子痫前期孕妇孕中期GPⅡb/Ⅲa受体的表达及其对母婴结局的影响

刘喜娟 陈安儿 程淑清

[摘要] 目的 探讨子痫前期（PE）孕中期孕妇血清GPⅡb/Ⅲa受体的表达水平变化及对母婴预后的影响。 方法 选取2016年9月至2018年9月于本院住院分娩的PE患者70例为PE组，对照组为50例正常妊娠妇女。PE组以GPⅡb/Ⅲa受体表达水平中位数为界，分为高GPⅡb/Ⅲa组和低GPⅡb/Ⅲa组各35例。采用流式细胞仪检测血清GPⅡb/Ⅲa受体表达水平。记录和比较各组孕妇的分娩方式、母婴结局。 结果 PE组GPⅡb/Ⅲa表达显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;与低 GPⅡb/Ⅲa组、高 GPⅡb/Ⅲa组相比，对照组自然分娩率高，剖宫产率低，差异均有统计学意义（P<0.05）;与低GPⅡb/Ⅲa 组、高 GPⅡb/Ⅲa 组相比，对照组子痫、凝血异常、心功能不全、肾功能损害等不良妊娠发生率均较低，差异均有统计学意义（P<0.05）;低 GPⅡb/Ⅲa 组、高GPⅡb/Ⅲa 组的小早产儿（<34周）、小于胎龄儿发生率高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 GPⅡb/Ⅲa受体表达水平与母婴不良结局发生率间有关，对PE患者母婴结局的预测具有重要参考价值。

[关键词] 子痫前期;血小板膜糖蛋白;GPⅡb/Ⅲa;新生儿

[Abstract] Objective To investigate the changes of expression level of serum GPⅡb/Ⅲa receptor in the second trimester of pre-eclampsia（PE） and its impacts on maternal and infant outcomes. Methods PE patients who were delivered and admitted to our hospital from September 2016 to September 2018 were selected as the PE group（n=70）， and normal pregnant women were selected as the control group（n=50）. Meanwhile， the PE group was divided into the high GPⅡb/Ⅲa group（n=35） and the low GPⅡb/Ⅲa group （n=35）. The expression level of serum GPⅡb/Ⅲa receptor was detected by flow cytometry. The delivery mode and maternal and infant outcomes of pregnant women in each group were recorded and compared. Results The expression of GPⅡb/Ⅲa in the PE group was significantly higher than that in the control group （P<0.05）. Compared with the low GPⅡb/Ⅲa group and the high GPⅡb/Ⅲa group， the natural delivery rate of the control group was high，the forceps assisted delivery and cesarean section rate were low，and the differences were statistically significant（P<0.05）. Compared with the low GPⅡb/Ⅲa group and the high GPⅡb/Ⅲa group， the incidences of adverse pregnancy events such as eclampsia，abnormal coagulation， cardiac insufficiency and renal function damage in the control group were lower， and the differences were statistically significant（P<0.05）. The incidences of premature infants（< 34 weeks） and infants younger than gestational age in the low GPⅡb/Ⅲa group and the high GPⅡb/Ⅲa group were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion The expression level of GPⅡb/Ⅲa receptor is positively correlated with the impacts of maternal and infant adverse outcomes，which is of important reference value for predicting maternal and infant outcomes for PE patients.

