围生期孕妇无乳链球菌的临床感染情况及耐药性分析*

丁赔赔，李艳君，丁毅伟，钱扬会，赵强元

解放军总医院第六医学中心检验科，北京100048

无乳链球菌又称B群链球菌(GBS)，是一种条件致病菌。近年来，GBS导致的感染，尤其是围生期孕妇的感染呈逐年上升趋势，引起了人们的广泛关注。在孕期内，女性由于机体免疫力下降，GBS容易在阴道内定植，从而引起孕妇早产、宫内感染、胎膜早破等一系列妊娠并发症[1]。目前认为GBS是围生期严重感染性疾病的主要病原菌之一，进一步了解GBS的感染情况及耐药情况，对预防孕妇感染及合理使用抗菌药物有重要意义。因此，本研究通过对2017年4月至2020年3月于本院参与产检的6 313例围生期孕妇进行GBS筛查，以期探讨围生期孕妇GBS的临床感染情况及耐药性特征，为临床合理使用抗菌药物提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2017年4月至2020年3月于本院接受产检的6 313例围生期孕妇为研究对象，年龄18～51岁，平均(32.03±4.06)岁；孕周35～37周，平均(36.03±0.84)周。纳入标准：(1)符合围生期孕周要求；(2)临床资料完整，按时建档并有完整的产检记录；(3)同意配合本研究相关调查。排除标准：(1)采样前1个月内使用过抗菌药物或接受过阴道清洗、治疗者；(2)阴道出血者；(3)性传播疾病患者；(4)合并其他生殖泌尿系统感染、精神疾病者；(5)合并恶性肿瘤或其他严重的系统性疾病者。根据GBS检测结果将围生期孕妇分为GBS阳性组和GBS阴性组。本研究经医院伦理委员会审核批准，入组孕妇均已签署知情同意书。

1.2仪器与试剂 Bruker Microflex LT/SH质谱仪及Bruker质谱仪商品化bts来自德国布鲁克公司，Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定和药敏系统来自法国梅里埃公司，哥伦比亚血平板、B群链球菌显色平板均购自郑州安图生物，质控标准菌株(金黄色葡萄球菌ATCC25923)购于北京市临床检验中心。

1.3方法

1.3.1标本采集 孕妇入院后由门诊妇产科医生按照无菌操作，采集阴道下1/3和直肠(通过直肠括约肌)拭子标本，将取样后的棉拭子置于无菌试管中，立即送检。

1.3.2检测方法 将临床采集的标本接种于GBS显色平板与哥伦比亚血平板，按照《全国临床检验操作流程》(第4版)[2]进行培养，在37 ℃、5%CO2条件下培养18～48 h。观察培养基菌落生长情况，挑取可疑菌落(血平板：β溶血，灰白色，圆形，半透明菌落；GBS显色平板：紫红色到红色的小菌落)，并将其涂在质谱仪靶板上，经过甲酸和基质处理后进行质谱鉴定。

若鉴定结果为GBS阳性，则挑取单个菌落在哥伦比亚血平板上进行纯化，在37 ℃、5%CO2条件下继续培养18～24 h，将纯化后的单菌落用0.45%氯化钠溶液调至0.50～0.62麦氏单位，通过法国梅里埃Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定药敏仪器进行鉴定和药敏试验。

1.3.3观察指标 收集围生期孕妇的年龄、双胎妊娠、有无妊娠期糖尿病、妊娠期高黏稠血症、妊娠期阴道炎及不良孕史等情况；收集围生期孕妇发生胎儿窘迫、先兆流产、早产、胎膜早破、羊水污染、产后出血、剖宫产等妊娠结局。

1.4统计学处理 采用SPSS 20.0统计学软件进行统计处理和分析。计数资料用频数或率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1围生期孕妇GBS感染情况 6 313例围生期孕妇中，GBS阳性组452例，GBS阴性组5 861例，GBS感染率为7.16%。

2.22组围生期孕妇一般资料比较 2组孕妇年龄，妊娠期糖尿病、妊娠期高黏稠血症、妊娠期阴道炎检出率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。2组围生期孕妇双胎妊娠、不良孕史比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.32组围生期孕妇妊娠结局比较 2组围生期孕妇在胎儿窘迫、先兆流产、胎膜早破率方面比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而早产、羊水污染、产后出血、剖宫产率方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表1 2组孕妇一般资料比较[n(%)]

2.3GBS药敏试验结果 分离出的452株GBS对利奈唑胺、青霉素、奎奴普丁/达福普汀、替加环素、万古霉素、替考拉宁、氨苄西林敏感率为100.00%，无中介或耐药现象；对克林霉素、左氧氟沙星、四环素的敏感率分别为28.98%、44.91%、67.92%，耐药率分别为70.35%、53.54%、32.08%，见表3。

表2 2组孕妇妊娠结局比较[n(%)]

表3 GBS对常见10种抗菌药物的药敏试验结果[n(%)]

