网织红细胞的检测进展及其参数在临床疾病中的应用

王学菊

天津市北辰医院 （天津 300400）

网织红细胞（reticulocyte，RET）检测能充分反映骨髓红系造血水平。一般红细胞形成过程中，晚幼红细胞的增殖形成需分裂3～4次，个数转为6～8个，且红细胞不再分裂，排除细胞核后形成RET[1]。正常情况下，骨髓仅是由RET、成熟红细胞释放并进入血液内，对疾病的评估、预后起到参考作用，人工显微镜法是RET 的主要检测方法，但检测指标单一、稳定性差、耗时长，影响疾病判断准确度。近年来，医学领域检测技术明显提高，使RET 检测水平极大提高。另外，各种检测仪器的推陈出新，使多种检测项目的各类型参数数量得以增加。目前，RET 项目参数主要有RET 绝对值（RET#）、RET 百分比（reticulocyte percentage，RET%）、未成熟RET 比率（immature reticulocyte fraction，IRF）、 低 荧 光 强 度RET 比 率（low fluorescent reticulocyte，LFR）、中荧光强度RET 比率（middle fluorescent reticulocyte，MFR） 以 及 高 荧 光 强 度RET 比 率（high fluorescent reticulocyte，HFR）[2]。不同参数是否起到不同作用需进行阐明。现本研究对RET 的检测方法以及其参数应用情况进行综述，旨在为疾病诊断、疗效评定提供参考。

1 RET 检测技术

1.1 手工计数

手工计数分为玻片法及试管法，但玻片法的准确度受血液水分挥发、染色时间等主观因素影响，故被试管法替代；试管法易掌握、重复性高，但仍有诸多因素影响。Miller 窥盘法是早期应用的手工计数法，检测RET 的主要标准性方法，由国际血液学标准化委员会推荐[3]；该方法是将具备1:9比例正方形计数方格Miller 窥盘放置在显微镜目镜内，计数小格红细胞数，即可明确总体数目。但早期手工计数检测准确度受检验人员经验的影响，且操作耗时长，准确度、重复性有一定局限性，故逐渐被取代。

1.2 自动分析仪

血细胞分析仪具备耗时短、测定结果准确度高、自动化强等优势，逐渐用于各级医院血液常规检查中。流式细胞仪较传统检测方法更加简便，灵敏度、特异度均较高，能够直观反映红细胞形态学改变，检测病变细胞表面抗原表达。汪梅花和赵康[4]证实了流式细胞术可准确分析急性白血病患者的免疫表型。徐芬等[5]发现流式细胞术检测RET 参数，有助于判断红细胞的活动度，了解其参数在新生儿溶血病自然病程中的变化规律。国内血细胞分析仪迈瑞6800血细胞分析仪，采用流式细胞法及激光射频法进行RET 的检测。随后美国拜尔公司推出多功能红细胞分析仪，利用容量、电导、光散射以及电阻抗、荧光分析仪技术等，测定结果准确、自动化强，逐渐取代手工计数。

2 RET 参数分类

随着全自动分析仪的广泛应用，RET 相关参数不断增加，且能精确得到各种参数，如RET#、RET%、IRF、LFR、MFR、HFR 等，检测荧光越高，RET 含核酸量越高，细胞幼稚程度越高；IRF是反映幼稚细胞占RET总数的比例，是MFR 与HFR 之和[6]。通常健康者外周血内主要为LFR，若骨髓刺激，未成熟细胞进入外周血，使相关参数发生改变。因此，RET 参数对肾衰竭、贫血、肝脏疾病等有一定参考意义。

3 疾病应用

3.1 缺铁性贫血

缺铁性贫血主要表现为小细胞低色素性贫血，骨髓铁染色、血清铁参数等应用各具优劣势，前者有一定创伤性，后者评价红细胞生成有一定局限性、灵敏度差。李绵绵等[7]表明IRF、RET 生成指数（reticulocyte production index，RPI）可更好地评价骨髓造血功能。朱琼等[8]表明缺铁性贫血患儿REF%高于健康儿童，且动态评估红细胞参数可早期诊断儿童缺铁性贫血，判断补铁效果及儿童生长发育。因此，就国内RET 参数判定而言，IRF 可作为早期检测缺铁性贫血的重要指标。

