小鳞拟松鲷生长、形态特征及核型分析

宋红梅，屈政委，2，汪学杰，牟希东，刘超，刘奕，胡隐昌*

(1.中国水产科学研究院珠江水产研究所，广东 广州 510380； 2.上海海洋大学 水产与生命学院，上海 201306)

小鳞拟松鲷Datnioidespulcher，俗称印度尼西亚虎鱼，隶属于鲈形目Perciformes拟松鲷科Lobotidae拟松鲷属Datnioidide，是一种重要经济鱼类。自然分布于东南亚半岛的湄南河流域、湄公河流域，以及印尼苏门答腊及加里曼丹岛西部等低纬度热带地区。小鳞拟松鲷属于猎食性鱼类，喜捕食活饵。因其肉味鲜美，肌间刺较少，在原产地主要作为食用鱼。中国无拟松鲷鱼类的自然分布，主要作为名贵观赏鱼被引入，常用来与龙鱼混养，寓意“龙腾虎跃”。国内外对拟松鲷鱼类的研究鲜有报道，仅见对曼谷拟松鲷Datnioidesundecimradiatus[1]和小鳞拟松鲷[2]两种拟松鲷线粒体的相关研究，以及对小鳞拟松鲷[3]微卫星特征的分析研究，而在其他方面如形态特征、生长特性及染色体核型等方面的研究尚未见报道。补充小鳞拟松鲷基础生物学资料，可为更深层次的研究打下基础。

形态学性状是鱼类类别的划分依据，同时受到行为、环境及季节变化等多方面的影响[4]。掌握鱼类生长发育特性及规律，可丰富其生长基础研究，也可为鱼类常规化养殖提供指导。目前，有关鱼类形态结构与生长发育特性的研究较多[5-6]，但有关小鳞拟松鲷尚无相关报道。因此，本研究中拟对小鳞拟松鲷的内外部形态特征、生长特性及核型特征等进行研究，以期为补充小鳞拟松鲷基础生物学资料，并为其分类鉴定和养殖提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

试验共用两批不同批次的试验鱼，用于内外部形态特征、染色体制备研究的成鱼于2017年由印度尼西亚引进，用于生长特性试验的幼鱼于2018年11月经进口鱼商从印度尼西亚购进，均养殖于中国水产科学研究院珠江水产研究所观赏渔业基地。

1.2 方法

1.2.1 形态特性试验 随机挑选10尾小鳞拟松鲷成鱼作为解剖样本，对其各鳍条数目及鳍条与条纹的相对位置进行记录统计，并观察各鳍条是否存在分支鳍条。统计侧线鳞及测线上下方的鳞片数目、左右两边鳃弓数目及外鳃弓鳃耙数目，并解剖试验样本观察其内部各器官形态特征。

1.2.2 幼鱼生长特性试验 生长特性试验期间，试验幼鱼养殖在水族缸(130 cm×45 cm×55 cm)中，水温稳定在30 ℃左右，缓慢循环水流，持续曝气。每天投喂一次冷冻过的红虫、小虾及鱼肉，投饵量约为池内鱼体总质量的3%～5%。生长特性试验开始共养殖50尾120日龄的小鳞拟松鲷幼苗，幼鱼初始体质量为(0.84±0.31)g，体长为(3.71±0.36)cm，养殖试验持续155 d，试验结束时幼鱼剩余41尾，期间死亡9尾。试验过程中，在120、135、165、182、197、212、260、275日龄时，随机取30尾试验鱼，使用斯乐疲，按说明书剂量进行麻醉，然后测量鱼体全长、体长、体高、头长、眼径、口裂长、体宽、眼间距等指标数据(图1)(精确到0.01 cm)，鱼体质量使用电子天平称量(精确到0.01 g)。前后采集8次共240个数据。可量性状的测量依据孟庆闻等[7]的方法。采用m=aLb(a为生长的条件因子，b为幂指数)研究其体质量与体长的关系。

