木瓣树枝叶甲醇提取物的化学成分

陈 玲，戴伟锋，张 敉

(昆明理工大学生命科学与技术学院，云南 昆明 650500)

木瓣树(XylopiavielanaPierre)为木瓣树属(XylopiaLinn.)高大乔木，分布于热带和亚热带地区[1]。在中国民间，木瓣树树皮可用于制作通经剂，叶可用于治疗风湿病和疼痛；在越南南部，木瓣树还可用于治疗疟疾[2]。从木瓣树根及叶中已发现64个化合物，包括倍半萜二聚体类、生物碱类及苯环衍生物，其中，倍半萜二聚体类及生物碱类化合物具有一定的抗炎和抗肿瘤活性[3-4]。为深入了解木瓣树化学成分，丰富该属植物化合物库，本研究首次对木瓣树枝叶进行了化学成分分离和鉴定，以期为该植物后续活性研究提供物质基础。

1 材料和方法

1.1 材料

野生木瓣树枝叶于2016年8月采自广西防城港乌头村附近，由昆明植分生物技术有限公司张君鉴定。

主要仪器：Agilent 1200 Series 液相色谱仪和Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)(美国Agilent公司)，LC3000型半制备液相色谱仪(北京创新通恒科技有限公司)，AUW120D电子天平(日本岛津公司)，Bruker HD 600M核磁共振波谱仪(瑞士Bruker BioSpin公司)。

主要试剂：柱层析硅胶(100～200目，200～300目)(青岛海洋化工有限公司)，反相C18硅胶(40～63 μm)、甲醇(色谱纯)和乙腈(色谱纯)(德国Merck公司)，MCI gel CHP 20P柱填料(75～150 μm)(日本三菱化学公司)，Sephadex LH-20(20～100 μm)(美国GE公司)，HSGF254薄层层析硅胶板(烟台市化学工业研究所)。

1.2 方法

将经通风干燥的木瓣树枝叶(6.46 kg)粉碎后用20 L甲醇在室温下浸提8次，每次24 h；合并甲醇提取液，减压浓缩后得到总浸膏600 g；用2 L去离子水将总浸膏混悬，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液分别减压浓缩得到石油醚部分78.0 g、乙酸乙酯部分103.6 g及正丁醇部分32.5 g。

石油醚部分经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯溶液(体积比1∶0至0∶1)进行梯度洗脱，得到Fr.A至Fr.H共8个部分，其中，Fr.B经ODS柱(体积分数40%～100%的甲醇-水溶液)、MCI柱(体积分数60%～80%的甲醇-水溶液)、制备薄层色谱〔石油醚-乙酸乙酯溶液(体积比1∶2)〕和半制备液相色谱(体积分数60%甲醇-水溶液)分离得到化合物9(2.0 mg)和化合物6(1.5 mg)。乙酸乙酯部分经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯溶液(体积比1∶0至0∶1)进行梯度洗脱，得到Fr.I至Fr.L共4部分，其中，Fr.I经Sephadex LH-20柱〔甲醇-二氯甲烷溶液(体积比1∶1)〕、ODS柱(体积分数30%～90%的甲醇-水溶液)和MCI柱(体积分数55%～85%的甲醇-水溶液)分离得到化合物4(1.0 mg)和化合物7(1.4 mg)，Fr.K经MCI柱(体积分数10%～80%的甲醇-水溶液)洗脱得到Fr.K-1至Fr.K-3，其中，Fr.K-1用ODS柱(体积分数50%～100%的甲醇-水溶液)和Sephadex LH-20柱〔甲醇-二氯甲烷溶液(体积比1∶1)〕纯化后经半制备液相色谱柱得到化合物1(8.3 mg，流动相为体积分数40%乙腈-水溶液)、化合物2(3.2 mg，流动相为体积分数25%乙腈-水溶液)和化合物3(2.7 mg，流动相为体积分数25%乙腈-水溶液)，Fr.K-3经Sephadex LH-20柱〔甲醇-二氯甲烷溶液(体积比1∶1)〕得到Fr.K-3-1至Fr.K-3-4，Fr.K-3-4用ODS柱(体积分数25%～40%的甲醇-水溶液)纯化后经半制备液相色谱柱(体积分数35%甲醇-水溶液)得到化合物5(4.3 mg)。正丁醇部分经MCI柱(体积分数10%～100%的甲醇-水溶液)得到Fr.M至Fr.Q共5个部分，其中，Fr.P经ODS柱(体积分数33%～68%的甲醇-水溶液)得到Fr.P-1至Fr.P-12，Fr.P-3用Sephadex LH-20柱〔甲醇-二氯甲烷溶液(体积比1∶1)〕和ODS柱(体积分数30%～42%的甲醇-水溶液)纯化后经半制备液相色谱(体积分数35%甲醇-水溶液)得到化合物8(1.1 mg)。以上分离得到的9个化合物经1D NMR核磁分析及与相关文献比对确定其结构。

