牛冷冻精液人工授精技术要点

欧阳仕春

（西盟县农业综合执法大队，云南西盟 665700）

牛冷冻精液人工授精技术是牛繁殖配种常用的成熟技术，人工输精人员技术水平是影响牛人工授精妊娠率的主要因素。近年来，牛冷冻精液人工授精技术作为一项低成本、高效益的实用技术，在畜牧业生产中发挥着越来越重要的作用。根据省、市畜禽改良工作要求，西盟县于2014年开始免费推广牛冷冻精液人工授精技术，目前该技术已普及到全县5镇2乡，受胎率在85%以上。

1 现 状

1.1 基础生产情况

截至2019年12月，西盟县建成牛场9个，牛存栏17 642头，出栏6395头，能繁母牛6554头，当年生仔畜3932头；建有冻精液供应站1个，乡（镇）建有牛冷冻精液人工授精输配点2个，培养人工授精技术骨干64人。县级设有品种改良站1个，为乡（镇）人工授精输配点提供液氮、冻精库房1间，配有整套人工授精所需器械。

1.2 牛冷冻精液人工授精成果

西盟县辖5镇2乡36个村民委员会3个社区367个村民小组，2014年开始免费推广牛冷冻精液人工授精技术，主要推广西门塔尔、短角牛、云岭黄牛等优良品种。目前该技术已普及到全县5镇2乡，共输配发情母牛2547头次，产杂交犊牛2280头，受胎率在85%以上。

2 冷冻精液的贮存和运输

冷冻精液应保存在保温效果良好的液氮罐中，并保证所有精液浸在液氮中，每周检查1次液氮罐，如发现液氮消耗显著增加，或容器外壳挂霜，应及时更换容器。液氮不足总容量的1/3应及时补充，防止因缺少液氮而使温度回升导致精子死亡。液氮和冻精的液氮罐应放在阴凉避光处，避免阳光直射和接触挥发性气体。移动和运输液氮和冻精时应轻拿轻放，不得倾斜，以免液氮溢出，严禁用任何物品将罐口封严。提取冷冻精液时精液在罐口的空气中停留的时间越短越好，时间不得超过10 s。

3 技术要点

3.1 掌握母牛生殖规律

黄牛8～16月龄性成熟（初情期），发情周期18～23 d，平均21 d，怀孕期282 d；水牛13～24月龄性成熟（初情期），怀孕期305 d。

3.2 配种母牛壮膘

配种期到来之前，适龄母牛应具有中等体况。体况较差的牛可适当调整饲料配比，增加营养和补食次数、并延长放牧时间、割草喂牛，促使母牛发情排卵。平时要注意营养平衡，防止因蛋白质和能量饲料摄入过多造成母牛过度肥胖，影响配种质量。

3.3 掌握母牛发情症状

发情是母牛人工授精的前提，接受爬跨是母牛发情的标志。母牛发情时会出现一系列的发情症状，根据症状来进行准确的发情鉴定是能否全配全准的关键，其发情表现为4个阶段。

3.3.1 发情前期

母牛精神不安、尿频、爬跨公牛、阴道湿润呈粉红色、外阴部稍有肿胀。

3.3.2 发情盛期

阴门明显肿胀、黏液增多呈鸡蛋清样、子宫颈外周松弛，主动举尾拱腰稳稳当当地接受试情公牛的爬跨，愿意交配。

3.3.3 发情后期

外阴肿胀开始消失、黏液变稠混浊，试情公牛仍追随，但母牛不让接近。

3.3.4 发情末期

发情症状完全消失、黏液呈黄色块状，试情公牛已不跟随母牛。

3.4 适时输精

3.4.1 准确的发情观察

发情是母牛卵巢卵泡发育的外在表现，一般情况下，母牛发情后12～16 h排卵，可以在母牛表现精神平稳，发情母牛不让试情公牛爬跨后12～18h开始输精。

3.4.2 准确掌握输精时间

母牛发情持续时间为4～18 h，排卵时间在发情结束后10～12 h，因此，输精的最佳时间应在母牛发情后的10～12 h（外阴部肿胀开始消失，由阴道流出的黏液变黏稠）。为确保受胎率，可在母牛发情接受爬跨后8～12 h进行第一次输精，间隔8～12 h进行第二次输精。一般来说，年老体弱的母牛发情持续期较短，排卵较早，配种时间要适当提早。青年母牛发情持续期较长，排卵较晚，配种时间要适当延迟。群众常说“老配早，少配晚，不老不少配中间”就是这个道理。

3.4.3 准确掌握输精部位

牛的适宜输精部位是子宫体，人工授精时可将精液输送到子宫体部位，以保证推出的精液流入2个子宫角内。如果输精时间较晚（如直肠触诊卵泡已经排卵），则可以将精液输到排卵卵巢侧的子宫角内。

