血管生成素和血管抑素在稽留流产患者中表达及意义

袁菲霞，郭奕霞，邓丽梅

(深圳市坪山区人民医院妇产科，广东 深圳 518118)

稽留流产是自然流产的一种类型，是指孕产妇在孕期20周前，产妇宫内的胚胎或胎儿不再发育后在产妇宫腔内稽留，并且未及时自然排出[1]。发病原因复杂，有研究显示与胚胎的染色体异常、内分泌异常、细胞凋亡及母体与胚胎胎盘循环发生障碍、感染、免疫反应甚至环境等因素有关，近年来的研究显示，受精卵到胎盘形成、发展的过程与血管生成程度具有相关性[2～3]。而血管生成素及AS在血管生成的过程中具有重要作用[4]。因此本研究就检测稽留流产患者血清及组织中的Ang-1、Ang-2和AS的表达与稽留流产的关系,具体研究方法及结果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析本院2019年1月-12月自愿稽留流产患者40例为流产组及自愿要求终止妊娠的孕妇40例为对照组。入组病例均为单胎妊娠、孕检中的torch检查、抗子宫内膜抗体、支原体、衣原体、抗核抗体均显示阴性；均无原发及并发糖尿病；均无免疫系统异常、肝肾疾病及肿瘤病史；无精神病史，意识清晰，可自主表达。流产组，年龄17～45岁，平均年龄(29.13±6.58)岁，孕周6～11周，平均孕周(8.41±2.23 )周，孕囊大小1.9～2.7 cm，平均孕囊大小(2.39±0.31)cm，住院时间2～9 d，平均住院天数(2.95±1.20)；对照组，年龄21～43岁，平均年龄(31.78±6.00)岁，孕周6～11周，平均孕周(8.52±2.33)周，孕囊大小1.9～2.7 cm，平均孕囊大小(2.35±0.33)cm，住院时间2～9 d，平均住院天数(3.13±0.88)。两组的一般资料经对比后差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

收集患者静脉血后静置30min，以3000r/min对静脉血进行离心后取得血清，在-80℃条件下保存。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中Ang-1、Ang-2及AS(试剂盒均来自江苏卡尔文公司)，VEGF(血管内皮生长因子)、TNF-α(肿瘤坏死因子-a)、IL-6(白介素-6)，试剂盒均来自科润达生物工程有限公司，操作步骤严格按说明书进行。采取负压吸宫术手机患者的蜕膜标本，使用无菌镊子剔除其周围血块，浸于生理盐水漂洗至无血色，在10%的甲醇溶液中固定1～2天，常规脱水后采取石蜡包埋。采用免疫组化法测定蜕膜组织中Ang-1、Ang-2及AS水平(试剂盒均来自美国Origene公司)；采用免疫组化法染色后测定VEGF、TNF-α、IL-6(试剂盒均来自英国ABCam公司)。

1.3 观察指标

对比两组Ang-1、Ang-2、AS、VEGF、TNF-α、IL-6水平，并观察各因素之间的相关性。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组血清及蜕膜组织中的Ang-1、Ang-2及AS比较

流产组血清的Ang-1、Ang-2及AS水平均低于对照组(P>0.05)，流产组蜕膜组织的Ang-1、Ang-2及AS水平均低于对照组(P<0.05)，见表1。

2.2 两组血清及蜕膜组织中的VEGF、TNF-α和IL-6比较

流产组血清中VEGF、TNF-α和IL-6表达水平均低于对照组，差异均具有统计学意义(P均<0.05)； 流产组蜕膜组织中VEGF、TNF-α和IL-6表达水平均低于对照组，差异均具有统计学意义(P均<0.05)，见表2。

表1 两组血清及蜕膜组织中的Ang-1、Ang-2及AS比较

表2 两组血清及蜕膜组织中的VEGF、TNF-α和IL-6比较

2.3 患者血清及蜕膜组织中的Ang-1、Ang-2、AS及VEGF、TNF-α和IL-6间的相关性

稽留流产患者的蜕膜组织中Ang-1的表达水平与Ang-2呈正相关(r=0．585、P=0.000)；稽留流产患者的蜕膜组织中Ang-1及Ang-2与AS呈负相关(r=-0．610，r=-0.402，r=-0.491，P<0.05) ；稽留流产患者的蜕膜组织中Ang-1及Ang-2与VEGF、TNF-α和IL-6呈负相关(r=-0.597，r=-0.458，r=-0.523，P<0.05)。

3 讨论

目前对稽留流产的发生没有明确的机制及病因。由于妊娠使一种较为复杂且由多种因素影响下进行的过程，胎盘的生长发育的基础是血管的正常发育，因此血管重塑在此过程中承担着重要角色，血管重塑正常进行是妊娠结果良好的保证[5]。有研究显示胎盘血管生成障碍与孕产妇发生稽留流产具有联系。血管生成的过程中需要多种因子合作及调整，血管生成素和AS是众多因子中较为重要的角色[6]。本研究就血管生成素和AS在稽留流产表达情况及意义进行讨论。

本文研究中稽留流产患者的Ang-1、Ang-2及AS水平均低于自主选择流产产妇，原因为Ang-1与Ang-2对胚胎发育、胎盘血管重建起到重要作用，Ang-1与作为一种生理性配体及激动剂可以通过与其他物质结合促进内皮细胞的聚集、分化及趋化，促进血管的内皮细胞迁移及管状结构的形成；而Ang-2是Ang-1的天然拮抗剂，对于减弱血管稳定性及血管重塑具有重要作用[7]。且有研究显示Ang-2与VEGF对血管新生具有相辅相成的作用，当VEGF水平降低，Ang-2则会抑制血管新生并促进已经成熟的血管退化。因此在本文研究中稽留流产患者的Ang-1与Ang-2及VEGF水平均低于自愿要求终止妊娠的孕妇，原因即为稽留流产患者随着生成素1与Ang-2的降低出现一定程度胎盘血管发育程度低或直接出现胎盘的成熟血管直接退化导致产妇发生稽留流产[8]。IL-6是来自T细胞的因子，由母体产生来为胎盘及胚胎提供基础的体液免疫，但稽留流产患者中的IL-6水平低也提示了随着IL-6表达降低，辅助性T细胞表达出现偏离，同时降低TNF-α的水平，导致产妇引发过度免疫后降低胚泡着床能力、形成微小血栓及滋养层细胞发生坏死甚至退化导致稽留流产的发生[9～10]。且上述也显示高水平的Ang-1、Ang-2及AS与促进正常妊娠有关，相关性分析显示稽留流产患者蜕膜组织中Ang-1及Ang-2与AS呈负相关，提示Ang-1及Ang-2的低表达及AS的高表达可能和稽留流产的发病及发展相关。

综上所述，Ang-1、Ang-2的低表达及AS的高表达对稽留流产的发生及发展具有重要作用。