2 结 果

化合物1：白色粉末；C18H19NO4；薄层层析(TLC)经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为亮黄色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：7.44(1H，d，J=15.6 Hz，H-7′)，7.11(1H，m，H-2′)，7.05(2H，dd，J=8.3，1.6 Hz，H-2，6)，7.01(1H，m，H-6′)，6.79(1H，d，J=8.2 Hz，H-5′)，6.72(2H，m，H-3，5)，6.40(1H，d，J=15.7 Hz，H-8′)，3.87(3H，m，OCH3)，3.46(2H，t，J=7.4 Hz，H-8)，2.75(2H，d，J=7.4 Hz，H-7)；13C-NMR(CD3OH，150 MHz)δ：169.2(C-9′)，156.9(C-4)，149.9(C-4′)，149.3(C-3′)，142.1(C-7′)，131.2(C-1)，130.7(C-2)，130.7(C-6)，128.1(C-1′)，123.2(C-6′)，118.6(C-8′)，116.4(C-5′)，116.2(C-3)，116.2(C-5)，111.4(C-2′)，56.3(OCH3)，42.6(C-8)，35.8(C-7)。以上波谱数据与文献[5]相关数据一致，鉴定其为N-反式阿魏酰酪胺(N-trans-feruloyltyramine)。

化合物2：白色粉末；C18H19NO4；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为亮黄色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：7.32(1H，d，J=2.2 Hz，H-2′)，6.95(2H，dd，J=8.8，2.8 Hz，H-2，6)，6.88(1H，dd，J=8.4，2.4 Hz，H-6′)，6.69(1H，dd，J=8.2，2.5 Hz，H-5′)，6.64(1H，d，J=8.7，2.5 Hz，H-5)，6.56(1H，dd，J=12.5，3.0 Hz，H-7′)，5.76(1H，dd，J=12.7，2.6 Hz，H-8′)，3.78(3H，d，J=2.7 Hz，OCH3)，3.35(2H，t，J=7.5 Hz，H-8)，2.65(2H，t，J=7.5 Hz，H-7)；13C-NMR(CD3OH，150 MHz)δ：170.3(C-9′)，156.9(C-4)，148.6(C-3′)，148.5(C-4′)，138.4(C-7′)，131.2(C-1)，130.7(C-2)，130.7(C-6)，128.5(C-1′)，124.9(C-6′)，121.5(C-8′)，116.2(C-3)，116.2(C-5)，115.8(C-5′)，113.9(C-2′)，56.3(OCH3)，42.4(C-8)，35.6(C-7)。以上波谱数据与文献[5]相关数据一致，鉴定其为N-顺式阿魏酰酪胺(N-cis-feruloyltyramine)。