3.5 直肠把握输精法

3.5.1 人工输精前的准备

（1）输精器械的准备。输精枪、消毒输精外套管、直肠检查塑料长臂手套、镊子和剪刀。

（2）发情牛保定与消毒。将输精适期的母牛牵（赶）入配种保定架内，保定好后用栓尾绳将尾巴吊高系于一侧或专人拉住牛尾，用清洁温水把外阴周围洗干净，再用0.1%的高锰酸钾溶液清洗消毒或用酒精棉球消毒母牛外阴。

（3）输精技术人员的准备。穿戴好工作服，将双手指甲剪短并磨光，一只手戴上长臂手套，涂上润滑剂（清水、肥皂或专用润滑剂），另一只手可戴上一次性手套。

（4）冷冻精液的解冻。先准备一盆37～38 ℃恒温水，将细管冻精从液氮中迅速取出后手拿细管上端（封装精液后的封口）立即放入37～38 ℃温水中并轻缓游动10 s使管壁受热均衡后取出。

（5）精液细管装枪。解冻后，取出精液并用消毒卫生纸擦干细管外壁水分，然后用酒精灯火焰或者75%酒精消毒好的细管剪（剪刀）距细管封口端1.2～1.5 cm处剪去封口，将棉塞端平行装入输精枪中，注意装枪前应把输精钢芯退到比细管稍长的位置，再将装有精液细管的输精枪装入输精外套管内，剪口端应与输精外套管紧密连接，防止精液推出后回流到输精外套管内，在进入母牛生殖道前应避免任何污染。

3.5.2 输精

（1）输精枪插入和定位。一律采用直肠把握输精法，输精人员先拎起母牛尾巴下端将尾巴根抬起，轻轻触摸刺激肛门，使肛门括约肌松弛；然后将五指并拢呈锥形缓缓插入直肠内（应避免与努责的直肠蠕动相反方向移动），清除直肠浅部的粪便，用卫生纸擦拭母牛外阴；臂膀用力往下按压使阴门张开（或助手将阴门掰开），另一只手持输精器（枪），以35°～45°（避开尿道口）自阴门作斜上方缓缓插入阴道，进入阴道外口后改为水平或向下方插入阴道内。

（2）输精枪通过子宫颈。当输精枪头插到外子宫颈口时，顶破保护膜，将直肠中手指向子宫口或下方移动，用食指、中指、无名指和小指将子宫颈托起，掌心向上、小指向后，握住子宫颈（8 cm），但防止紧握；左右手协同配合，使输精枪前端搭在小指上，引导枪头插入外子宫颈口内，使输精器越过子宫颈管皱襞，到达子宫颈管中央部时，握子宫颈的手逐渐往前推进，食指在内子宫颈口位置，指头相互配合把握好子宫颈并左右手配合将输精枪头部插入到子宫颈管深部5～6 cm（子宫颈管深部注入法）或子宫体分叉处（子宫内注入法）以保证推出的精液可注入2个子宫角内。如果输精时间较晚（如直肠触诊卵泡已经排卵），则可以将精液输到排卵卵巢侧的子宫角内，以保证到达授精部位的有效精子数。

（3）注入精液。确认输精器已进入子宫颈管深部（5～6 cm）或子宫体分叉处（输精枪应稍向后退出一点）向前推动输精枪钢芯，缓慢注入精液（子宫颈管深部注入法）或注入到子宫体分叉处（子宫内注入法），也可注入到有卵泡发育一侧子宫角内或两个子宫角内，每角各一半（用于超排后输精）；注入后，为了防止精子的逆流，用直肠里的手继续把握子宫颈管30 s至1 min，再缓慢地将输精枪撤出，并将子宫颈稍向上提动（特别是子宫颈开口较大的母牛）。取出输精枪后，应观察输精枪外套管，检查黏附的黏液和输精枪前端是否有血迹等情况。

（4）记录。输精完成后应及时、详细记录配种情况，如牛编号、胎次、上次产犊时间、发情时间、配种时间、配种次数、精液用量、配种人员、公牛精液等信息。

3.6 加强营养管理

母牛配种后1～2 h，不要剧烈运动，尽量避免饮水或吃食过饱。对妊娠牛，需改善饲养条件，保证母体与胎儿正常发育，配种后15 d内夜间补料，同时加喂麸皮1～1.5 kg，并供给含有少量食盐的清洁饮水，促进受精卵着床。母牛怀孕期间，喂给含蛋白质、维生素和矿物质丰富的饲料，以适应母牛生长以及胎儿、胎盘、子宫体发育的需要。围产前期母牛应补充低钾、低钙饲料，减少产前和产后乳房水肿，还应该提供足量的维生素A、维生素D、维生素E（也可肌内注射），以防胎衣不下。严禁投喂发霉、变质、冰冻、有毒、酸度过大或有强烈刺激性的饲料，以防肠炎、流产、弱胎或死胎。牛舍环境要安静，防止因过度惊吓、挤撞、滑跌、鞭打或打架等引起流产。