[Key words] Pre-eclampsia; Platelet membrane glycoprotein; GPⅡb/Ⅲa; Newborn

子癇前期（Preeclampsia，PE）是一种由遗传因素、后天因素和环境因素共同作用导致机体多系统功能障碍的妊娠期特有疾病，表现为高血压、蛋白尿、高凝血、高纤溶倾向[1]，其在所有妊娠中发生率为3%～7%[2]。免疫不良、胎盘发育不足、滋养细胞浸润、胎盘缺血、氧化应激和血栓形成是PE发展的关键因素[3]，病情严重者会发生昏迷、抽搐，甚导致母婴死亡[4-6]。至今仍无法用一种理论来解释该病的所有实验室改变和临床表现[7]，故寻找简单、有效的预测不良妊娠结局的临床和实验室指标，建立相关的预测模型，也是国内外一直以来研究的难点、重点和热点[8-10]。本研究旨在通过研究孕妇孕中期GPⅡb/Ⅲa受体的表达及其对母婴结局的影响，探讨GPⅡb/Ⅲa受体与子痫前期的相关性，期望在子痫前期早期预防、临床治疗方面提供一定的指导意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年9月至2018年9月于本院住院分娩的PE患者70例为PE组，PE组以GPⅡb/Ⅲa受体表达水平中位数为界，分为高GPⅡb/Ⅲa组和低GPⅡb/Ⅲa组，每组各35例。对照组为50例正常妊娠妇女。PE组孕妇年龄25～34岁，平均（28.99±5.02）岁，孕次1次，产次1次，入院时孕龄20～28周，平均（25.93±2.09）周;对照组孕妇年龄25～34岁，平均（27.21±5.32）岁，孕次1次，产次1次，入院时孕龄20～28周，平均（28.56±2.27）周。两组孕妇的BMI均<28 kg/m2，两组一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经本院临床医学伦理委员会审核批准，且所有入选对象均签署知情同意书。纳入标准：①妊娠20周后出现高血压（收缩压≥140 mmHg或舒张压≥90 mmHg）并伴有蛋白尿≥300 mg/24 h或随机尿蛋白定性≥（+）者;②孕前血压及肾功能正常者;③全程无中断参与者。排除标准：既往有子痫前期病史者;有不良嗜好者;妊娠合并其他疾病者;染色体疾病、生殖道感染性疾病、代谢内分泌疾病及免疫系统性疾病等其他内外科合并症者。

1.2 方法

1.2.1 血清GPⅡb/Ⅲa受体表达  入院后各组研究对象均抽取静脉血2 mL（加肝素抗凝剂），具体方法：①取2 mL血标本，送流式细胞仪检测各组血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa的水平。试剂包括异硫氰酸标记的抗血小板活化GPⅡb/Ⅲa的单克隆抗体PAC-1-FITC、藻红蛋白标记的抗GPⅡb的单克隆抗体CD41-PE及IgM同型对照抗体。取流式管3根，分别为对照管和测定管1和测定管2。对照管各加入10 μL的IgM同型对照抗体和CD41-PE作为血小板射门对照检测，测定管1加入10 μL的CD62p-PerCP和CD41-PE，测定管2加入10 μL的PAC-1-FITC和CD41-PE。各管加PBS磷酸盐缓冲液400 μL，抗凝全血5 μL，加入4℃预冷的1%多聚甲醛1 mL，4℃冰箱保存，固定15 min后上机检测。具体实验步骤按相关实验操作标准及相关仪器说明书严格执行，并记录血小板GPⅡb/Ⅲa表达阳性率（%）。

1.2.2追踪临床资料  记录各研究对象的分娩方式（自然分娩、产钳助娩、剖宫产）。分娩前后产妇及围产儿不良结局包括母亲（子痫、凝血异常、心功能不全、肾功能损害）;围产儿[Apgar评分<7分、新生儿呼吸窘迫、小早产儿（<34周）、小于胎龄儿]。

1.3统计学分析

采用SPSS 11.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用独立样本t检验;计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清GPⅡb/Ⅲa受体表达水平

对照组孕中期孕妇血清GPⅡb/Ⅲa受体表达水平为（0.43±0.11）%，PE组孕妇血清GPⅡb/Ⅲa受体表达水平为（2.55±0.63）%，对照组孕中期血清GPⅡb/Ⅲa受体表达水平显著低于PE组，差异有统计学意义（P<0.001）。GPⅡb/Ⅲa受体表达水平与母婴结局相关性明显，故以PE组孕中期GPⅡb/Ⅲa受体表达水平中位数（1.98±0.13）%为界，将该组孕妇进一步分为高GPⅡb/Ⅲa组和低GPⅡb/Ⅲa组，每组各35例。

2.2各组分娩方式比较

各组间自然分娩及剖宫产率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。低GPⅡb/Ⅲa组、高GPⅡb/Ⅲa组的自然分娩率低于对照组，剖宫产率高于对照组，差异均有统计学意义（χ2：高GPⅡb/Ⅲa组vs.对照组=29.580、7.066;χ2：低GPⅡb/Ⅲa组vs.对照组=11.053、7.017，P<0.05）;低GPⅡb/Ⅲa组自然分娩率高于高GPⅡb/Ⅲa组，剖宫产率低于高GPⅡb/Ⅲa组，差异均有统计学意义（χ2：低GPⅡb/Ⅲa组vs.高GPⅡb/Ⅲa组=5.714、4.058，P<0.05），各组间产钳助产率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2.3 各组母体不良结局比较