化合物3：白色粉末；C38H40N2O10；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为亮黄色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：7.25(1H，s，H-4)，6.90(2H，d，J=8.5 Hz，H-2‴，6‴)，6.79(2H，d，J=8.4 Hz，H-2″，6″)，6.74(1H，s，H-5)，6.60(4H，t，J=8.7 Hz，H-3″，5″，3‴，5‴)，6.29(2H，s，H-2′，6′)，4.81(1H，d，J=1.2 Hz，H-1)，3.88(3H，s，H-6-OCH3)，3.66(7H，s，H-3′，5′-OCH3，H-2)，3.53(3H，s，H-8-OCH3)，3.36(2H，dt，J=13.9，7.1 Hz，H-α)，3.30(2H，m，H-α′)，2.64(2H，t，J=7.2 Hz，H-β)，2.50(2H，td，J=6.8，3.8 Hz，H-β′)；13C-NMR(CD3OH，150 MHz)δ：174.0(C-2a)，170.0(C-3a)，156.8(C-4"，4‴)，149.2(C-6)，149.0(C-5′)，149.0(C-3′)，146.9(C-8)，143.1(C-7)，135.3(C-1′)，135.3(C-4′)，135.1(C-4)，131.1(C-1″，1‴)，130.8(C-2″，2‴)，130.8(C-6″，6‴)，127.1(C-3)，125.1(C-8a)，124.3(C-4a)，116.2(C-3″，3‴)，116.2(C-5″，5‴)，109.0(C-5)，105.9(C-2′)，105.9(C-6′)，60.8(C-8-OCH3)，56.7(C-6-OCH3)，56.6(C-3′，5′-OCH3)，50.2(C-2)，42.8(C-α′)，42.5(C-α)，41.6(C-1)，35.6(C-β′)，35.5(C-β)。以上波谱数据与文献[6]相关数据一致，鉴定其为1，2-二氢-6，8-二甲氧基-7-羟基-1-(3，5-二甲氧基-4-羟基苯基)-N1，N2-双-[2-(4-羟基苯基)乙基]-2，3-萘二甲酰〔1，2-dihydro-6，8-dimethoxy-7-hydroxy-1-(3，5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl)-N1，N2-bis-[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]-2，3-naphthalene dicarboxamide〕。

化合物4：无色油状物；C10H12O4；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为浅棕色斑点；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：12.00(1H，s，OH-2)，6.21(1H，s，H-5)，5.16(1H，s，OH-4)，3.92(3H，s，OCH3)，2.46(3H，s，CH3-6)，2.10(3H，s，CH3-3)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：172.7(C=O)，163.3(C-4)，158.1(C-2)，140.3(C-6)，110.7(C-5)，108.6(C-3)，105.3(C-1)，52.0(OCH3)，24.3(CH3-6)，7.8(CH3-3)。以上波谱数据与文献[7]相关数据一致，鉴定其为2，4-二羟基-3，6-二甲基苯甲酸甲酯(methyl 2，4-dihydroxy-3，6-dimethylbenzoate)。

化合物5：白色无定形粉末；C8H8O4；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为淡紫色斑点；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：7.33(2H，m，H-2，6)，6.72(1H，d，J=8.7 Hz，H-5)，3.75(3H，s，OCH3)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：168.8(C-7)，151.8(C-4)，146.2(C-3)，123.6(C-6)，122.5(C-1)，117.3(C-5)，115.8(C-2)，52.3(OCH3)。以上波谱数据与文献[8]相关数据一致，鉴定其为3，4-二羟基苯甲酸甲酯(methyl 3，4-dihydroxybenzoate)。

化合物6：无色油状物；C19H32O2；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为深紫色斑点；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：5.79(1H，dt，J=10.7，7.4 Hz，H-7)，5.44(1H，d，J=10.7 Hz，H-8)，3.49(3H，s，H-OCH3)，2.33(2H，m，H-6)，2.30(2H，m，H-2)，2.27(2H，dd，J=7.4，1.4 Hz，H-11)，1.52(2H，m，H-12)，1.41(2H，m，H-3)，1.31-1.25(1H，m，H-15)，1.24-1.18(4H，m，H-5)，0.87(3H，t，J=6.8 Hz，H-18)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：174.4(C-1)，142.3(C-7)，109.7(C-8)，94.8(C-10)，77.3(C-9)，51.6(C-OCH3)，34.2(C-2)，31.0(C-16)，29.9(C-6)，29.4(C-5)，29.3(C-4)，29.1(C-15)，29.0(C-12)，28.8(C-13)，28.7(C-14)，24.9(C-3)，22.8(C-17)，19.7(C-11)，14.3(C-18)。以上波谱数据与文献[9]相关数据一致，鉴定其为(Z)-7-十八烯-9-炔酸甲酯〔(Z)-7-octadecen-9-ynoic acid methyl ester〕。

