穿心莲内酯抗心律失常作用及机制研究

曾雪亮　李蓓　曾韬慧　钟文敏

【摘要】 目的：研究穿心蓮内酯对大鼠心律失常的作用机制。方法：将2019年10月-2020年10月从江西省实验动物中心购买的90只清洁级雄性大鼠，随机分为氯仿诱发心律失常组（A组，n=10）和氯仿诱发心律失常并穿心莲内酯组（B组，n=10）;肾上腺素诱发心律失常组（C组，n=10）和肾上腺素诱发心律失常并穿心莲内酯组（D组，n=10）;氯化钙诱发心律失常组（E组，n=10）和氯化钙诱发心律失常并穿心莲内酯组（F组，n=10）;乌头碱诱发心律失常组（G组，n=10）和乌头碱诱发心律失常并穿心莲内酯组（H组，n=10）;正常对照组（I组，n=10）。观察A～F组心律失常出现时间和心律失常持续时间，比较G、H组室性早搏（VP）、室性心动过速（VT）和室颤（VF）的持续时间，比较A～I组大鼠血清Ca²⁺、LDH水平。结果：B组与A组、D组与C组、F组与E组比较，心律失常出现时间均显著推迟，心律失常持续时间均显著缩短，差异均有统计学意义（P<0.05）。H组VP、VT、VF均显著短于G组，差异均有统计学意义（P<0.05）。与I组比较，A、C、E、G组大鼠Ca²⁺、LDH水平均显著升高（P<0.05）;B组与A组、D组与C组、F组与E组、H组与G组比较，血清中Ca²⁺、LDH水平均显著降低（P<0.05）。结论：穿心莲内酯对氯仿、肾上腺素、氯化钙、乌头碱引起心律失常具有对抗作用，能够降低血清LDH与Ca²⁺水平，是抗心律失常的有效药物。

【关键词】 穿心莲内酯 心律失常 心律失常出现时间 心律失常持续时间

Anti-arrhythmic Effects and Mechanism of Andrographolide/ZENG Xueliang， LI Bei， ZENG Taohui， ZHONG Wenmin. //Medical Innovation of China， 2021， 18（15）： 00-010

[Abstract] Objective： To study the mechanism of Andrographolide on arrhythmia in rats. Method： A total of 90 clean male rats who purchased from Jiangxi Provincial Laboratory Animal Center from October 2019 to October 2020 were randomly divided into Chloroform-induced arrhythmia group （group A， n=10） and Chloroform-induced arrhythmia combined with Andrographolide group （group B， n=10）， Adrenerinol-induced arrhythmias （group C， n=10） and Adrenerinol-induced arrhythmias combined with Andrographolide group （group D， n=10）， CaCl2-induced arrhythmia group （group E， n=10） and CaCl2-induced arrhythmia combined with Andrographolide group （F group， n=10）， Aconitonine-induced arrhythmia group （group G， n=10） and Aconitine-induced arrhythmia combined with Andrographolide group （group H， n=10）， normal control group （group I， n=10）. The occurrence time and duration of arrhythmia in group A to F were observed. The duration of ventricular premature beats （VP）， ventricular tachycardia （VT） and ventricular fibrillation （VF） in group G and group H were compared. The levels of serum Ca²⁺and LDH in group A to I were compared. Result： Compared with group A， group B， group D and group C， and group F and group E， the occurrence time of arrhythmia were significantly delayed and the duration of arrhythmia were significantly shortened， the differences were statistically significant （P<0.05）. VP， VT and VF in group H were significantly shorter than those in group G， the differences were statistically significant （P<0.05）. Compared with group I， the Ca²⁺and LDH levels in group A， group C， group E and group G were significantly increased （P<0.05）. Compared with group A， group D， group C， group F and group E， and group H and group G， serum Ca²⁺and LDH levels were significantly decreased （P<0.05）. Conclusion： Andrographolide can antagonize arrhythmia induced by chloroform， Adrenerinol， calcium chloride and aconitine， reduce serum LDH and Ca²⁺levels， and is an effective drug against arrhythmia.

