慢性自发性荨麻疹患者血清IL-35、IL-17和TGF-β1 水平变化及临床意义

秦凯炜 陶艳霞 王家瑞

重庆市开州区人民医院皮肤烧伤科，重庆 405400

慢性自发性荨麻疹（chronic spontaneous urticaria，CSU）是一种皮肤科常见的慢性疾病，也称为慢性特发性荨麻疹，临床主要特点是自发性发生的风团，伴有剧烈瘙痒，没有明显的刺激，发病时间通常超过6 周[1-2]。CSU 的发病机制尚不清楚，可能的原因包括急性或慢性感染，对食物、药物或昆虫叮咬的过敏反应或自身免疫性反应[3]。近年来有研究发现[4]，细胞免疫失衡与CSU 密切相关，CD4+T 细胞被分为Th1 细胞、Th2 细胞、Th17 细胞以及Treg 细胞4 种亚型。有研究认为Th17 细胞与Treg 细胞的比例失衡是可能导致慢性荨麻疹发病的重要原因[5]。Treg 细胞可以通过合成细胞因子白细胞介素（interleukin，IL）-35 和转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）进行调节免疫耐受，并且在炎症平衡中发挥作用[6]。Th17细胞分泌的IL-17 能够诱导成纤维细胞、上皮细胞分泌IL-6、IL-8 等炎症因子从而抑制炎症反应，形成炎症级联反应[7]。本研究通过检测CSU 患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平，旨在探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2016 年1 月—2019 年1 月重庆市开州区人民医院（以下简称“我院”）收治的CSU 患者350 例为研究对象，将其作为病例组，其男192 例，女158 例；年龄31～61 岁，平均（37.6±8.5）岁。另选取我院健康体检者60 名作为对照组，其中男35 名，女25 名；年龄30～59 岁，平均（36.9±8.6）岁，两组一般资料比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性。

纳入标准：①符合《荨麻疹治疗指南（2014 版）》的诊断标准[8]；②病程＞8 周，每周至少发作2 次。排除标准：①临床资料不全者；②伴有严重感染或合并严重肝脏、肾脏及心脏疾病；③其他类型的荨麻疹；④近期服用免疫抑制剂、抗组胺类以及糖皮质激素等药物。所有研究对象及家属均知情同意，且经我院医学伦理委员会批准。

1.2 CSU 病情严重程度评分

依据荨麻疹活动评分（urticaria activity score，UAS）[9]，每项0～3 分，评分标准：0 分为无风团无瘙痒；1 分为风团数量<20 个，伴轻度瘙痒；2 分为风团数量20～50 个，瘙痒明显但不影响日常活动和睡眠；3 分为风团数量>50 个，瘙痒明显，日常活动和睡眠受到影响。将各项评分相加，依据分数分组，≤2 分为轻度组142 例，3～4 分为中度组124 例，≥5 分为重度组84 例。

1.3 观察指标与检测方法

检测患者及健康体检者血清IL-35、IL-17 和TGFβ1 水平，采集患者清晨空腹静脉血3 mL 于真空采血管中，离心半径10 cm，3000 r/min 离心15 min，收集上清液用于检测。试剂盒均购自美国RAPIDBIO 公司（批号：20151016、20150721、20151204），采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计学软件对所得数据进行分析，计量资料采用均数±标准差（）表示，组间比较采用t 检验，多组比较采用单因素方差分析进行，两两比较采用LSD-t 检验，计数资料采用例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验。运用Pearson 进行相关性分析。以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平比较

病例组血清IL-35 水平显著低于对照组，IL-17、TGF-β1 水平显著高于对照组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。见表1。

表1 两组血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平比较（ng/mL，）

表1 两组血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平比较（ng/mL，）

注：IL：白细胞介素；TGF-β1：转化生长因子β1

2.2 不同病情患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 的比较

重度组血清IL-35 水平低于中度组、轻度组，且中度组低于轻度组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）；重度组血清IL-17、TGF-β1 水平高于中度组和轻度组，且中度组亦高于轻度组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。见表2。

表2 不同病情患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 的比较（ng/mL，）

表2 不同病情患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 的比较（ng/mL，）

注：与轻度组比较，*P ＜0.05；与中度组比较，#P ＜0.05。IL：白细胞介素；TGF-β1：转化生长因子β1

2.3 患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 与病情程度的相关性

Pearson 相关性分析结果显示，CSU 患者血清IL-35水平与UAS 评分呈负相关（r=-0.687，P=0.029），而血清IL-17 与TGF-β1 水平和UAS 评分均呈正相关（r=0.684、0.709，P=0.028、0.022）。

