依据,笔者组织开展了调查,现将调查结果报告如下。
在安徽省全椒县、裕安区、望江县按照养殖规模,选择大型猪场(存栏量≥5 000 头)3 个、中型猪场(存栏量1 000~5 000 头)4 个、小型猪场(存栏量≤1 000 头)5 个共12 个养殖场,按照大型场采集30~40 份、中型场采集20~30 份、小型场采集10~20 份样品要求,每个场在采集扁桃体的同时采集血清样品,样品与生猪一对一编号,详细记录样品信息,最后共采集扁桃体和血清各289 份,详见表1、2。所有猪场均按程序免疫了猪圆环病毒2 型灭活疫苗。
表1 不同养殖规模猪场样品采集数量
PCV2 荧光定量PCR 检测试剂盒,购自北京试剂元亨动物防疫技术有限公司,批号:20170512P;PCV2 抗体ELISA 检测试剂盒,购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司,批号:PCV20121209E。
荧光PCR 仪(美国BIORAD,型号CFX connect),全自动核酸提取仪(美国热电,型号King-Fisher 96),全自动样品快速研磨仪(上海净信科技公司,型号JXFSTPRP 32),酶标仪(瑞士TECAN 公司,型号SUNRISE)。
采用荧光定量PCR 方法检测PCV2 抗原,采用ELISA 方法检测PCV2 抗体,试验操作按试剂盒说明书进行。同时,采用卡方检验(X2)对数据进行分析。
在289 份猪扁桃体样品中检出34 份PCV2 病原学阳性样品,平均感染率为11.8%。
1)大型猪场、中型猪场、小型猪场猪群PCV2 感染率分别为8%、0%、26%。小型猪场最高,中型猪场最低,经卡方检验(X2),差异极显著(P<0.01)(表3)。
2)生产母猪、后备母猪、保育猪及育肥猪PCV2感染率分别为12%、16%、0%、17%。育肥母猪最高,保育猪最低,经卡方检验(X2),差异极显著(P<0.01)(表4)。
在289 份生猪血清样品中检出267 份PCV2 抗体阳性样品,平均抗体阳性率为92.4%。
1)大型猪场、中型猪场、小型猪场PCV2 农村抗体阳性率分别为96%、82%、98%,均超过了农业农村部规定的不低于70%免疫合格标准,免疫效果良好。小型猪场最高,中型猪场最低,经卡方检验(X2),差异极显著(P<0.01)(表5)。
表2 不同猪群样品采集数量
表3 不同养殖规模猪场样品病原学检测结果
表3 不同养殖规模猪场样品病原学检测结果
2)生产母猪、后备母猪、保育猪、育肥猪PCV2抗体阳性率分别为100%、91%、82%、98%,均超过了农业农村部规定的不低于70%免疫合格标准,免疫效果良好。生产母猪最高,保育猪最低,经卡方检验(X2),差异极显著(P<0.01)(表6)。
表6 不同猪群样品血清学检测结果
调查结果表明,安徽省猪群存在PCV2 隐性感染,其中小型猪场及育肥猪群感染率较高;不同养殖规模、不同生长阶段猪群猪圆环病毒疫苗免疫效果良好。
2012年,秦谷雨等[4]证实安徽省猪群PCV2 感染率为25.8%,曹东阳等[5]调查2014-2015年在江苏、浙江、安徽3 省的PCV2 感染率为31.2%,这与本试验的结果相差较大,究其原因,可能与本试验的样品全部来自临床健康猪群,而曹东阳等调查的样品全部来自临床发病猪有关。
在调查中发现,所有PCV2 病原学阳性的生猪其PCV2 抗体同时为阳性,即同1 头生猪体内PCV2病原和抗体同时存在。这印证了国内学者的观点,即疫苗不能完全消除体内PCV2,只能减少PCV2 在体内的数量,也就是说即使存在特异性免疫抗体,猪体内也可能存在PCV2[6]。这表明,猪场防控猪圆环病毒病不能单纯依靠疫苗免疫,还需要加强生物安全措施,加强饲养管理,减少环境应激因素(如温度、噪音等),同时做好猪瘟、猪繁殖与呼吸道综合征、猪伪狂犬病等疫病免疫,防止其他疫病的混合感染等。