[Key words] Andrographolide Arrhythmia Occurrence time of arrhythmia Duration of arrhythmia

First-authors address： The First Affiliated Hospital of Gannan Medical College， Ganzhou 341000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.15.002

心律失常為内科易发症状，表现为心脏搏动异常，引起胸闷、低血压、心悸等症状[1-2]。可单独发病或与心血管病并发，导致心脏衰竭或猝死[3-4]。中医对于心律失常的治疗手段通过中药配方实现心肌微循环，扩张血管改善心律失常，治疗效果显著[5-6]。穿心莲内酯作为中药提取物，具有多靶点的特点，在多种疾病中发挥作用[7-8]。临床对于中成药缓解心律失常研究的选药范围小，本次研究首次以穿心莲内酯作为实验药剂，通过建立多种模型，探讨穿心莲内酯对不同原因导致心律不齐的作用机制，为心律失常药物治疗提供数据支持。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 2019年10月-2020年10月从江西省实验动物中心购买清洁级雄性大鼠90只（体质量230～250 g），随机分为9组，氯仿诱发心律失常组（A组，n=10）和氯仿诱发心律失常并穿心莲内酯组（B组，n=10）;肾上腺素诱发心律失常组（C组，n=10）和肾上腺素诱发心律失常并穿心莲内酯组（D组，n=10）;氯化钙诱发心律失常组（E组，n=10）和氯化钙诱发心律失常并穿心莲内酯组（F组，n=10）;乌头碱诱发心律失常组（G组，n=10）和乌头碱诱发心律失常并穿心莲内酯组（H组，n=10）;正常对照组（I组，n=10）。各组适应喂养一个月后建立模型。麻醉实验符合一般动物实验伦理学原则。

1.2 实验仪器 生物机能实验处理系统（正华生物仪器设备有限公司），恒速泵（益邦生物医疗公司），低速自动平衡离心机（麦科仪科技有限公司），可见分光光度计（菲勒仪器有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 氯仿诱发心律失常模型 B组大鼠尾部静脉匀速注射穿心莲内酯，将4 mL氯仿棉球放在倒置的600 mL烧杯内，依次放入A、B组大鼠于该烧杯内，每换1次大鼠加1 mL氯仿，大鼠吸入氯仿至呼吸停止即刻转移至操作台，打开大鼠胸腔，查看大鼠心室状况，计算心律失常出现时间及持续时间。

1.3.2 肾上腺素诱发心律失常模型 C、D组大鼠禁食12 h，麻醉并固定大鼠，针状电极刺进四肢和胸腔皮下，建模后采用生物机能实验系统查看并记录大鼠心电图。0.5 h后舌下静脉注入肾上腺素（生产厂家：上海禾丰制药有限公司，批准文号：国药准字H31021062，规格：1 mL︰1 mg）40 μg/kg，

D组10 s内快速静脉注射穿心莲内酯（生产厂家：重庆汉华制药有限公司，批准文号：国药准字Z50020470，规格：50 mg/片），药片在研钵中研碎，缓慢加入纯化水，边加边研磨（药片及纯化水比例1︰1.5），加入0.05%维生素E抗氧，观察记录由肾上腺素引起的心律失常出现时间及持续时间。

1.3.3 氯化钙诱发心律失常 E、F组大鼠禁食12 h，麻醉并固定大鼠，针状电极刺进四肢和胸腔皮下，建模后采用生物机能实验系统查看并记录大鼠心电图。0.5 h后颈外静脉注射3.5%氯化钙注射液（生产厂家：国药集团容生制药有限公司，批准文号：国药准字H20065400，规格：10 mL︰0.3 g）120 mg/kg，F组10 s内快速静脉注射穿心莲内酯，查看大鼠心室状况，计算心律失常出现时间及持续时间。