1.2.3 染色体核型分析 染色体制备参照朱新平等[8]的方法。挑选2尾小鳞拟松鲷雄性成鱼头肾及中肾作为试验材料，其中，2尾鱼体质量分别为376、435 g，体长分别为28.5、31.1 cm，染色体制片完成后用显微镜进行观察，100倍油镜下拍照，取115个状态较好的中期分裂相细胞，确定染色体的数目，并选出10个分散良好、形态清晰的染色体分裂相细胞，参照Levan等[9]的染色体分类标准进行分类排列。

1.2.4 生长指标计算 各项生长指标计算公式为

瞬时生长率=(lnm2-lnm1)/(t2-t1)×100%，

体质量日均增量mz=(m2-m1)/(t2-t1)，

体长日均增量Lz=(L2-L1)/(t2-t1)，

肥满度K=m/L3×100%。

其中：m1、m2分别为养殖t1、t2时的体质量(g)；t1和t2分别为不同的养殖时间(d)；L1、L2分别为养殖t1、t2时的体长(cm)；m、L分别为鱼体质量(g)和体长(cm)。

1.3 数据处理

试验数据以平均值±标准差(mean±S.D.)表示，使用Photoshop CC 2017制作染色体组型图，使用 Excel 2016进行数据统计分析，计算可量形状间各项比值，绘制生长曲线图及绘制试验鱼的核型模式图[10]。

2 结果与分析

2.1 外部与内部形态特征

2.1.1 外部形态特征 小鳞拟松鲷成鱼体侧扁，侧面观近似橄榄形,体色呈暗黄色，体表有若干条黑色条纹，黑条呈现空心或间断。条纹数分布较特殊，大部分小鳞拟松鲷鱼体两侧黑纹均为7条或8条，也存在极其特殊的个体，如鱼体一侧有7条黑纹，而另一侧有8条黑纹，即两侧黑纹数量不一致。大部分小鳞拟松鲷第一条暗纹身体左右两侧不相连，其余暗纹于背部相连，在腹部有部分相连。第一条暗纹贯穿眼部，最后一条暗纹在尾柄端，鳃盖延伸至第二条暗纹处。

小鳞拟松鲷成鱼吻尖、口裂中等、左右对称，下颌长于上颌，牙齿发达。左右两侧各两个鼻孔，呈前后分布。眼大，凸出，眼间距大。体被细小鳞片，左右两边侧线明显，起始于第二条暗纹，呈弓形延伸至尾柄处。弓形顶点位于第三条暗纹处，随后侧鳞线位置逐渐降低。

侧线鳞106～113，侧线上鳞18～25，侧线下鳞34～36。背鳍分为第一背鳍和第二背鳍且相连。其中，第一背鳍存在坚硬鳍棘，起始于第二条与第三条暗纹之间，终止于第五条暗纹附近，第二背鳍存在分支鳍条，延伸至尾柄处。胸鳍无硬棘，存在分枝鳍条。腹鳍胸位，有鳍棘，位于第二条与第三条暗纹之间，存在分支鳍条。臀鳍有鳍棘，尾鳍相比较其体型较大，介于扇形与截形之间。小鳞拟松鲷的鳍式为：(D.)背鳍Ⅺ～Ⅻ 15～17，胸鳍(P.) 16～18，腹鳍(V.)Ⅱ 5～7，臀鳍(A.)Ⅲ～Ⅳ 9～12，尾鳍(C.)15～17；脊椎骨数量为22～24。小鳞拟松鲷成鱼体长最大可达55 cm，体质量可达3 587 g(图2)。

小鳞拟松鲷左右两边各具4 条鳃弓(图3)，每条鳃弓上有2个半鳃，共8个半鳃，且鳃间隔不发达，第一条鳃弓外鳃耙16～19条，具有6枚鳃盖条骨。

2.1.2 内部形态特征 小鳞拟松鲷具有22～24节脊椎骨及8根肋骨，肌间刺较少；心脏有明显的动脉球；左右两侧均有性腺,呈对称分布，于泄殖孔处相连，雌鱼怀卵量大，卵直径小；胃部较大、胃壁厚、肠道较短；肝脏呈红色，两叶；胆囊呈黄绿色，脾脏呈黑褐色；头肾位于脊椎骨最前方的下部，中肾依附在脊椎骨下部呈暗红色；无鳔管(图4)。

