酶联免疫吸附检验与光激化学发光法检测乙肝病毒的临床对比研究

孙兵，何丽娜

中国人民解放军63680 部队医院检验病理科，江苏江阴 214431

乙肝病毒全称为乙型肝炎病毒，是一种DNA 病毒，为引起乙型肝炎的病原体[1]，据流行病学调查显示[2]，2018 年我国乙肝表面抗原阳性率高达6.10%，目前已成为了全球性的公共卫生问题。随着乙肝病毒的蔓延个复制，患者急性、慢性肝炎会逐渐发展为肝组织硬化、肝癌、肝功能衰竭等，给患者的身体健康以及生命安全造成了严重威胁[3]。 目前临床对乙肝病毒的主要预防手段为病毒感染监测，酶联免疫吸附法是常用的检测方法，具有快速、准确等特点，但却只能反映乙肝病毒定性结果[4]。 光激化学发光法是一种新型的检测方法，具有多种优势[5]，该研究就选取该院2018 年12月—2019 年12 月收治的100 例乙肝病毒携带者，分组探讨两种检测法检测检测乙肝病毒的效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院收治的100 例乙肝病毒携带者，均经临床确诊，根据不同检测分为两组，对照组（n=50）接受酶联免疫吸附法检测，其中男28 例、女22 例；年龄17～68 岁，平均（44.25±3.57）岁。观察组（n=50）接受光激化学发光法检测，其中男26 例、女24 例；年龄17～71 岁，平均（44.27±3.52）岁。 两组乙肝病毒携带者一般资料对比差异无统计学意义（P＞0.05）。以上病例均经患者知情同意，医院伦理委员会批准通过。

纳入标准：①符合乙肝诊断标准；②同意参与该研究；③年龄16～72 岁。 排除标准：①患有精神疾病者；②患有严重心脑血管疾病者；③不配合该研究者。

1.2 方法

两组乙肝病毒携带者均按照常规方式获取标本，检测患者乙肝病毒标记物（乙肝核心抗体、乙肝e 抗原、乙肝e 抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原），对照组接受酶联免疫吸附法检测，仪器和试剂：全自动酶标分析仪（型号：ST-360，吸光度：0～4.000 Abs）；全自动洗板机（型号：ST-96W，洗液通道：≥3 个）；乙肝两对半抗体酶联免疫试剂 （货号：S10910148， 规格：96 T）；手动加样，严格根据仪器、试剂说明书进行操作，结果阳性、阴性经酶标分析仪结果判断。 观察组接受光激化学发光法检测，仪器和试剂：自动光激化学发光检测仪（规格：Lica500）及配套乙肝两对半抗体酶联免疫试剂，全自动加样，严格根据仪器、试剂说明书进行操作，若出现单独一项阳性、弱阳性或双阳性，则进行双孔复查，结果阳性则为阳性，反之为阴性。

1.3 观察指标与评价标准

对比两种检测方法的乙肝病毒标记物阳性概率和检测灵敏度。 （1）乙肝病毒标记物阳性概率判定标准：①酶联免疫吸附法检测：以临界OD 值与OD 值得比值为标准， 若乙肝e 抗体与乙肝核心抗体的比值＜1.00，则表示阳性，反之为阴性；若乙肝表面抗体、乙肝表面抗原和乙肝e 抗原的比值＞1.00， 则表示阳性，反之为阴性[6]。 ②光激化学发光法检测：采用定量法判定，若乙肝表面抗体＞10.00 IU/mL，乙肝表面抗原＞0.05 IU/mL，则表示阳性，反之为阴性；以相对光强度（RLU）值和临界RLU 值比值为标准，若乙肝e抗体比值＜1.00，则表示阳性，反之为阴性；若乙肝核心抗体、乙肝e 抗原比值＞1.00，则表示阳性，反之为阴性[7]。 （2）检测灵敏度：以2.00 IU/mL 乙肝表面抗原参比血清，收集两倍阴性血清稀释后分别用光激化学发光法与酶联免疫吸附法检测，查看两种检测方法的最低浓度，浓度越低表示灵敏度越高[8]。