1.3.4 乌头碱诱发心律失常模型 G、H组大鼠禁食12 h，麻醉并固定大鼠，针状电极刺进四肢和胸腔皮下，建模后采用生物机能实验系统查看并记录大鼠心电图。0.5 h后舌下静脉注射乌头碱溶液（生产厂家：甘肃兰药药业有限公司，批准文号：国药准字H62021137）2 μg/min，H组10 s内快速静脉注射穿心莲内酯，监测心电图变化，观察记录由乌头碱引起的室性早搏（ventricularprematurebeat， VP）、室性心动过速（ventriculartachycardia， VT）和室颤（ventricularfibrillation， VF）持续时间。

1.3.5 各组大鼠LDH、Ca²⁺水平 采集各组大鼠眼眶血液离心得到上清液，使用Ca²⁺测定试剂盒、LDH测定试剂盒测定各组大鼠血清中Ca²⁺、LDH水平，操作按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计学处理 采用SPSS 21.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，组间比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用χ²检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 穿心莲内酯对氯仿所致大鼠心律失常的影响 与A组比较，B组大鼠心律失常出现时间延后，心律失常持续时间缩短，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 穿心莲内酯对肾上腺素所致大鼠心律失常的影响 与C组比较，D组大鼠心律失常出现时间显著推迟，心律失常持续时间明显缩短，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 穿心莲内酯对氯化钙所致大鼠心律失常的影响 与E组比较，F组大鼠心律失常出现时间显著推迟，心律失常持续时间也显著缩短，差异均有统计学意义（P<0.05），见表3。

2.4 穿心莲内酯对乌头碱所致大鼠心律失常的影响 G、H组注入乌头碱即刻发生心律失常。与G组比较，H组VP、VT、VF均缩短，差异均有统计学意义（P<0.05），见表4。

2.5 各组大鼠LDH、Ca²⁺水平比较 与I组比较，A、C、E、G组大鼠Ca²⁺、LDH水平均显著升高（P<0.05）;B组与A组、D组与C组、F组与E组、H组与G组比较，血清中Ca²⁺、LDH水平均显著降低（P<0.05）。见表6。

3 讨论

心律失常包括室性早搏、室性心动过速和心室颤动。室性早搏是心脏兴奋性过高，导致心室冲动过早的室性收缩[9]。心律失常发展具有持续性，从心悸、早搏逐渐可发展为恶性心律失常，最终引起眩晕，且不同阶段症状预后差异不大，并无直接的相关性[10]。室性心动过速是心肌传导纤维、心室肌等部位的快速性心律失常，频率高于100次/min，有单形和多形室性心动过速，单行室性心动过速包括非持续性和持续性室性心动过速[11-12]。室性心动最终演变为室颤，引起患者急性猝死[13]。心室颤动表现为心室肌高频率收缩致心脏暂停排血，大面积局部组织缺血[14]。研究证明，离子通道受阻与心律失常密切相关，建立动物模型用于研究中药抗心律失常具有特异性。氯仿进入机体引起神经麻痹，进而影响离子通路[15]。肾上腺素促进交感神经冲动，Ca²⁺离子通道开放，膜外离子内流，心肌自律性提高，出现心律失常[16]。氯化钙改变多种离子流向，Na⁺离子内流改变去极化速率，引起Ca²⁺离子内流，进而促使心肌细胞钾离子电导异常出现振荡电位，最终导致心律失常[17]。乌头碱促使细胞Na⁺离子通道打开，加速Na⁺离子内流，加强心房传导组织自律性，引起室性、室上性异位节律，等多种心律失常[18]。穿心莲内酯具有抗炎、抗菌效果，在心血管疾病治疗中也具有使用价值[19]。

本实验首次以穿心莲内酯研究心律失常，在建立心律失常模型后，注射穿心莲内酯后大鼠心律失常发生时间推迟，持续时间减少，结果与李亚萍等[20]研究结果类似，表明穿心莲内酯与安神定志汤对氯仿、氯化钙、肾上腺素和乌头碱引起的心律失常具有对抗作用。有研究表明甘松提取物具有膜的稳定作用，阻滞心肌钙离子通道开放[21]，根据本实验对大鼠血清检测结果，注射穿心莲内酯大鼠血清Ca²⁺离子水平和LDH明显改善，可能与穿心莲内酯促进离子通道开放有关，进而促进机体物质代谢。引起心律失常的原因众多，本实验首次选用穿心莲内酯对建模大鼠心律失常的影响，但并未建立较为新颖的心律失常模型，可根据心律失常致病原因做进一步研究。

综上所述，穿心莲内酯对心律失常具有拮抗作用，可以用于心律失常的治疗，具有研究意义和治疗价值。

参考文献

[1]刘春钢.胺碘酮对急诊快速型心律失常患者的疗效及其对稳定血压的影响[J].抗感染药学，2018，15（8）：1425-1427.