各组间孕妇母体不良结局比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。与低GPⅡb/Ⅲa组、高GPⅡb/Ⅲa组相比，对照组的母体不良结局中子痫、凝血异常、心功能不全、肾功能损害等发生率均较低，差异均有统计学意义（P<0.05）;高GPⅡb/Ⅲa组的子痫、凝血异常、肾功能损害发生率高于低GPⅡb/Ⅲa组，差异有统计学意义（χ2=4.158、4.480、4.503，P<0.05）。高GPⅡb/Ⅲa组与低GPⅡb/Ⅲa组心功能不全发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

2.4各组围生儿不良结局比较

各组围生儿不良结局发生率比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。高GPⅡb/Ⅲa组Apgar评分<7分、新生儿呼吸窘迫、小早产儿（<34周）、小于胎龄儿等发生率高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;高GPⅡb/Ⅲa组小早产儿（<34周）、小于胎龄儿发生率高于低GPⅡb/Ⅲa组，差异均有统计学意义（P<0.05）。低GPⅡb/Ⅲa组小早产儿（<34周）、小于胎龄儿发生率高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3 讨论

妊娠子痫前期是一种具有家族倾向的且与人种、种族和环境因素相关的多系统复杂疾病，目前该疾病的发病机制尚未明确，因此探寻其具体发病机制，以制订有效的临床防治新方案，已成为当前产科领域急需解决的难题之一。妊娠子痫前期是一种严重的妊娠并发症，孕妇多脏器功能受到损伤。若得不到及时诊断和预测妊高征患者的高风险，母婴随时可能发生严重的并發症。因此，研究妊娠高血压综合征的病理过程，分析判断可能出现的严重并发症，是于恰当时机终止妊娠及减轻围生儿并发症的重要条件[11-12]。已有研究发现，血小板聚集形成血栓，在子痫前期及子痫的发生、发展及预后过程中具有重要调节功能。当各种因素使血小板激活后，最终的共同通路都是通过GPⅡb/Ⅲa受体与纤维蛋白原“桥联”黏聚成团，促使血小板聚集，最后导致血栓形成。GPⅡb/Ⅲa受体是血小板膜上含量最丰富的糖蛋白，只存在于血小板及其前体巨核细胞中。国内外多项研究表明[13-15]，GPⅡb/Ⅲa蛋白介导的血小板聚集、血栓形成在子痫前期的发生、发展及预后方面起到关键性调节作用[16]。但在健康孕妇中的表达是否影响母婴结局的研究较少，还缺少大样本数据。本研究结果显示，PE患者自然分娩率大幅降低，剖宫产率显著上升，这与临床现状吻合;与高GPⅡb/Ⅲa组比较，低GPⅡb/Ⅲa组自然分娩率升高，剖宫产率降低但较对照组仍偏高，提示剖宫产率上升与GPⅡb/Ⅲa受体表达水平升高有关。PE病情持续进展时全身小动脉收缩、血压上升，加上妊娠期循环容量增加、心脏负荷加剧，机体无法代偿时，将发生心功能不全甚至心衰[17]。部分患者随着PE进展可出现血小板及凝血因子水平降低，触发DIC发生，甚至子痫发作[18]。

本研究结果显示，与对照组相比，PE组患者子痫、凝血异常、心功能不全、肾功能损害等不良结局发生率较高，与既往文献报道结果一致;提示PE患者中GPⅡb/Ⅲa受体表达可预示母体不良结局发生。母体不良妊娠直接影响围生儿结局。对照组、低GPⅡb/Ⅲa组、高GPⅡb/Ⅲa组三组相比，随着GPⅡb/Ⅲa受体表达升高，如Apgar评分<7分、新生儿呼吸窘迫、小早产儿（<34周）、小于胎龄儿等围生儿不良结局发生率较高，提示高GPⅡb/Ⅲa受体表达是围生儿不良结局发生的高危因素，可能与PE患者母体小动脉收缩有关，小动脉收缩导致胎盘供给胎儿的营养和氧气不足，最后对围生儿产前、产时、产后生长发育产生不利影响[19-22]。故通过对高GPⅡb/Ⅲa受体表达患者进行针对性的干预可以优化围生儿结局。

综上所述，GPⅡb/Ⅲa受体表达水平与母婴不良结局发生率间有关，所以在关注PE患者的血压及尿蛋白变化的同时，应及时关注血清GPⅡb/Ⅲa受体表达水平是辅助诊断PE的可靠指标，对指导、监测应用抗凝治疗具有重要意义。

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（收稿日期：2020-06-02）