化合物7：白色无定形粉末；C22H26O8；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为紫色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：6.63(4H，d，J=3.4 Hz，H-2，6，2′，6′)，4.83(1H，d，J=6.1 Hz，H-7)，4.39(1H，d，J=6.9 Hz，H-7′)，4.10(1H，d，J=9.4 Hz，H-9′a)，3.83(1H，m，H-9′b)，3.81(12H，d，J=2.1 Hz，H-3，3′，5，5′-OCH3)，3.77(1H，d，J=8.7 Hz，H-9a)，3.37(1H，m，H-8)，3.29(1H，d，J=10.7 Hz，H-9b)，2.90(1H，q，J=7.0 Hz，H-8′)；13C-NMR(CD3OH，150 MHz)δ：149.3(C-3′，5′)，149.2(C-3，5)，136.2(C-4′)，135.5(C-4)，133.2(C-1′)，130.6(C-1)，104.4(C-2′，6′)，103.9(C-2，6)，89.6(C-7′)，83.6(C-7)，72.0(C-9′)，70.7(C-9)，56.7(C-3，5，3′，5′-OCH3)，55.8(C-8′)，51.2(C-8)。以上波谱数据与文献[10]相关数据一致，鉴定其为(-)-表丁香树脂醇〔(-)-epi-syringaresinol〕。

化合物8：白色无定形粉末；C22H26O8；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为紫色斑点；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：6.58(4H，s，H-2′，6′)，4.73(2H，d，J=4.1 Hz，H-1′)，4.28(2H，ddd，J=9.2，4.5，2.1 Hz，H-4a，8a)，3.90(12H，s，H-3′，5′-OCH3)，3.89(2H，s，H-4b，8b)，3.09(2H，m，H-1，5)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：147.2(C-3′，5′)，134.3(C-4′)，132.2(C-1′)，102.7(C-2′，6′)，86.2(C-2，6)，71.9(C-4，8)，56.5(C-3′，5′-OCH3)，54.5(C-1，5)。以上波谱数据与文献[11]相关数据一致，鉴定其为(-)-丁香树脂醇〔(-)-syringaresinol〕。

化合物9：白色无定形粉末；C13H6Cl4O2；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇混合液喷雾显色为深紫色斑点；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：8.12(1H，d，J=8.6 Hz，H-6)，7.57(1H，d，J=2.3 Hz，H-3)，7.51(1H，d，J=2.7 Hz，H-3′)，7.41(1H，dd，J=8.5，2.2 Hz，H-5)，7.33(1H，dd，J=8.7，2.6 Hz，H-5′)，7.23(1H，s，H-6′)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：161.7(C-7)，145.4(C-1′)，139.7(C-2)，136.1(C-4)，133.3(C-5)，132.4(C-4′)，131.5(C-3)，130.3(C-3′)，128.1(C-6′)，127.8(C-2′)，127.3(C-6)，126.2(C-1)，124.6(C-5′)。以上波谱数据与文献[12]相关数据一致，鉴定其为2，4-二氯苯基2，4-二氯苯甲酸酯(2，4-dichlorophenyl 2，4-dichlorobenzoate)。

本研究从木瓣树枝叶甲醇提取物中分离鉴定出9个已知化合物，包括3个酰胺类(化合物1、2和3)、3个酯类(化合物4、5和6)、2个木脂素类(化合物7和8)以及1个苯甲酸类(化合物9)。以上化合物均首次从木瓣树中发现，为木瓣树进一步的活性研究提供物质基础。