1.4 统计方法

采用SPSS 20.0 统计学软件分析数据，计数资料以[n(%)]表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两种检测方法的乙肝病毒标记物阳性概率对比

观察组乙肝核心抗体、乙肝e 抗原、乙肝e 抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性率分别为70.00%、42.00%、44.00%、24.00%、64.00%， 对照组分别为66.00%、42.00%、30.00%、12.00%、50.00%。 两组乙肝病毒携带者的乙肝病毒标记物中乙肝核心抗体、乙肝e 抗原阳性概率对比差异无统计学意义（P＞0.05）；观察组乙肝病毒标记物中乙肝e 抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性概率明显高于对照组， 差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表1。

表1 两种检测方法的乙肝病毒标记物阳性概率对比[n（%）]

2.2 两种检测方法的灵敏度对比

光激化学发光法的检测最低浓度为0.05 IU/mL；酶联免疫吸附法的检测最低浓度为0.14 IU/mL；0.05 IU/mL＜0.14 IU/mL，说明光激化学发光法的检测灵敏度更高。

3 讨论

研究显示[9]，我国乙型肝炎病毒携带率达15%，且感染率逐年上升，给人们的身体健康乃至社会的安定均造成了严重的影响，因此及早预防、判断、治疗乙肝具有重要意义。检测乙肝病毒标记物是我国早期预防和治疗乙肝患者的重要判断依据，酶联免疫吸附法是临床应用十分广泛的检测方式， 具有操作简便、快捷且结果准确的优势[10]，可通过将已知抗原或抗体附于固相载体表面，观察抗原抗体的反应状态，但该检测方式仅能对乙肝病毒进行定性反映，不能动态监测其变化，所以检测灵敏度较低[11]。

随着医学技术的不断发展，新一代标记免疫测定方法-光激化学发光法被应用于临床， 虽然其起步较晚，但经过十几年的发展，目前已被广泛运用于临床，具有易操作、高精确度、高灵敏度、重复检测等优势，其以悬浮性光激作为载体，相比传统的酶标板，样品反应表面积更大，再加上磁场作用能更加快速和灵活的检测乙肝病毒的动态变化，有效弥补了酶联免疫吸附法的缺点[12]。

观察组乙肝核心抗体、乙肝e 抗原、乙肝e 抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性率分别为70.00%、42.00%、44.00%、24.00%、64.00%， 对 照 组 分别 为66.00%、42.00%、30.00%、12.00%、50.00%。 两组乙肝病毒携带者的乙肝病毒标记物中乙肝核心抗体、乙肝e 抗原阳性概率对比差异无统计学意义（P＞0.05）；观察组乙肝病毒标记物中乙肝e 抗体、 乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性概率明显高于对照组（P＜0.05）。观察组乙肝病毒标记物中乙肝e 抗体、 乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性概率明显高于对照组，说明光激化学发光法的检测准确度更高。 学者刘静等[13]探讨了乙肝病毒血清学检验采用化学发光法与酶联免疫法的效果比照， 结果发现化学发光法HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb、HBsAg 检 出 率 分为45.16%、29.57%、48.39%、54.84%、25.81%, 明 显 高 于 酶 联 免 疫 法 的32.26%、20.43%、35.48%、35.48%、17.20%, 差异具有统计学意义(P＜0.05)，与该研究结果一致。

结果显示， 光激化学发光法的检测最低浓度为0.05IU/mL； 酶联免疫吸附法的检测最低浓度为0.14 IU/mL；0.05 IU/mL＜0.14 IU/mL，光激化学发光法的检测最低浓度低于酶联免疫吸附法，说明前者检测灵敏度更高。 学者张怡莎[14]探讨了化学发光法与酶联免疫吸附测定法在乙肝两对半检测中的应用效果，结果发现两种检验方案的多数血清学标志物模式检验结果基本一致,但化学发光法在抗HbsAg、抗HbeAg 检验阳性率上为100.0%,要显著高于酶联免疫吸附试验的71.4%，与该研究结果一致。

综上所述，两种检测方法均具有一定价值，但光激化学发光法的检测准确度和灵敏度更高，有利于动态监测乙型肝炎。