10种杀菌剂对猕猴桃果实采后青霉病菌的室内毒力测定

安晓霞，张亚男，陈 秀，罗震宇，杨雪珍，王 强，向妙莲，陈 明

10种杀菌剂对猕猴桃果实采后青霉病菌的室内毒力测定

安晓霞，张亚男，陈 秀，罗震宇，杨雪珍，王 强，向妙莲，陈 明*

（江西农业大学 农学院/江西省果蔬采后处理关键技术与质量安全协同创新中心/江西省果蔬保鲜与无损检测重点实验室，江西 南昌 330045）

【目的】扩展青霉是猕猴桃的重要病害之一，严重影响品质与产量。通过试验，测定10种杀菌剂对猕猴桃果实采后青霉病菌（）的毒力。【方法】利用牛津杯法测定不同种杀菌剂对的毒力。【结果】所供10种杀菌剂对均有一定的抑菌作用，250 g/L丙环唑、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、40%双胍三辛烷基EC、95%苯醚甲环唑WP、50%咪鲜胺WP、95%多菌灵 SC、0.5%申嗪霉素EC、500 g/L噻菌灵WP和95%甲基硫菌灵WP的50分别为0.181 6、0.389 2、0.615 4、0.773 6、0.910 6 mg/kg、1.241 9、9.273 2、15.754 0、31.376 0和37.879 1 mg/kg，实验结果表明250 g/L丙环唑抑菌效果最好，95%甲基硫菌灵WP毒力最弱。【结论】研究通过杀菌剂抑菌效果筛选可为猕猴桃果实采后青霉病的防治提供理论依据和技术参考。

猕猴桃青霉病；采后贮藏；杀菌剂；室内毒力测定

【研究意义】猕猴桃（Planch）隶属猕猴桃科（Actinidiaceae）的野生落叶植物，原产于我国，果实皮薄多汁、营养丰富，风味浓郁，是人们喜爱的水果之一[1-2]。猕猴桃为呼吸跃变型浆果，采后贮藏极易发生呼吸跃变，易被病原菌侵染而造成果品品质下降，果实腐烂，缩短货架期等问题[3-4]。【前人研究进展】由扩展青霉（）引起的猕猴桃青霉病是猕猴桃果实成熟期和釆后贮藏的重要病害之一[5-6]，不仅导致果实腐烂变质，对我国猕猴桃产业造成严重经济损失，而且其分泌产生的展青霉素（Patulin, PAT）是一种神经毒物，具有致畸性和致癌性，给食品安全带来潜在威胁[6-7]。青霉病菌（）主要通过皮孔和果皮伤口侵染果实，破坏细胞膜的完整性，促进乙烯的释放[8-9]，加剧腐烂，果实贮运期间主要通过接触进行传播。猕猴桃青霉病初期为水渍状淡褐色圆形病斑，病部果皮变软腐烂，扩展迅速[10-11]。【本研究切入点】目前主要通过化学药剂控制猕猴桃采后青霉病，虽有一定的抑制效果，但长期使用药剂易造成农药残留，影响果品品质，并会导致病菌抗药性，甚至破坏生态安全，因此急需寻找高效低毒的理想替代药剂来减缓这种危害[12]。【拟解决的关键问题】本实验采用牛津杯法[13-14]，测定10种不同药剂对扩展青霉（）的毒力，从而筛选出有效药剂，为制定猕猴桃果实采后青霉病的防治提供理论依据和技术参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试病原菌 猕猴桃青霉病菌（）由江西农业大学农学院植物病理实验室提供。分离自贮藏期‘红阳’猕猴桃病果，分离纯化后-80 ℃保存，试验前活化备用。

1.1.2 培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar, PDA）：葡萄糖20.0 g，琼脂18.0 g，马铃薯20 g，蒸馏水1 000 mL。

1.1.3 供试药剂 供试药剂共10种（表1），由江西农业大学农学院植物保护系农药实验室提供。

表1 10种供试药剂

1.2 10种杀菌剂对猕猴桃果实青霉病菌的室内毒力测定

采用牛津杯法[13-14]，测定10种杀菌剂对猕猴桃青霉病菌的毒力。药剂系列浓度的配置在无菌操作条件下进行，每种药剂配置成7个浓度梯度的母液。青霉病菌（）培养7 d左右用0.9%生理盐水洗脱孢子，配置成浓度为106spores/mL的青霉孢子液；待三角瓶中PDA培养基（54 mL）冷却至45 ℃左右后，每瓶培养基中加入6 mL孢子悬浮液，摇匀，制成含扩展青霉孢子平板；含菌平板凝固后，将直径为8.0 mm的牛津杯置其中心位置，每个牛津杯中加入配制好的7个浓度梯度的药液25 μL，以加入等体积的无菌水为对照，每处理重复3次。置25~28 ℃恒温培养箱内培养，逐日观察，采用十字交叉法量取抑菌圈直径，按以下公式：抑菌率/%=（抑菌圈平均直径/培养皿直径）×100计算各处理的抑菌圈直径平均值及抑菌率。

以药剂质量浓度（mg/kg）对数值为横坐标（），采用DPS统计软件进行统计分析，以抑菌率机率值为纵坐标（），绘制回归直线，求出毒力回归方程和相关系数（），计算出50。

