泊洛沙姆407诱导大鼠器官脂肪变性的相关研究

李晶晶 秧茂盛

（吉首大学 湖南·湘西 416000）

0 导言

“脂肪变性”是一种由多种原因引起的临床病理综合征，其特征是甘油三酯和胆固醇在非脂肪细胞中的积累，是细胞脂肪变性和脂质在富氧器官，如肝脏和肾脏中的积累。肝脏是脂质代谢的重要器官，脂肪肝和高脂血症被认为是代谢综合征的病理表现，因此，脂肪变性及其相关疾病是世界性的公共卫生问题。

泊洛沙姆(poloxamer)是聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯(PEO-PPO-PEO)三嵌段共聚物，其商品名为普朗尼克(Pluronic)，通式为HO(C2H4O)a-(C3H6O)b-(C2H4O)aH，其中聚氧乙烯链具有相对亲水性，聚氧丙烯链具有相对亲油性，化合物分子量以及分子中环氧乙烯或环氧丙烯含量的比例不同,其物理性质也不同，因此是一种非离子型高分子表面活性剂。

P-407是一种三嵌段共聚物，已被用于建立小鼠剂量依赖性高脂血症和动脉粥样硬化模型。脂肪组织变性的动物模型旨在再现器官或组织脂肪变性的临床体征和病理特征。本研究使用泊洛沙姆407(P-407)4个月，建立一种新的脂肪组织/器官变性大鼠模型。

1 材料和方法

（1）动物和处理。动物实验符合《NIH实验动物的护理和使用指南》原则。购买60只2个月大的雄性Sprague-Dawley大鼠及饲料。将大鼠单独安置在温度，湿度和光线受控的房间（分别为22-24°C，50-60%，12/12小时的明暗循环）。适应一周后，将动物随机分配进行治疗（P-407）或对照组（盐水）组（每组6只大鼠）。给大鼠腹膜内注射P-407 1.0 g·kg-1或等量生理盐水(10m L/kg)，每5天测量一次每只大鼠的体重。在实验期间，大鼠可自由饮水和饮食，但在采血之前，大鼠需禁食过夜（≥12小时）。

（2）血脂浓度的测定。治疗0,1,2,3或4个月后，通过腹腔注射3%戊巴比妥钠盐(1mL/kg)对大鼠进行终末麻醉，从心脏采集5至6m L血样，在37°C下孵育60分钟，离心10分钟，收集血清并储存在-80°C冰箱中直到分析。使用日立全自动生化分析仪检测样本指标，按试剂盒说明书进行操作。

（3）统计分析。实验数据都用平均值±标准差（x±SD）进行表示，采用统计分析软件SPSS 16.0进行数据分析处理。组间差异检验采用独立样本t检验分析。组织脂肪变性与血浆致动脉粥样硬化指数（AIP，由Lg（TG/HDL）计算而得）和TC/HDL比值的相关性分析采用Spearman非参数相关性分析。p<0.05时，则认为组间差异具有统计学意义。

2 结果

经P-407处理的大鼠血清脂质浓度明显高于对照组，与先前的报道一致。（见表1）

表1：反复腹腔注射1g/kg泊洛沙姆407(P-407)对雄性大鼠血脂浓度的影响

3 讨论

本实验证实，长期腹腔注射P-407可引起高脂血症。在P-407给药期间，肝脏、脾脏和肾脏的脂肪变性有时间依赖性，这种脂肪变性可能与抑制脂质代谢和脂质在各种组织和器官中的积累有关，相关研究有待深入。已有不少研究指出，动脉粥样硬化性心血管疾病的不良结局与血脂异常有关。本研究结果表明，AIP和TC/HDL比值与脂肪变性呈正相关，此结果可能有助于相关疾病的防治。

泊洛沙姆407由约70%乙烯氧化物和30%丙烯氧化物组成，平均分子量11500，熔点56℃，无臭、无味，易溶于水、酸、碱，对金属离子稳定。它具有特殊的反向热胶凝作用，即低温时为液体，体温下成为凝胶，其毒性低，刺激性小，生物相容性好，是一种理想的药物控释材料，被广泛应用于医学、药学等多个领域。例如在眼用制剂中的应用，张建强等以泊洛沙姆为温敏型材料制备乳酸环丙沙星眼用即型凝胶，并对该制剂的眼刺激性进行了评价，确定了18%的泊洛沙姆407作为该眼用凝胶的基质，且对兔眼无刺激。表明该制剂制备方法简单、剂量易于控制，展现出良好的眼部应用前景。高斐等通过研究以泊洛沙姆407为温敏材料，制成的左氧氟沙星眼用凝胶的体外释放试验，发现该制剂制备方法简单，用药剂量易于控制，表明泊洛沙姆可用眼用制剂中。包晗等以泊洛沙姆407为基质制备成双氯芬酸钠眼用在体凝胶，并对其质量进行了初步评价，结果显示该眼用在体凝胶制剂制备工艺简单、稳定可靠、质量可控。泊洛沙姆407对人体无毒，已被批准用作一些药品和个人护理产品的辅料。它有一种独特性质，在低温下是液体，受热后变成固体，过程是可逆的。新方法正是利用了这一特性。研究人员将该物质加热到高于体温，使它变成固体，用于撑开血管。温度下降后它变成液体，不会阻塞血管。

P-407诱导的大鼠脂肪变性模型优势：（1）方便且廉价；（2）P-407剂量可以精确控制；（3）P-407给药停止时，器官的血脂浓度和脂肪变性可恢复到基础水平，这对研究高脂血症所致损伤的时间依赖性和可逆性具有重要意义；（4）实验大鼠的肝脏、脾脏和肾脏均发生脂肪变性，这可能是研究多器官脂肪变性的有用实验工具。