高效液相色谱法测定吡虫啉杀蟑饵剂

许杰妤，王广成

(1.成都彩虹电器(集团)股份有限公司，四川 成都 610045；2.四川省农药检定所，四川 成都 610041)

1 前言

吡虫啉(Imidacloprid)是一种硝基亚甲基类内吸杀虫剂，属氯化烟酰类杀虫剂，又称为新烟碱类杀虫剂，化学式为C9H10ClN5O2，具有广谱、高效、低毒、低残留优点，并有触杀、胃毒和内吸等多重作用[1]。害虫接触药剂后，中枢神经正常传导受阻，使其麻痹死亡。产品速效性好，药后1d即有较高的防效，残留期长达25d左右。药效和温度呈正相关，温度高，杀虫效果好。主要用于防治刺吸式口器害虫。吡虫啉杀蟑饵剂是以吡虫啉原药为有效成分，添加引诱剂及适宜助剂配制而成的防治蜚蠊的卫生杀虫剂，其施用方式为投放。目前对蟑螂的防治有气雾剂触杀，杀蟑烟片熏杀等，饵剂在使用过程中不会产生气味，烟雾，对环境更友好，并且能与上述杀蟑方式共同存在，综合治理[2-4]。

市场上流通的杀蟑饵剂有效成分主要为吡虫啉、氟虫腈。吡虫啉杀蟑饵剂最早由拜耳公司引进中国，在中国已持续销售十几年，目前尚未查得蟑螂对吡虫啉的相关抗性情况报道。氟虫腈现在属于限制使用农药，吡虫啉与之相比在安全性上更具有优势。

本文为研究吡虫啉杀蟑饵剂生产控制过程中对产品质量的控制，建立了高效液相色谱内标法测定杀蟑饵剂中吡虫啉含量。吡虫啉含量的检测方法一般为液相色谱外标法，本文采用的液相色谱内标法较之液相色谱外标法，测试结果更精准，能更好的对产品质量进行监测。

2 试验部分

2.1 仪器与试剂 水(新蒸二次蒸馏水)；溶剂：乙腈(分析纯)；吡虫啉标准品(已知质量分数≥98.0%)；对氯苯酚(分析纯)。

高效液相色谱仪，具有紫外波长可变检测器(Aglient 1260)；色谱柱：250mm×4.6mm不锈钢柱，C18、5μm；微量注射器：10μL。

2.2 方法提要 试样用乙腈溶解，用对氯苯酚为内标，以乙腈和水作流动相，使用以ODS-C18为填料的色谱柱和紫外可变波长检测器，用内标法对试样中的吡虫啉进行分离和测定。

2.3 气相色谱操作条件 柱温：(30±2)℃，流速：1.0mL/min；检测波长：220nm；进样量：10μL。

吡虫啉标样和吡虫啉杀蟑饵剂样品液相色谱图(图1-2)。

1-吡虫啉; 2-对氯苯酚图1 吡虫啉标样和内标对氯苯酚高效液相色谱图

1-吡虫啉; 2-对氯苯酚图2 吡虫啉杀蟑饵剂和内标对氯苯酚高效液相色谱图

2.4 测定步骤

2.4.1 内标溶液配制 称取对氯苯酚约0.6g(精确到0.000 2g)置于100mL容量瓶中，用乙腈溶解，并稀释到刻度、混匀。

2.4.2 标准品溶液的配制 称取吡虫啉标样约0.05g(精确到0.000 2g)的试样，置于50mL容量瓶中，准确加入内标溶液5.0mL，用乙腈溶解，并稀释至刻度、摇匀。

2.4.3 试样溶液的配制 称取吡虫啉杀蟑饵剂约2.3g(精确到0.000 2g)的试样，置于锥形瓶中，准确加入内标溶液5.0mL，乙腈45.0mL溶解，超声波振荡，摇匀后用0.45μm滤膜过滤，待用。

2.4.4 测定 在上述色谱条件下，待仪器稳定后，连续数针注入标样溶液，直至相邻2针吡虫啉峰面积相对变化<1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液顺序进行测定。

2.4.5 计算 将测得的2针试样溶液及试样前后2针标准溶液中吡虫啉与内标物峰面积之比，分别进行平均。产品中吡虫啉的含量x1(%)按式(1)进行计算：

(1)

式中：x1-杀蟑饵剂中吡虫啉的质量分数；r1-标样溶液中吡虫啉与内标物峰面积的比值平均值；r2-试样溶液中吡虫啉与内标物峰面积的比值平均值；m1-标样溶液中标样质量，g；m2-样品溶液中样品质量，g；p-标样纯度，%。

3 试验结果与讨论

3.1 分析方法的特异性 采用HPLC-DAD对吡虫啉、对氯苯酚标准品在210～400nm进行紫外扫描，结果(图3)。吡虫啉在269nm波长有较强的吸收，对氯苯酚的最大吸收波长225nm，2种物质吸收曲线的交点为220nm。在220nm左右，吡虫啉和对氯苯酚均有较好的吸收，而且杂质吸收较小，主峰和杂质峰分离效果较好，故确定220nm为吡虫啉分析方法的检测波长。

3.2 分析方法的线性相关性试验 在一定质量范围内，按照浓度递增的顺序配制数个吡虫啉标样样品。以吡虫啉与内标物质量比为横坐标，吡虫啉与内标物峰面积比为纵坐标绘制标准曲线。上述操作条件下，当吡虫啉/内标物质量比在0.975 8～2.460 6之间，与相应的吡虫啉/内标物峰面积比有良好的线性关系，计算得回归方程为y=0.438x+0.011，线性相关系数R2=0.999 8。

图3 吡虫啉与对氯苯酚的紫外吸收光谱图

表1 吡虫啉线性关系实验数据

3.3 分析方法的精密度试验 对同一样品中的吡虫啉的质量分数进行5次平行测定，并进行标准偏差及变异系数的统计运算。同时运用修改的Horwitz公式作为精密度是否合格的判定依据(表2)。可知，本分析方法的变异系数

表2 吡虫啉方法精密度实验数据

3.4 分析方法的准确度试验 为验证本方法的系统误差，对方法的精确度进行了试验，取经分析已知有效成分准确含量的样品，加入已知含量吡虫啉标样，测定吡虫啉的回收率，其结果(表3)。对吡虫啉的添加回收率在99.28%～100.88%之间，因此本方法可以满足对产品中吡虫啉的分离测定。

表3 吡虫啉准确度实验数据

4 结论

综上所述，本试验建立了高效液相色谱法检测吡虫啉杀蟑饵剂中的吡虫啉含量分析方法。试验结果表明，采用本方法测定吡虫啉含量具有较高的线性响应，较高的准确度和精密度。本方法具有操作简单、高效的特点，是企业产品质量控制较为理想的分析检测方法，提高了检测效率。