自身免疫性肝炎患者血清IL-33水平变化及其临床意义*

段树鹏 侯丽娟 王宏伟 宋新文

河南省新乡市新乡医学院第一附属医院感染科 (河南 新乡， 453000)

自身免疫性肝炎(AIH)是在遗传易感性的基础上由免疫炎性反应等因素介导的慢性免疫性炎性疾病[1]，免疫细胞及炎性因子可导致肝脏内实质细胞的破坏及炎性损伤，组织病理学也以界面性肝炎和无病毒性肝炎为显著特征[2]。AIH起病较为隐匿，可不表现为任何临床症状，部分患者仅仅在血清中检测出抗SSA抗体、抗SSB抗体、ANA阳性及免疫球蛋白G(IgG)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、ALT、AST等指标异常升高[3，4]，然而，部分AIH患者也可以急性肝衰竭为首要临床表现[5]。本课题组前期研究结果显示[4]，AIH患者血清中白细胞介素(IL)-17、TNF-α等炎症因子水平显著升高，且在一定程度上反映肝脏损伤程度。IL-33是近年来发现属于IL-1家族中的一种新型炎症因子，参与了多种免疫性炎性疾病，如原发性胆汁性肝硬化、系统性红斑狼疮等制[6，7]。目前国内关于IL-33和AIH相关性研究报道较少，本课题组在前期研究的基础上，进一步探讨AIH患者血清中IL-33表达水平及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2017年1月至2019年6月于新乡医学院第一附属医院感染科住院的85例初次诊断为AIH患者(AIH组)作为研究对象，另40例健康体检人群作为对照组，AIH组和对照组基本资料见表1。所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：①AIH诊断符合2008年IAIHGAA提出的AIH简化诊断积分系统，积分≥7分[8]；②临床资料完整；排除标准：①病毒性、酒精性肝炎、遗传代谢性肝病、肝脏肿瘤患者；②合并严重心脑血管病、恶性肿瘤、免疫性疾病、结缔组织病者；③孕妇及哺乳期妇女；④合并其他疾病，近3月内有采用糖皮质激素或免疫抑制剂治疗者。

1.3 观察指标及方法 所有研究对象均空腹抽取外周静脉血5 ml，离心并获取上层血清备用。检测指标：①生化指标ALT、AST、总胆红素(TBil)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-GT由我院检验科采用全自动生化检测仪进行统一检测，免疫球蛋白A(IgA)、IgG和IgM由我院检验科采用散射比浊法检测，相关指标在AIH患者获得临床缓解后同时复测。②血清IL-33水平采用ELISA试剂盒检测，试剂盒购买自泉州市睿信生物科技有限公司(中国)。当AIH患者经过治疗获得临床缓解[9]，再次检测AIH患者血清IL-33水平。③41例AIH患者均获得肝脏组织学标本。经B超引导下行肝脏穿刺活检，肝脏组织HE染色后进行组织炎症活动指数评分(HAI)，HAI分数越高，说明肝脏组织炎症越明显[10]。

2 结果

2.1 两组人群一般资料比较 见表1。

表1 两组人群一般资料比较

2.2 两组人群血清IL-33表达水平的比较 见表2。

表2 两组人群血清IL-33表达 (pg/ml)

2.3 AIH组患者血清IL-33和生化免疫指标的相关性分析 AIH组患者活动期血清IL-33水平与ALT、AST、TBil、γ-GT均呈显著正相关性，而与ALP、IgA、IgG和IgM无明显相关性；AIH组患者缓解期血清IL-33水平与ALT、AST、TBil、ALP、γ-GT、IgA、IgG和IgM均无明显相关性，见表3。

表3 AIH组患者血清IL-33水平与生化及免疫指标的相关性

2.4 AIH组患者活动期血清IL-33与HAI的相关性 41例AIH患者行肝脏穿刺，肝脏组织HAI评分为16.14±2.05，其血清IL-33水平为(125.45±20.59)pg/ml，结果显示，AIH患者血清IL-33水平与HAI评分呈显著正相关性(r=0.843，P<0.05)。

2.5 IL-33诊断AIH的临床效能 将所有研究对象血清IL-33数值作为检验变量，AIH组患者活动期血清IL-33水平作为状态变量，绘制ROC曲线图发现，血清IL-33诊断AIH的曲线下面积为0.879(95%CI0.802～0.923)，当截断值为135.12 pg/ml时，敏感度和特异度分别为84.16%和92.35%，结果见图1。

图1 血清IL-33诊断AIH的ROC曲线图

3 讨论

AIH为难治性肝炎，临床上以女性患者多见，具体发病机制尚不清楚，但近年来研究多认为AIH属于一种自身免疫性疾病，针对肝细胞发生的免疫炎性反应介导肝脏实质性炎症，但也有报道发现部分药物如米诺环素、降脂药物等也有诱发AIH的可能[11]，因此遗传易感性也与AIH发病机制有关[12]。IL-33属于IL-1家族中的一种促炎因子，通过与受体相互作用后活化MyD88[13]和NF-κB[14]等信号通路而参与多种免疫性炎症疾病的发病机制[6，7]。原发性胆汁性肝硬化和AIH类似，均属于自身免疫性肝病，研究发现原发性胆汁性肝硬化患者血清中IL-33表达水平显著升高，且与ALP和Child-Pugh评分均呈显著正相关性[6]。但目前关于国内AIH患者血清IL-33表达水平研究报道较少，本研究检测了AIH患者血清中IL-33表达水平及其肝脏生化免疫指标，尤其是肝内炎症活动HAI评分的相关性，进一步分析IL-33是否能作为AIH的血清学标志物。

本研究结果显示，AIH患者活动期血清中IL-33水平显著高于缓解期及对照组，同时AIH患者缓解期血清IL-33水平也显著高于对照组，提示血清IL-33水平对判断AIH病情活动性具有重要意义。Abe等[15]不仅证实AIH患者血清中IL-33水平显著升高，且免疫组化结果显示肝脏组织中IL-33表达水平在活动期显著升高，当经过治疗后在缓解期显著下降，这与我们的结果基本一致。通过进一步分析血清IL-33水平与肝脏生化免疫功能指标的相关性后发现，AIH患者血清IL-33水平升高与患者的肝脏损伤的严重程度密切相关。对其中41例AIH患者的肝脏组织切片进行HAI评分后发现，血清IL-33水平与HAI评分也呈显著正相关性(r=0.843)，提示血清IL-33水平也能反映AIH患者肝脏炎症损伤的严重程度。目前关于IL-33如何参与AIH的发病机制的相关报道较少，仅仅Liang等[16]在AIH小鼠模型中证实，IL-33能通过促进IL-17促炎因子大量释放而增加肝脏的炎症损伤，在采用抗IL-33抗体预处理后能逆转AIH小鼠模型肝脏的损伤情况。此外，我们课题组前期研究也证实IL-17在AIH的发病机制中的重要作用[4]。

由于部分AIH患者起病较为隐匿，因此，在临床上亟需寻找一种敏感度和特异度均较高的血清学标志物，我们研究发现AIH患者血清中IL-33表达水平显著升高，而高水平的IL-33是其成为AIH血清学标志物的基础，我们采用ROC曲线分析后发现，血清IL-33诊断AIH的曲线下面积为0.879，敏感度和特异度分别为84.16%和92.35%，说明血清IL-33可作为诊断AIH的一项血清标志物。日后也需要大样本量的临床研究来证实我们的结果，也需要开展前瞻性队列研究进一步探讨血清IL-33高表达与AIH患者预后的关系。