哮喘小儿血清Eotaxin、IL-17及RDW的变化与病情的关系

高伟霞，秦小菀，张靖，朱永杰

（1.南阳市中心医院急诊儿科，河南 南阳473009；2.郑州儿童医院急诊科，河南 郑州450053）

流行病学研究表明,小儿哮喘的发病率可超过869/1万人左右[1]，在合并有基础性高危合并症的群体中，小儿哮喘的发病率可进一步的上升[2,3]。对于小儿哮喘的病情评估具有重要的意义,其能够在指导小儿哮喘的临床诊疗及临床预后随访方面发挥作用。细胞因子或者炎症性相关指标的研究，可以为临床上小儿哮喘的诊疗发挥一定的参考。嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）的表达上升，能够通过募集嗜酸性粒细胞,进而诱导过敏反应的激活,促进呼吸道平滑肌细胞的痉挛，进而促进肺部小气道的阻塞[4]；白细胞介素-17（IL-17）是炎症性相关指标,其能够通过提高下游中性粒细胞或者巨噬细胞的激活程度,进而加剧哮喘的病情进展[5]；红细胞分布宽度（RDW）是反应贫血病情变化的指标,在炎症或者自身免疫性疾病中，RDW同样存在明显的波动[6]。为了揭示Eotaxin、IL-17及RDW的表达与小儿哮喘的病情关系,从而为临床上小儿哮喘的病情评估提供参考,本次研究选取我院确诊的支气管哮喘患儿110例,探讨了Eotaxin、IL-17及RDW的表达变化，报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我院确诊的支气管哮喘患儿110例（哮喘组）,2015年3月至2018年3月,选取60例健康小儿作为对照组。

哮喘组，年龄5～13岁，平均8.2±1.8岁，男60例、女50例，依据中华医学会制定的病情严重程度分级标准[7]：轻度33例、中度50例、重度27例。对照组，年龄5～13岁，平均8.1±2.0岁，男30例、女30例。两组患儿的年龄、性别差异无统计学意义（P＞0.05）。

纳入标准：⑴支气管哮喘患儿的诊断及病情分组标准参考中华医学会儿科学分会制定的标准[7]；⑵患儿年龄5～13岁；⑶患儿处于急性发作期；⑷对照组为健康体检小儿；⑸本研究获得医学伦理委员会的批准。

排除标准：⑴免疫系统相关疾病；⑵恶性肿瘤患者；⑶先心病；⑷支气管异物吸入、支气管畸形；⑸肝肾功能疾病；⑹合并其他系统性疾病的患儿；⑺近2周内使用糖皮质激素、免疫制剂治疗的患儿。

1.2 指标检测方法 采用一次性静脉血采集器进行肘部静脉血采集，采集5ml静脉血后自然放置，采用南京碧云天公司生产sysmex/XN1000血液系统分析仪器进行红细胞分布宽度（RDW）的检测。

采用ELISA法进行Eotaxin、IL-17的检测，采用十字交叉的方法进行抗原浓度的测定,采用碳酸盐缓冲液进行抗原稀释,加入96孔的酶标板中，盖好酶标板盖后置于4℃冰箱过夜,蒸馏水冲洗3次，每次5min，轻轻叩击酶标板甩干。每孔中加入5%的脱脂牛奶200l，置于4℃冰箱过夜，蒸馏水冲洗3次，每次5min，加入稀释好的抗体（购自abcum公司 批号：20083845浓度1：800），蒸馏水冲洗3次，每次5min，每孔中加入100l的底物，显色后在酶标仪上进行吸光度的检测。

1.3 统计学方法 采用统计软件包SPSS21.0对本研究的数据进行统计学处理，采用±s表示符合正态分布的计量资料,应用t检验分析两组间差异、方差分析检测三组间差异；应用χ2检验分析计数资料的组间差异；相关性分析采用Pearson简单线性相关分析法；P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 哮喘组和对照组的血清Eotaxin、IL-17、RDW水平比较 哮喘组的血清Eotaxin、IL-17、RDW水平高于对照组（P＜0.05）；见表1。

表1 哮喘组和对照组的血清Eotaxin、IL-17、RDW水平比较(±s)

表1 哮喘组和对照组的血清Eotaxin、IL-17、RDW水平比较(±s)

组别 n哮喘组对照组t值P值110 60 Eotaxin（ng/L）IL-17（pg/ml）44.91±18.63 4.80±1.55 16.623 0.000 44.81±11.75 33.69±8.20 6.512 0.000 RDW（%）14.6±1.1 12.5±0.9 12.652 0.000

2.2 不同病情的哮喘组血清Eotaxin、IL-17、RDW水平比较 重度哮喘组的血清Eotaxin、IL-17、RDW水平高于中度组和轻度组（P＜0.05），中度哮喘组的血清Eotaxin、IL-17、RDW水平高于轻度组（P＜0.05）；见表2。

表2 不同病情的哮喘组血清Eotaxin、IL-17、RDW水平比较(±s)

表2 不同病情的哮喘组血清Eotaxin、IL-17、RDW水平比较(±s)

组别 n轻度组中度组重度组F值P值33 50 27 Eotaxin（ng/L）IL-17（pg/ml）31.03±15.20 46.04±17.71 53.38±13.94 26.683 0.000 38.00±9.26 45.14±10.38 50.77±8.93 21.110 0.000 RDW（%）13.2±0.7 14.7±1.0 15.8±0.9 14.485 0.000