3 讨论

CSU 是一种复杂的变态性皮肤疾病，其特征是由于已知或未知原因造成的反复发痒的风疹和/或血管性水肿，由于反复发作、病情迁延，严重影响患者的生活质量，并给患者家庭带来巨大的经济负担[10-11]。当前临床CSU 发病机制复杂，可能与患者自身免疫能力、自身过敏源等原因有关。既往研究普遍认同免疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）与受体结合激活肥大细胞脱颗粒，使其释放组胺及其他血管活性介质是CSU 发病的直接原因[12-13]。因此通过探究CSU 患者发病机制过程去选择合适的血清标志物以辅助临床评估CSU 病变程度，对诊治及改善预后具有积极意义。

辅助性T 细胞在人体细胞免疫机制调节中具有重要的作用，主要分为Th1、Th2、Th17 和Treg 细胞[14]。有报道称，CSU 患者外周血Th1/Th2 细胞存在比例不均衡的情况，且以Th2 细胞比例升高为主，Th2 细胞主要通过调节B 淋巴细胞的表达参与CSU 发病，并使血清IgE 水平异常升高，加重致敏过程[15]。亦有研究发现，Th17/Treg 细胞及其分泌的细胞因子相互拮抗形成动态平衡状态，Th17/Treg 细胞水平失衡与CSU 患者密切相关，Treg 主要分泌IL-35 和TGF-β，其中IL-35 可调节机体的免疫功能，具有促进Treg 细胞扩增和Th1 细胞分化、抑制Th17 细胞产生的作用，是体内发挥免疫抑制作用的重要因子[16-17]。当细胞Treg 数目减少或功能降低可诱发自身免疫性疾病。TGF-β1 是由浸润细胞、淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞等多种实质细胞产生的一种具有多种生物学功能的细胞因子，可调节细胞的生长、分化和凋亡，亦可调节Th17 细胞或Treg 细胞谱系分化[18]。当TGF-β1 表达降低时Th17 细胞分泌增加，还可以诱导肥大细胞、巨噬细胞等炎症细胞趋化加重炎症反应。当TGF-β1高表达时，可以促进Treg 细胞分化及功能激活，同时抑制炎症细胞增殖，发挥免疫抑制及抗炎作用[19-20]。IL-17 是由Th17 细胞合成并分泌的新型细胞因子，是常见促炎因子、具有较强的生物学功能，介导类风湿关节炎、哮喘等自身免疫疾病的发病[21-22]。

本研究结果显示，CSU 患者血清IL-35 水平显著低于对照组，且重度组血清IL-35 水平低于中度组、轻度组，中度组低于轻度组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）；而IL-17、TGF－β1 水平显著高于对照组，且重度组血清IL-17、TGF-β1 水平高于中度组和轻度组，中度组亦高于轻度组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05），提示血清IL-35、IL-17、TGF-β1 水平可能参与CSU 的发病过程。分析原因，CSU 患者炎症反应严重，机体免疫功能受到严重损伤，Th1 介导的细胞免疫作用减弱，Th2 细胞介导B 淋巴细胞分泌IgE 发挥体液免疫增强，进而变态反应增强加重病情[12,23]。Treg 细胞表达降低导致IL-35 分泌减少，使其抑制致炎T 淋巴细胞活性减弱，Th1、Th17 等致炎T 淋巴细胞活性增强，分泌炎症因子、免疫因子等增多，导致免疫应答及炎症反应增强，患者病情加重，Th17 细胞活性增强，IL-17 分泌增加，IL-17 水平升高，其作为炎症启动因子，可通过诱导其他炎症因子来促进中性粒细胞增殖、迁移，激活炎症级联反应，加重患者病情[24]。除此之外，CSU 患者病变加重，Treg 细胞表达降低，分泌TGFβ1 减少，大量非淋巴细胞分泌TGF-β1 增加，高水平TGF-β1 会抑制Th17 分化促进Treg 细胞的增殖发育来抑制免疫反应，同时还抑制中性粒细胞等炎症细胞增殖及活性来发挥抗炎作用[25-26]。

综上所述，CSU 患者血清IL-35 水平与患者病情严重程度呈负相关，IL-17 与TGF-β1 水平与患者病情程度呈正相关，通过检测患者血清IL-35、IL-17 与TGF-β1 水平可评估CSU 患者病情严重程度，有利于为临床诊治提供帮助。