[2]陈肖艺，王翩翩，陈冰.散点图与24 h动态心电图诊断心律失常准确率对比分析[J/OL].心电图杂志（电子版），2018，7（4）：12-13.

[3]陈司坤，解梦莉，韩毅，等.非肽类孤啡肽受体拮抗剂C-24对大鼠急性心肌缺血后心律失常的影响[J].天津医药，2021，49（1）：11-15.

[4]吕佳誉，崔向宁，苏文革.基于网络药理学探讨生脉散治疗心律失常作用机制[J].中医学报，2021，36（1）：153-159.

[5]李赛赛，李平，康楠，等.PI3K/Akt信号通路与心血管疾病关系的研究进展[J].北京医学，2021，43（1）：66-69，72.

[6]魏言昭，李威，杨双，等.C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9对大鼠心肌梗死后室性心律失常的影响[J].中国心脏起搏与心电生理杂志，2020，34（6）：583-588.

[7]母育成，邢相宜，晏子俊，等.穿心莲内酯的抗菌作用研究进展[J].贵州中医药大学学报，2021，43（1）：85-89.

[8]张刘红，王长虹.穿心莲内酯理化性质及其制剂研究进展[J].上海医药，2021，42（1）：19-31.

[9]杨光辉.双腔心脏起搏器和单腔心脏起搏器治疗老年缓慢性心律失常的效果对比[J].中国医学创新，2019，16（1）：23-26.

[10]齐欣，郭书文，黄琨，等.早搏性心律失常的多重危险因素及病理特征临床研究[J].中华中医药学刊，2017，35（1）：81-84.

[11]邵芳芳，郭润民，梁伟钧.糖尿病伴发心律失常机制的研究进展[J].中国医学创新，2017，14（28）：142-145.

[12]华琴.动态心电图对冠状动脉粥样硬化性心律失常的诊断价值探讨[J].江西医药，2020，55（6）：772-773.

[13]黄琳.参松养心胶囊对心房颤动射频消融术后心律失常的疗效观察[J].江西医药，2017，52（11）：1156-1158.

[14]刘世林.稳心颗粒与卡托普利联合治疗肺心病合并心律失常的可行性研究[J].江西医药，2017，52（10）：1019-1021.

[15]杨峰.CircITGA7对缺血性心律失常大鼠心肌细胞凋亡的影响[J].基因组学与应用生物学，2020，39（2）：769-774.

[16]吴凤珠，俞瑞群，张家美.针刺内关穴调节心率机制的研究概况[J].中西医结合心脑血管病杂志，2019，17（7）：1026-1029.

[17]韓垚，秦田雨，刘红旭，等.调脉饮及其拆方对快速心律失常大鼠心肌L型钙通道mRNA表达的影响[J].中国实验方剂学杂志，2018，24（20）：123-128.

[18]翟旭峰，王瑾，郑爽，等.铁皮石斛对缺血再灌注诱导的心律失常的保护作用[J].现代食品科技，2017，33（7）：1-8.

[19]谢璇，任莹璐，张惠敏，等.穿心莲内酯的药理作用和应用研究进展[J].中西医结合心脑血管病杂志，2018，16（19）：2809-2812.

[20]李亚萍，张明昊，章金涛.安神定志汤对实验性大鼠心律失常的作用[J].中医学报，2019，34（5）：967-971.

[21]曾梦柳.穿心莲内酯通过抑制Na⁺和Ca²⁺电流发挥抗心律失常作用[D].武汉：武汉科技大学，2017.

（收稿日期：2021-03-17） （本文编辑：姬思雨）