血清中LN、CIV、PIIIP和HA应用于肝纤维化及肝硬化患者诊断的临床研究

黄祥磊

（徐州市中心医院，江苏 徐州 221006）

0 引言

肝纤维化是指各种疾病引起的肝组织异常增生，导致肝细胞外基质过度沉淀的病理过程。肝硬化是指由一个或多个原因引起的肝损伤，是进行性的。肝纤维化是许多慢性肝病的共同病理过程，尚未被认为是一种独立的疾病，肝硬化是一种常见的慢性肝病，可以看作是一种独立的疾病[1]。肝纤维化是可抵抗的，而肝硬化是肝纤维化的进一步发展，是各种肝病的晚期表现，通过快速有效的治疗可以早期逆转，但中晚期逆转率很低[2]。对于肝纤维化及肝硬化患者目前的治疗目的主要是保肝治疗，暂时还没有找到能够彻底将其根治的有效方法。目前，肝纤维化及肝硬化的诊断方法包括病理学、影像学和血清学三种诊断方法，但因为病理诊断患者的接受度较低，不能反复取样动态检测，还有肝癌穿刺的盲目性、肝脏病变的异质性等诸多缺点。影像学采用B超和CT检测，由于影像学的局限性，一旦发现肝纤维化则为晚期。因此，肝纤维化的血清学诊断方法越来越受到重视[3]。为了分析探讨血清中LN、CIV、PIIIP和HA应用于肝纤维化及肝硬化患者诊断的临床研究，本次研究报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究选取我院2020年慢性肝病检测者1200例与健康体检人员100例为观察对象，入选标准：①所有病例均符合接受血清学检测诊断标准；②患者均自愿接受治疗，且患者家属全部知情，并与我院签署同意书；③患者均无精神异常者，听力完好，思维逻辑正常；④患者病历本齐全。其中1200例肝纤维化及肝硬化患者中，男846例，女354例，年龄20～80岁，平均（40.20±3.11）岁；健康体检者100例中，男55例，女40例，年龄21～79岁，平均（43.50±1.14）岁。两组患者的基本资料差异无统计学意义（P>0.05），有可比性。

1.2 方法

对所有受检人员均进行LN、CIV、PIIIP和HA指标检测，采用我院深圳新产业化学发光仪MAGLUMI4000进行血清检测，在检查前3d内，保持饮食清淡，禁止过于辛辣的食物，对所有病例进行静脉血液取样，抽取静脉血4mL，将血清分离后放置于冷藏室进行保存，冷藏室温度为-20℃左右，然后采用化学发光法进行血清LN、CIV、PIIIP和HA指标检测，在检测过程中严格遵循试剂说明书进行操作。

1.3 观察指标

①将所有受检人员的LN、CIV、PIIIP和HA指标检测结果进行比较；②对于肝纤维化及肝硬化患者的单项阳性检测率进行统计总结。

1.4 统计学方法

用SPSS 20.0软件对所统计的研究数据进行处理和分析，计量资料用均数±标准差（）表示，采用t检验，计数资料用率（%）表示，采用χ2检验，如P<0.05，则说明差异有统计学有意义。

2 结果

2.1 LN、CIV、PIIIP和HA指标检测结果

将所有受检人员的LN、CIV、PIIIP和HA指标检测结果进行比较，健康体检者的LN、CIV、PIIIP和HA指标与轻度肝纤维化及肝硬化患者之间差别无显著性，但与中度肝纤维化及肝硬化患者、重度肝纤维化及肝硬化患者之间有明显差异，数据对比差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 所有受检人员的LN、CIV、PIIIP和HA指标检测结果（,ng/mL）

表1 所有受检人员的LN、CIV、PIIIP和HA指标检测结果（,ng/mL）

2.2 肝纤维化及肝硬化患者的单项阳性检测率统计

对于肝纤维化及肝硬化患者的单项阳性检测率进行统计总结发现，一共检测出阳性患者350例，随着患者的病情加重，其血清检测指标的阳性率也会逐渐增加。见表2。

表2 肝纤维化及肝硬化患者的单项阳性检测率统计[n(%)]