2.3 哮喘组和对照组的肺功能指标比较 哮喘组的FEV1、PEF、FEV1/FVC测定值均低于对照组（P＜0.05）；见表3。

表3 哮喘组和对照组的肺功能指标比较（±s）

表3 哮喘组和对照组的肺功能指标比较（±s）

组别 n哮喘组对照组t值P值110 60 FEV1（L/min） PEF（%）1.36±0.40 1.88±0.48-7.539 0.000 68.21±9.64 98.57±11.43-18.359 0.000 FEV1/FVC（%）71.33±8.20 85.09±7.33-10.845 0.000

2.4 哮喘组患儿血清Eotaxin、IL-17、RDW与肺功能指标的相关性 哮喘组的血清Eotaxin、IL-17与FEV1、PEF测定值均呈显著的负相关关系(P＜0.05),哮喘组患儿RDW与FEV1、PEF测定值无明显的相关关系（P＞0.05）；见表4。

表4 哮喘组患儿血清Eotaxin、IL-17、RDW与肺功能指标的相关性（±s）

表4 哮喘组患儿血清Eotaxin、IL-17、RDW与肺功能指标的相关性（±s）

肺功能 相关性FEV1 PEF r值P值r值P值Eotaxin IL-17-0.633 0.000-0.594 0.000-0.528 0.000-0.541 0.000 RDW-0.183 0.117-0.216 0.078

3 讨论

自身免疫性损伤或者过度的炎症反应体系的激活,均能够促进小儿哮喘的发生[8]。临床上小儿哮喘的发生，能够导致哮喘患儿肺功能恶化的发生，增加了患儿的致残率和病死风险[9]。而通过对于相关评估性指标的分析,能够在临床上早期干预或者出院后患者的随访方面发挥作用。虽然一氧化氮等指标能够在小儿哮喘的病情评估过程中发挥作用，但部分单中心的分析研究发现，采用一氧化氮评估小儿哮喘病情的灵敏度不足45%,其评估的一致性率和吻合程度均不佳[10]。本次研究通过对于小儿哮喘患者血清中Eotaxin、IL-17、RDW的表达分析研究,不仅能够揭示小儿哮喘的病情进展内在机理,同时还能够为临床上小儿哮喘的病情评估提供血清学方面的依据。

Eotaxin是嗜酸性粒细胞相关因子,其表达浓度的上升能够通过募集嗜酸性粒细胞,加剧其迟发性变态反应或者过敏反应的激活,进而参与到呼吸道平滑肌的痉挛过程中。基础方面的研究显示，Eotaxin的表达上升还能够提高呼吸道平滑肌细胞的氧化应激性损伤,进而加剧小气道的狭窄和气流的阻塞[11]；IL-17是Th1/Th2 T淋巴细胞免疫相关因子,其能够通过募集下游炎症性信号通路NF-KB的激活，提高下游炎症效应因子的释放程度[12]；RD W是红细胞分布宽度,其能够反应红细胞膜的形态学特征的改变，近年来的相关研究发现，RDW的表达能够反应患者体内的变态反应、炎症瀑布反应等病理过程，进而参与到多种病理生理进程中。部分研究者探讨了Eotaxin的表达与哮喘的病情关系，认为在哮喘患者中，Eotaxin的表达浓度明显上升[13]，但缺乏对于Eotaxin、IL-17、RDW的表达与肺功能的关系研究。

对于小儿哮喘患者血清中Eotaxin、IL-17、RDW的表达分析可见，在病例组患者血清中，Eotaxin、IL-17、RDW的表达浓度均明显上升，高于正常对照组儿童，统计学差异显著，提示了Eotaxin、IL-17、RDW的高表达均能够参与到小儿哮喘的病情进展过程。分析其内在的原因或者机理，主要由于Eotaxin、IL-17、RDW的下列病理作用有关[14]：⑴Eotaxin的表达上升,能够促进一氧化氮合酶的活性改变，降低了一氧化氮的合成速度，促进了平滑肌细胞的痉挛风险；⑵IL-17是T淋巴细胞分泌的效应因子，其能够提高下游肿瘤坏死因子a的激活程度，进而促进气道的高反应性，加剧哮喘的病情进展；⑶RDW的表达上升主要考虑与呼吸道局部炎症反应的激活有关,炎症性因子的释放能够促进红细胞释放进入外周血。陈凌等[15]研究者也发现，在哮喘患者血清中，IL-17的表达浓度可显著上升，其平均上升幅度可超过30%，同时在合并有明显的肺性脑病的患者中，IL-17的表达浓度可进一步的上升。在不同病情严重程度的患者中，可以发现在重度组患者中，Eotaxin、IL-17、RDW的表达浓度明显上升，高于轻度组及中度组患者，差异较为显著,提示了Eotaxin、IL-17、RDW的高表达与哮喘的病情关系密切相关,这主要由于相关指标的上升，能够通过综合性影响到呼吸道的微环境、气道反应性等，进而促进哮喘病情的进展。临床上可以通过监测Eotaxin、IL-17、RDW，进而评估哮喘患儿的病情程度。第一秒用力呼气容积（FEV1）、呼气峰值流速（PEF）、用力肺活量（FVC）是评估患者肺功能的指标，相关关系分析可见，哮喘患者体内Eotaxin、IL-17与FEV1、PEF测定值均呈显著的负相关关系，这主要由于Eotaxin、IL-17的表达改变，能够影响到小气道可逆性狭窄程度，加剧粘液渗出及平滑肌痉挛，从而影响到肺功能水平。

综上所述,在小儿哮喘患者中，Eotaxin、IL-17及RDW的表达浓度均明显上升，Eotaxin、IL-17等的表达与哮喘患者的病情严重程度及肺功能密切相关。