3 讨 论

GBS是一种条件致病菌，近年来，微生物组学研究揭示了人体的微生物会随着人体的环境、饮食、体质量、激素及其他因素的改变而变化[3]。妊娠期间，当孕妇体质量、免疫和代谢发生变化时，阴道微环境随之改变，破坏了原有的微生态平衡，微生物菌群也发生变化，导致阴道菌群失调，GBS在阴道内定植，成为严重威胁孕妇及新生儿健康的一个重要致病菌[4-5]。

据美国疾病预防控制中心(CDC)统计，产妇GBS的感染率为10%～30%。当孕妇感染GBS后，会通过胶质酶、蛋白酶等物质的作用引起胎膜早破等不良妊娠结局，还会通过母婴传播引起新生儿肺炎、败血症、脑膜炎等疾病，甚至导致新生儿死亡、残疾[6]。因此，及早采取措施预防新生儿GBS感染十分重要。2010年，美国CDC专门制订了GBS预防控制指南(在孕35～37周筛查GBS)，旨在减少围生期GBS感染对母婴结局的影响[7]。近年来，我国对围生期孕妇GBS筛查重要性的认识不断提高，2014年，中华医学会已将GBS作为一个备查项目。本研究结果显示，围生期孕妇GBS感染率为7.16%，与既往研究基本一致[8]。2016年全球10个国家5万多名孕妇的系统评价表明：健康孕妇GBS带菌率为2%～32%，其中亚洲国家孕妇GBS带菌率约为7%，较欧美和非洲等国家的低[8]。

孕妇GBS感染存在人群差异性，曹雪莲等[9]研究表明，年龄、孕期贫血、阴道炎症、糖尿病及其他疾病均与孕妇GBS携带无关。本研究与曹雪莲等[9]研究结果一致，显示GBS阳性组年龄，妊娠期糖尿病、妊娠期贫血、妊娠期高黏稠血症、阴道炎检出率与GBS阴性组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。但也有研究显示，不同年龄组孕妇GBS感染率差异有统计学意义，其中20～30岁组孕妇感染例数最多，GBS检出率也最高[10]，而本研究中不同年龄组间GBS检出率差异无统计学意义(P>0.05)，这一结果的差异可能是受地区及人群差异的影响。此外，本研究还显示，GBS阳性组双胎妊娠、不良孕史与GBS阴性组相比，差异有统计学意义(P<0.05)，提示围生期孕妇双胎妊娠或有不良孕史可能增加GBS感染的概率，因此在临床上应重点关注孕妇外阴症状，警惕发生GBS感染的可能。

既往研究表明，GBS富含磷酸酯酶A2，可水解细胞膜中的磷酯酶键，破坏细胞膜，且炎性细胞的吞噬作用及代谢产物侵袭胎膜，最终可能引起胎膜过早破裂[11]。此外GBS感染的孕妇可能发生宫内感染、早产、胎儿发育不良及晚期流产等不良后果[11-12]。本研究结果显示，GBS阳性组胎儿窘迫、先兆流产、胎膜早破发生率与GBS阴性组相比，差异有统计学意义(P<0.05)，提示GBS增加了围生期孕妇妊娠不良结局的发生率。

2010年美国CDC指南指出：治疗GBS首选青霉素，广谱抗菌药物氨苄西林作为备选药物，无须进行药敏试验，如青霉素过敏可根据实验室药敏结果选用克林霉素[7]。本研究对分离的452株GBS菌株分别进行了药敏试验，结果显示GBS对克林霉素、左氧氟沙星、四环素的耐药率分别为70.35%、53.54%、32.08%。张敬蕊等[13]研究表明，GBS对克林霉素和左氧氟沙星的耐药率分别为77.15%和47.68%。张茜茜等[14]研究表明，GBS对克林霉素、左氧氟沙星、四环素的耐药率分别为82.61%、37.78%、41.67%。这提示克林霉素、左氧氟沙星、四环素在国内的耐药率普遍较高，临床上应慎重选用。本研究结果显示，GBS对利奈唑胺、青霉素、奎奴普丁/达福普汀、替加环素、万古霉素、替考拉宁、氨苄西林高度敏感(敏感率100.00%)，无中介或耐药现象，与赵江红等[15]人研究结果一致。但孕妇是一个特殊群体，在用药上需谨慎，即要考虑疗法，还要考虑胎儿的安全性。糖肽类抗菌药物万古霉素、替考拉宁具有肝肾毒性，不宜作为围生期孕妇临床用药，而利奈唑胺、替加环素、奎奴普丁/达福普汀也不适合作为孕妇的预防性用药。青霉素及氨苄西林不仅不良反应小，对胎儿无大的影响，而且敏感性也很高，可作为孕妇GBS感染的首选药物，对青霉素过敏的孕妇可根据患者自身情况及药敏结果选择头孢喹啉等第一、二代头孢类药物作为抗GBS感染的二线抗菌药物。

综上所述，围生期孕妇GBS感染易造成胎儿窘迫、先兆流产及胎膜早破等不良妊娠结局，临床上应加强检测孕妇GBS的感染和耐药情况，一旦发现GBS感染要合理使用抗菌药物，目前青霉素仍是治疗GBS的首选药物。孕妇对青霉素过敏则需进行药敏试验，根据药敏试验结果合理、规范选用抗菌药物。