血清sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2对早期稽留流产与异位妊娠的诊断价值

许永海，杨绿舜，刘峰

518109 广东省深圳市龙华区人民医院社管中心(杨绿舜)

518100 广东省深圳市中国科学院大学深圳医院(光明)超声科(刘峰)

稽留流产是流产的一种特殊形式，指妊娠宫内胚胎或胎儿死亡后未能及时自然排出，又称过期流产[1]。异位妊娠是指受精卵着床于子宫体腔以外(包括卵巢妊娠、输卵管妊娠、腹腔妊娠、子宫壁间妊娠、宫颈妊娠和阔韧带妊娠)[2]，随着我国二胎生育政策的放开及高龄孕妇人数的剧增，目前稽留流产与异位妊娠均呈逐年上升趋势，已成为临床上妇科2个常见的疾病，若未及时治疗，可引起如大出血等严重的并发症，威胁患者生命安全，也给患者家庭和社会带来沉重负担[3-4]。目前，早期异位妊娠和稽留流产主要依靠影像学超声检查及孕酮(P)水平进行动态分析判断，但其指标测定范围与正常妊娠重合率高，对早期异位妊娠和稽留流产诊断与鉴别仍较困难[5]。因此，探讨更加快速、简便、有效的诊断方法，实现异位妊娠早期诊断，及时对其实施合理治疗，具有重要临床意义。现分析可溶性血管内皮生长因子(sflt-1)、Bcl2相互作用蛋白3(BNIP3)、血管生成素(Ang)、血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子2(FGF2)水平联合检测对异位妊娠和稽留流产患者的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2018年1月-2020年3月深圳市宝安区中心医院/深圳市大学第五附属医院妇科就诊的正常早孕者100例为A组、异位妊娠者100例为B组及早期稽留流产患者100例为C组。A组年龄20～45(26.60±5.92)岁；停经时间32～84(38.62±7.43)d。B组年龄20～45(26.57±5.93)岁；停经时间32～84(38.55±7.42)d。C组年龄20～45(26.80±5.82)岁；停经时间32～84(38.70±7.35)d。3组患者一般资料比较差异均不显著(P>0.05)，具有可比性。本研究方案经医院医学伦理委员会批准，参与研究的所有对象均为自愿且签署知情同意书。

1.2 纳入标准[6](1)妊娠时间为7周≤孕周<12周；(2)B型超检查明确诊断；(3)既往月经规律；(4)临床资料均完整；(5)患者均认知正常。排除标准：(1)合并生殖系统炎症者；(2)合并血压者；(3)合并糖尿病者；(4)合并精神疾病患者；(5)心肺等重要器官功能障碍患者；(6)合并多囊卵巢综合征患者；(7)不配合研究者。

1.3 方法 3组均于入院后第2天6∶00-8∶00空腹抽取肘静脉静脉血5 ml，置于干燥生化试管中，使用37 ℃电热恒温水槽FYL-YS-100L医用水浴箱(由上北京福意联医疗设备有限公司提供)静置30 min，接着以台式TD5多管架自动平衡离心机(由上海卢湘仪离心机仪器有限公司提供)离心提取血清，最后置于-20 ℃ CKF-ML090B医用低温箱(由山东巴罗克生物科技股份有限公司提供)备用。

血清sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2均采用酶联免疫吸附(ELISA)采用检测方法，仪器使用全自动酶免分析仪BIOBASE2000(济南鑫贝西生物技术有限公司提供)，配套试剂由上海沪震生物科技有限公司提供，详其操作详细步骤均严格按照说明书。

2 结 果

2.1 sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2水平比较 C组及B组血清BNIP3、Ang、VEGF和FGF2水平均低于A组(P<0.05)，C组血清BNIP3、Ang、VEGF和FGF2水平均低于B组(P<0.05)；C组及B组血清sflt-1水平均高于A组，C组血清sflt-1水平高于B组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 3组sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2水平比较

2.2 sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2单项与联合检测比较 与单项检测比较，B组及C组血清sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2联合检测对早期稽留流产及异位妊娠诊断符合率均高于单项检测，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 单项与联合检测对早期稽留流产及异位妊娠诊断符合率比较 [例(%)]