1—全长；2—体长；3—头长；4—眼径；5—体高；6—口裂长；7—体宽；8—眼间距。1—total length；2—body length；3—head length；4—interorbital；5—body height；6—crack length；7—body width；8—eye spacing.图1 小鳞拟松鲷测量指标Fig.1 Measured indices of Datnioides pulcher

图2 小鳞拟松鲷外部形态及鳞片Fig.2 External morphology and scale of Datnioides pulcher

2.2 生长特征

2.2.1 可量与可比性状 本试验中在8个日龄时间点均测量小鳞拟松鲷幼鱼全长、体长、体高、头长、眼径、口裂长、体宽、眼间距等8个可量数据指标，并计算可比性状比例，取其平均值，结果如表1所示。

图3 小鳞拟松鲷右侧鳃弓Fig.3 Right gill arch of Datnioides pulcher

1—肝脏；2—胃；3—脾脏；4—肠；5—精巢；6—卵巢。1—liver；2—stomach；3—spleen；4—intestine；5—testis；6—ovary.图4 小鳞拟松鲷内部结构(左雄右雌)Fig.4 Organs of Datnioides pulcher (left:male;right:female)

表1 小鳞拟松鲷形态可量性状比值(n=240)

2.2.2 幼鱼全长、体质量与体长的相关性 小鳞拟松鲷幼鱼8个日龄时间点的数据见表2，其中，165日龄时瞬间生长率最大，生长最快。对表2的体长、全长和体质量数据进行统计分析，结果表明，全长与体长的关系式可用y=1.123x+0.141 2(R2=0.998 6)表示，而体质量与体长的关系符合幂函数关系式，其关系方程为y=0.025 3x3.025 1(R2=0.991 2)，为异速生长(图5)。

表2 小鳞拟松鲷幼鱼生长性能Tab.2 Growth of juvenile Datnioides pulcher

图5 全长、体质量与体长的关系曲线Fig.5 Curve of total length and body mass versus body length

2.3 核型特征

2.3.1 染色体数目 从2个试验个体的染色体玻片中，选取115个小鳞拟松鲷中期分裂相良好的染色体进行统计分析，结果见表3。根据众数原理，确定小鳞拟松鲷的二倍体染色体数目为2n=48。

表3 小鳞拟松鲷染色体数目统计

2.3.2 核型 小鳞拟松鲷染色体中期分裂相及配对结果见图6，根据染色体臂比将染色体分为2个中部着丝点染色体(m)、2个亚中部着丝点染色体(sm)、20个亚端部着丝点染色体(st)和24个端部着丝点染色体(t)。核型公式为2n=48=2m+2sm+20st+24t，臂数(NF)=52。

染色体臂比的统计结果如表4所示，其中染色体中无异型性染色体、次缢痕及随体等典型性特征。

小鳞拟松鲷、奥利亚罗非鱼[11]和淡水黑鲷[12]等鲈形目鱼类的核型公式及部分参数比较见表5，由核型公式可知，在染色体类别中小鳞拟松鲷的t型占比较大，m型占比较小。

3 讨论

3.1 小鳞拟松鲷形态特征

小鳞拟松鲷与中国本土分布的斑鳜Sinipercascherzeri[13]、鳜Sinipercachuatsi[14]等鱼类形态比较接近。将小鳞拟松鲷与斑鳜、鳜3种鱼类形态数据进行比较(表6)，可以看出，小鳞拟松鲷与斑鳜、鳜鳍式接近，差别主要在于斑纹及体长与体高之比。斑鳜体被不规则小斑点，尾鳍存在空心斑[13]，鳜体侧有狭长黑纹，不规则暗棕斑点及斑块[15]，而小鳞拟松鲷体被黑色条纹，会出现空心纹。斑鳜体长与体高之比为3.4～4.0[13]，小鳞拟松鲷为2.19～2.60，明显比斑鳜体形更短而高。鳜体长与体高之比为2.2～3.1[15]，与小鳞拟松鲷体型上相似。这表明，拟松鲷科与鱼旨科在鲈形目中是亲缘关系比较接近的两个科。

m—中部着丝粒；sm—亚中部着丝粒；st—亚端部着丝粒；t—端部着丝粒。 m—metacentrics;sm—submetacentrics;st—subtelocentrics;t—telocentrics.图6 小鳞拟松鲷染色体核型Fig.6 Karyotype of Datnioides pulcher