2 结果与分析

10种杀菌剂的测定结果如表2所示。50值越小，表明药剂对病菌的毒力指数越高[13]。由表2可知，250 g/L丙环唑EC、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、40%双胍三辛烷基EC、95%苯醚甲环唑WP、50%咪鲜胺WP对猕猴桃青霉病菌的50值较小，分别为0.181 6、0.389 2、0.615 4、0.773 6、0.910 6和1.241 9 mg/kg，而250 g/L丙环唑EC对猕猴桃青霉病菌的毒力最强，其50值为0.181 6 mg/kg；95%多菌灵SC、0.5%申嗪霉素EC对猕猴桃青霉病菌的毒力相对弱，其50值分别为9.273 2 mg/kg、15.754 0 mg/kg；500 g/L噻菌灵WP、95%甲基硫菌灵WP毒性较低，50分别为31.376 0、37.879 1 mg/kg。

表2 10种杀菌剂对P. expansum的室内毒力测定结果

3 结论与讨论

本试验测定了10种杀菌剂对的毒力，结果表明，供试的10种杀菌剂对均有一定的抑菌活性。250 g/L丙环唑EC、95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP和40%双胍三辛烷基EC对猕猴桃青霉病菌都具有较高的毒力，50均小于1.0 mg/kg，其中250 g/L丙环唑EC的50值最低，为0.181 6 mg/kg，可以考虑与95%肟菌酯WG、96%戊唑醇WP、40%双胍三辛烷基EC、95%苯醚甲环唑WP、50%咪鲜胺交替使用，提高田间防治效果。本试验中，95%甲基硫菌灵WP、500 g/L噻菌灵WP和0.5%申嗪霉素EC对抑菌活性较低，其50分别为37.879 1，31.376 0，15.754 0 mg/kg，说明可能已经对上述杀菌剂产生了抗药性。甲基硫菌灵等杀菌剂广泛应用于果蔬采后病害防治当中，但因其作用位点单一，长期使用同一种杀菌剂，抗药性问题越来越严重。因此，亟需深入研究对甲基硫菌灵等杀菌剂的抗性水平。

猕猴桃果实采后青霉病的防控可通过低温冷藏[15]和粘红酵母处理[16]等多种方式，目前主要通过化学杀菌剂控制该病害。因单一化学杀菌剂重复使用的局限性，研究者建议筛选多种杀菌剂交替或者复配使用以维持良好的防治功效。此外，本试验10种杀菌剂对室内毒力测定结果，仅限于在离体条件下上述杀菌剂对猕猴桃青霉病菌的直接活性，尚不能反映杀菌剂的渗透能力，所以不同杀菌剂对猕猴桃果实采后青霉病防控的贮藏试验需待后续进一步验证。

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Indoor Toxicity Test of Ten Kinds of Fungicides Againstin Kiwifruit

AN Xiaoxia, ZHANG Ya’nan, CHEN Xiu, LUO Zhenyu, YANG Xuezhen, WANG Qiang, XIANG Miaolian, CHEN Ming*

(Collaborative Innovation Center of Postharvest Key Technology and Quality Safety of Fruits and Vegetables in Jiangxi Province, Jiangxi Key Laboratory for Postharvest Technology and Non­destructive Testing of Fruits & Vegetables, College of Agronomy, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China)

[]is one of the important diseases of kiwifruit, which seriously affects the quality and yield of kiwifruit. Indoor toxicity test of 10 fungicides againstin kiwifruit was determined. []The Indoor toxicity test of different fungicides againstwas carried out with oxford cup method. [] The results showed that all the 10 fungicides had certain inhibition effect onand 250 g/L. The50of 250 g/L Propiconazole, 95% Trifloxystrobin, 96% Tebuconazole, 40% Iminoctadine tris, 95% Difenoconazole, 95% Prochloraz, 95% Carbendazim, 0.5% Phenazine-1-carboxylic acid, 500 g/L Probenazole and 95% Thiophanate-methyl were 0.181 6, 0.389 2, 0.615 4, 0.773 6, 0.910 6, 1.241 9, 9.273 2, 15.754 0, 31.376 0 and 37.879 1 mg/kg respectively. Propiconazole had the best inhibition effect while 95% Thiophanate- methyl was the weakest one. [] In this study, the screening of antibacterial effects of fungicides could provide a theoretical basis and technical reference for the prevention and control of blue mold in postharvest kiwifruit.

kiwifruit blue mold; postharvest storage; fungicides; indoor toxicity test

S763.11；S663.4

A

2095-3704（2021）01-001-04

2021-01-05

2021-02-10

江西省果蔬采后处理关键技术及质量安全协同创新中心项目（JXGS-03）和江西省自然科学基金项目（20192 BAB204018）

安晓霞（1993—），女，硕士生，主要从事果实采后生理研究，1275015991@qq.com；*通信作者：陈明，博士，副教授，mingchen@jxau.edu.cn。

安晓霞, 张亚男, 陈秀, 等. 10种杀菌剂对猕猴桃果实采后青霉病菌的室内毒力测定[J]. 生物灾害科学, 2021, 44(1):1-4.