3.2 溶血性贫血

溶血性贫血主要是由红细胞存活时间缩短，且骨髓代偿功能下降所致。红细胞膜缺陷、血红细胞异常及酶缺陷等内在因素以及免疫性、非免疫性等外在因素均可造成红细胞寿命缩短[9]。韩启福等[10]表明溶血性贫血患者RET%、RET#、IRF、MFR 和HFR 明显高于健康对照人群，红细胞计数、血红蛋白水平、LFR 均低于健康对照人群。Li WW 等[11]报道不同贫血之间RET%存在差异，不同溶血特征的综合评估简单、实用、有效。通常，溶血性贫血患者促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）应激性增加，促使骨髓造血系统不断释放REF，故而会导致HFR、MFR 及IRF 表达增加。黎海江等[12]对自身免疫性溶血性贫血患者采用血液置换及洗涤红细胞输注，治疗后RET 相关参数下降。因此，根据RET 相关参数检测结果可用于诊断溶血性贫血，为临床诊断、治疗提供可靠的参考依据。

3.3 终末期肾病贫血

肾脏是释放EPO 的重要脏器。终末期肾病或肾移植的患者EPO 释放量下降，故会引起贫血，其中部分患者因循环铁缺乏，且无法满足红系造血，造成功能性缺铁。徐茂茂和汪秀英[13]的研究表明慢性肾功能不全合并贫血患者LFR 显著高于非肾病贫血患者，RET#、IFR、MFR 以及HFR 低于非肾病贫血患者。戴学庆和蔡守兵[14]证实对RET各种参数的测定，能作为诊断、治疗肾性贫血的重要指标，反映机体骨髓造血功能，观察红系生长状况。因此，RET参数可相应作为判断肾性贫血疾病的重要标准。

3.4 恶性肿瘤放化疗

目前，恶性肿瘤患者在放化疗时，主要是判定白细胞计数及血小板计数，若两者表达量下降，则表明骨髓抑制明显，并可能出现感染、出血风险。张硕[15]的研究表明急性白血病患者化疗后RET#、RET%、IRF 以及白细胞计数均等降低，化疗第4天开始，IRF 逐渐降低且显著，化疗第7天开始，RET#、RET%水平明显降低。叶火林等[16]证实，化疗第14天开始，肿瘤患者IRF、RET 表达下降，且与化疗后7 天无明显差异，化疗后21 天开始，IRF 及RET 表达明显升高，而且患者化疗后白细胞减少程度与IRF、RET 表达具有正相关性。因此，IRF 和RET 表达可作为评估肿瘤化疗后骨髓造血功能早期恢复的主要指标，并与白细胞计数呈正相关，有积极的临床意义。故此根据RET 参数变化，较白细胞计数、红细胞计数更具应用价值，能准确评估骨髓抑制恢复状况。

3.5 骨髓移植

骨髓移植前，患者需要先接受放化疗破坏机体病态的造血功能，随后输注大量的造血干细胞，实现造血以及免疫系统重建的目的。黎雯等[17]指出异基因造血干细胞移植联合输注内皮祖细胞后RET 数量明显升高。当前，通过RET 及绝对中性粒细胞计数监测，可评估骨髓移植患者造血功能恢复效果，但多种因素会影响RET 的释放，因此在应用时需综合其他指标进行判断。

3.6 肝脏疾病

肝脏是人体造血的重要器官，肝脏病变会影响机体正常造血系统的功能，进而使红细胞异常。另外，肝细胞破坏会引起人体营养吸收异常，铁元素、叶酸等成分吸收不足，使细胞DNA 合成与成熟功能受阻，合成速度减慢，造成细胞核无法在短时间内分裂，最后形成巨细胞贫血或缺铁性贫血，导致RET 改变[18]。陆国伟等[19]表明肝硬化患者RET 参数高于健康体检者，而联合凝血功能、肝功能以及RET 参数，可提高疾病诊断准确度。魏三舟等[20]提示慢性丙型肝炎病毒感染患者RET 比例、血清EPO 水平高于非贫血患者，证实丙型肝炎病毒相关性贫血的发生与自身免疫相关。因此，肝脏疾病患者存在RET 参数改变，但并非属于特异性指标，仍需进一步探讨，或联合其他指标检测。

4 结论

随着RET 检测技术的完善、全自动及多功能血液分析仪的应用，使临床检测更加准确、方便，且经济成本低，受到临床医师的青睐。目前，RET 参数应用日渐广泛，在贫血性疾病、肝脏疾病、肾脏疾病、肿瘤等疾病的辅助诊断、治疗判定及预后评估中有积极的应用价值，且较侵入性操作更具优势。可见，随着检测技术的不断发展使其参数不断更新，这将逐渐成为疾病诊断、治疗等的新方向。