3 讨 论

随着近年来在早期稽留流产及异位妊娠发生率在妊娠妇女中的增加，临床上越来越重视早期妊娠结局的预测，早期稽留流产和异位妊娠是早期妊娠中的病理类型；早期稽留流产和异位妊娠发病因素复杂，涉及胚胎染色体异常、内分泌异常、细胞凋亡异常、子宫胎盘循环障碍、环境因素等多方面[7]；早期稽留流产和异位妊娠发生部位及声像图表现多种多样，术前诊断较困难，漏诊率及误诊率均较高，成功的妊娠从胚泡着床到胎盘形成是一个复杂的生理过程，这一人类的生理过程离不开血管的重塑，即血管新生及其通透性的改变，在众多血管生成因子的参与下，滋养细胞进入母体子宫，侵入子宫螺旋小动脉，建立母体与胎儿之间的血管网，从而实现母胎之间的营养交换，这一过程中sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2在调节血管生成中发挥着重要作用[8]。

本研究结果显示，早期稽留流产患者及异位妊娠患者血清BNIP3、Ang、VEGF和FGF2水平均低于正常妊娠，早期稽留流产患者的血清BNIP3、Ang、VEGF和FGF2水平均低于异位妊娠，早期稽留流产患者及异位妊娠患者的血清sflt-1水平均高于正常妊娠，早期稽留流产患者的血清sflt-1水平高于异位妊娠患者。妊娠过程中伴随着胚胎的着床与植入，胚胎的绒毛膜绒毛血管与子宫内膜之间血管的建立，胚胎在的生长发育需要丰富的血液供应所需养分[9]，导致早期稽留流主要是产绒毛膜的绒毛血管生成受到抑制；由于患者的输卵管的解剖结构非常特殊性，患者的输卵管肌层及黏膜层非常薄，使输卵管的血供较子宫差，滋养层细胞数量和质量均低于正常妊娠，异位妊娠患者的绒毛膜的绒毛血管生成将受到抑制；Ang对妊娠患者胚胎新生血管的形成、重塑和成熟等发挥重要的调节作用，Ang对血管生成的影响与VEGF有关，Ang与VEGF促使内皮细胞出芽以形成及新的血管分支，保持血管可塑状态[8]。异位妊娠患者或早期稽留流产患者的Ang表达水平降低同时VEGF表达水平降低，这种结果导致在胚胎种植区内不能形成有效的血管网，进而不能为胚胎的发育提供足够的血液供应；VEGF是作用于血管内皮细胞并促进其有丝分裂最强有力的血管生成因子，VEGF在刺激新生血管发生及生长、维持血管壁的完整性与通透性等方面具有重要作用[10]。BNIP3属于非典型Bcl2同源物，属于促凋亡蛋白，依赖于缺氧参与细胞凋亡、自噬和线粒体清除过程，异位妊娠患者或者早期稽留流产的绒毛组织中BNIP3蛋白表达下降，提示BNIP3在低氧诱导自噬途径中具有重要作用，其含量的变化可影响滋养层细胞的生存结局，进而导致异位妊娠患者或者早期稽留流产的发生[11]。sflt-1是一种具有酪氨酸激酶活性的糖蛋白，sflt-1是VEGF的受体，对血管内皮生长因子VEGF有极强的抑制作用，可与VEGF结合使其丧失活性；sflt-1水平如果显著升高，则会导致sflt-1与VEGF的亲和力增强，降低产妇血清中VEGF水平，抑制产妇胎盘中血管的形成，最终会对早期胎盘的发育造成影响，破坏内皮细胞完整性，诱导细胞凋亡，促进异位妊娠患者或者早期稽留流产的发生[12]。FGF2是一种血管形成因子，具有促细胞增殖作用，能促进血管生成，对胶原合成、毛细血管基底膜降解等均有促进作用，对胚胎发育、器官分化和伤口愈合等均有促进作用，FGF2蛋白表达下降，可能通过影响滋养层细胞的侵袭、迁移及血管生成，异位妊娠患者滋养层细胞发育欠佳，参与胎功能障碍及稽留流产的发生发展[13]。对比结果发现，sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2联合检测对早期稽留流产及异位妊娠诊断符合率均高于单项检测，虽然sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2均为判断早期稽留流产患者及异位妊娠的有效指标，但单独检测某一项指标测定并不足以对早期稽留流产患者及异位妊娠进行确诊，必须进行联合检测才可有效弥补单项诊断不足，显著提高诊断效果，为早期稽留流产患者及异位妊娠临床诊断及治疗提供科学依据。

综上所述，血清sflt-1在早期异位妊娠及稽留流产含量明显升高，血清BNIP3、Ang、VEGF和FGF2在早期异位妊娠及稽留流产含量明降低，联合测定血清sflt-1、BNIP3、Ang、VEGF和FGF2可提高异位妊娠及早期稽留流产的诊断符合率，值得临床推广借鉴。