3 讨论

肝纤维化是肝硬化的早期病理阶段，是肝脏慢性损伤时的细胞外基质，有很多种肝细胞（PFF细胞、Kupffer细胞、窦周内皮细胞）和肝外血小板、淋巴细胞、中性粒细胞等参与了这一过程，活性氧（ROS）、一系列细胞因子和纤维蛋白原的释放引起炎症细胞浸润和炎症，静息期星状细胞（HSCs）被一系列细胞因子激活、增殖并转化为肌成纤维样细胞，如转化生长因子-β（TGF-β）、血小板源性生长因子（PDGF）、内皮素（ET）、成纤维细胞生长因子（FGF）、结缔组织生长因子（CTGF）、瘦素等[4]。这些细胞因子都通过了相应的途径，如Smads信号途径、丝裂原活化蛋白激酶途径（Ras/ERK途径）、P38通路、JNK/sh-pk通路、PI-3K通路。靶细胞的生物学反应是通过JAK/STAT通路、NF-KB信号通路、PPAR通路和JAK/STAT通路的作用产生的[5]。单个细胞因子可以激活多种信号转导途径，单个信号转导途径可以被多种细胞因子刺激，不同路径之间存在着多种相互作用，形成了一个复杂的信号调节网络，使得组织更加灵活，细胞外基质（ECM）的合成和分泌增加，ECM的合成和释放也增加大量的基质蛋白抑制剂，降低了胶原酶等蛋白酶的活性与ECM的降解，最终导致ECM的降解，导致ECM积聚和肝纤维化、肝硬化。肝纤维化早发现、早诊断、早治疗意义重大，血清肝纤维化四项指标的联合检测是无创性诊断肝纤维化的良好诊断指标，目前，可以反映肝纤维化的指标很多，但是在临床应用上LN、CIV、PIIIP和HA的使用较多[6]。

血清肝纤维化指标可以反映肝纤维化的不同方面，其中，HA和PIIIP四项指标的升高能较好地反映肝纤维化的各个方面，其活动性、敏感性和特异性均高于90%。有研究表明，LN、CIV、PIIIP和HA的变化水平与肝功能有关，肝纤维化程度与肝损伤程度密切相关，肝纤维化的非创伤性诊断具有重要意义[7]。作为肝脏纤维化的机制是不同的，HA是一种多肽糖，是肝细胞外基质的主要成分之一，肝细胞外基质可被肝窦内皮细胞细分肝细胞损伤，会影响内皮细胞的功能与HA含量的增加，肝脏受损时，HA合成增加并降解减少，相关研究报道显示，从肝炎到肝僵硬过程中，患者的血清HA含量在化疗过程中逐渐升高，对肝硬化的诊断是准确的灵敏度为86.89%。CIV是肝内皮细胞与肝纤维化的功能性基底膜，基底膜的形成和破坏增加，会导致血清CIV水平升高，研究表明CIV是肝损伤最早增加的原纤维，是胶原蛋白合成的一个指标，是检测肝纤维化进展的重要方法，也是一个很好的指标，因此CIV可作为早期肝纤维化的指标，它能灵敏地反映肝炎发展为肝硬化的过程和程度[8]。LN是在肝纤维中形成的主要基质是膜糖蛋白，在这个过程中，LN沉积在DISSE空间，形成完整的内皮细胞基底，实验研究发现，它与肝纤维化的形成有重要关系，血清LN的水平与CIV、HA水平平行，正常肝组织中LN含量很低，主要分布在肝胆管和血液中，血管壁和淋巴管壁是基底膜的重要组成部分[9]。LN是肝纤维化最常见的病因，血清中的含量随着合成量的增加而增加。LN和CIV一起形成肝基，基底膜形成纤维隔膜，参与肝窦毛细血管化，使肝窦腔变窄，导致肝纤维化肝内血流阻力的增加和门脉高压的形成可作为肝纤维化的发病机制，因此，LN和CIV可以作为早期肝硬化的诊断指标。而细胞外基质的基本结构是胶原，胶原在肝纤维化中表现良好胞质的增殖和活化以及Ⅲ型胶原合成的增加会导致血清PIIIP水平血压的升高[10]。本次研究报告显示，将所有受检人员的LN、CIV、PIIIP和HA指标检测结果进行比较，健康体检者的LN、CIV、PIIIP和HA指标与轻度肝纤维化及肝硬化患者之间差别无显著性，但与中度肝纤维化及肝硬化患者、重度肝纤维化及肝硬化患者之间有明显差异，数据对比差异有统计学意义（P<0.05）；对于肝纤维化及肝硬化患者的单项阳性检测率进行统计总结发现，一共检测出阳性患者350例，随着患者的病情加重，其血清检测指标的阳性率也会逐渐增加。说明肝纤维化及肝硬化患者的血清LN、CIV、PIIIP和HA指标变化与患者的病情严重程度与病情变化趋势有密切关系，可以作为检测患者病情进展的有效参考指标，可以明显将患者病情在不同时间的纤维变化状况以及肝功能损伤状况反映出来，将患者的临床症状、过往病史、生命体征等各方面指标进行结合，降低病情误诊率与漏诊率，对病情诊断治疗有重要意义。

综上所述，血清中LN、CIV、PIIIP和HA应用于肝纤维化及肝硬化患者的临床诊断中，可以有效辅助患者病情的鉴别与诊断，血清LN、CIV、PIIIP会随着患者的病情加重，其血清检测指标的阳性率也会逐渐增加，动态监测血清水平变化对于患者病情评估与预测具有重要意义，值得推广与应用于肝纤维化及肝硬化患者的临床诊断中。