表4 染色体的相对长度和臂比值Tab.4 Chromosome length and arm ratio

表5 小鳞拟松鲷、奥利亚罗非鱼与淡水黑鲷的核型公式及部分参数比较

3.2 小鳞拟松鲷生长特性

幼鱼体质量与体长的关系可反映鱼类的生长状态[16]。有研究表明，不同温度下哲罗鱼Huchotaimen幼鱼[17]、达氏鳇与西伯利亚鲟杂交幼鱼[18]及黄颡鱼Pelteobagrusfulvidraco幼鱼[19]等均呈现异速生长[20]。本研究中生长试验共进行了155 d，对试验数据分析表明，小鳞拟松鲷在幼鱼阶段的生长类型也为异速生长，试验鱼体质量生长速度快于体长的生长速度，鱼的体型趋向于短宽型。在实际养殖生产中，可依据体长与体质量幂函数关系式，对小鳞拟松鲷生长发育规律做出推测，并以此决定饵料投喂量，避免养殖成本的增加，以实现利益最大化。

表6 小鳞拟松鲷与斑鳜、鳜主要性状对比

3.3 小鳞拟松鲷核型分析

本研究中采用活体注射植物血凝素(PHA)法制备染色体。一般情况下，秋水仙素处理时间有2、5、4 h 3种[21-22]，本试验中，小鳞拟松鲷染色体制备所需秋水仙素处理时间为2 h时，获得的染色体分裂相更为理想。不同种鱼类染色体制备需要的低渗时间不同，本研究中低渗时间为25 min效果最好，所获得的染色体分裂相最多。

鲈形目鱼类在鱼类系统发生系统中处于高位类，m和sm型染色体较少，而t和st型染色体较多[20]。对已做过核型分析的57种鲈形目研究发现[23]，染色体数目为48的鱼类占57.9%，反映了多数鲈形目鱼类的染色体数目特征。本研究中，染色体数目多于48的，可能是多个染色体细胞破裂后染色体叠加导致，而染色体数目少于48，可能是细胞破裂时染色体散失导致的，因此，染色体数目会存在随机性差异。研究表明，同种鱼类其性别也会影响核型公式。而本研究中用于染色体分析的2个试验个体均为雄性，故并未观察到有性别影响核型公式的现象[24]。

染色体是遗传物质的载体，每个物种都具有独特的染色体，鱼类的染色体核型类型与其进化程度存在一定的关系[25]。进化上越是处于上位，其染色体臂越收敛，端着丝点染色体多，染色体臂数越少，并以此将真骨鱼类划分为低位类、中位类和高位类3个演化群体。由小鳞拟松鲷的核型公式可知，t和st型染色体较多，在演化上属于高位类。胡国宏等[22]认为，具有较多t型染色体的物种较为原始，具有较多m和sm型染色体的物种是特化种类，即染色体臂数较多的种类为进化类型。小鳞拟松鲷存在较多的t型染色体，因此，在进化中属于较为原始的物种。

4 结论

1)本研究中首次对小鳞拟松鲷内部各器官、内外部形态特征进行了具体描述。

2)小鳞拟松鲷在幼鱼阶段的生长类型为异速生长，全长与体长呈线性关系，体质量与体长呈幂函数关系。

3)小鳞拟松鲷核型公式为2n=48=2m+2sm+20st+24t，NF=52，核型符合高位类鱼类形态特征，染色体中无异型性染色体、次缢痕及随体等典型性特征。