刘宝生,胡瑞瑞,白鹏华,李建成
(1.天津市植物保护研究所,天津 300384;2.河北省农林科学院植物保护研究所,河北 保定 071000)
桃是我国重要的经济水果,栽种面积占全世界的一半左右,产量居世界第一[1]。近年来,大量桃粉蚜(Hyalopterus amygdali Blanchard)在套袋桃园内发生,且有逐年增长的趋势,部分地区蚜虫危害程度仅次于甚至接近蛀果类害虫[2]。
桃粉蚜又名桃粉大尾蚜,属同翅目(Homoptera)蚜科(Aphididae)大尾蚜属(Hyaloptera Koch)[3],是天津桃园普遍发生的一种重要害虫。桃粉蚜的寄主植物因季节不同而不同,早春和越冬寄主除桃树外,还有梨树、杏树、李子树等果树;夏、秋寄主为禾本科杂草[4]。无翅胎生雌蚜群集于嫩叶背面和嫩梢下,以吸食汁液产生危害;且常分泌可引起煤污病发生的白色蜜露,严重时使枝叶呈暗黑色,受桃粉蚜危害后的叶片向背对合纵卷,影响植株的生长和果实产量[5]。
目前,国内外对蚜虫的防治还是主要依靠化学方法,常用的化学杀虫剂有氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、有机磷类和新烟碱类,包含触杀性和内吸性两类[6]。但由于该方法的不合理使用,使害虫不断对农药产生抗性,且对环境和人类健康造成严重损害。所以,近年来以植物源杀虫剂为主的生物防治方法受到普遍重视。具有抗重要作物害虫活性化合物的植物有桃科、樟科、芸香科、唇形科、菊科、伞形科、柏科、姜科、胡椒科、百合科、夹竹桃科、茄科和麻豆科[7-9]。一些具有农药活性的植物化合物已被成功分离并制成产品,包括印楝素和除虫菊酯[10,11]。已有研究表明苍耳(Xanthium sibiricum)、花椒(Zanthoxylum bungeanum)等植物提取物对萝卜蚜(Lipaphis erysimi)和桃蚜(Myzus persicae)有显著的拒食作用[12];核桃(Juglans regia)青皮提取物对小麦蚜虫具有较好的毒杀作用和较高的拒食活性[13];竹子提取物对蚜虫也有良好的触杀和拒食作用[14];林开春[15]的研究结果表明蛇床子(Cnidium monnieri)提取物对蚜虫和茶尺蠖均有较好的触杀效果。
麻黄和防风提取物对桃粉蚜的防治效果研究尚属空白,目前国内只有3个专利批准了将其粉剂以一定比例和其它成分复配作为杀虫剂防治蚜虫[16-18]。因此,本试验在前人研究的基础上,选取蛇床子、苍耳、麻黄和防风为供试材料,比较了4种中药材提取物对桃粉蚜的触杀效果,为开发低毒高效的植物源杀虫剂提供依据。
桃粉蚜(Hyalopterus amygdali)收集于天津市农业科学院桃树上。4种中药材均购于药店,供试中药材的具体信息见表1。
表1 供试中药植物
1.2.1 中药材粗提物的制备 将自然风干的4种中药材粉碎,过100目筛,称取20 g,加80%乙醇200 mL,28℃、150 r/min恒温振荡提取12 h,再经超声波提取25 min,过滤。滤液置于4℃冰箱中保存备用。
采用梯度稀释法将4种中药材粗提物分别稀释为100.0、10.0、1.0、0.1 mg/mL。
1.2.2 触杀活性测定 将新鲜的带有蚜虫的桃叶带回实验室,除去死蚜及过大和过小的蚜虫,保留个体一致的中等活蚜,使每片桃叶上的蚜虫数量保持在40头左右,并统计具体虫口数量。采用浸虫浸液法将有蚜虫的桃叶一起浸入提取液中,5 s后取出,自然晾干,蒸馏水处理作为对照组。每处理3个重复。晾干后,用浸水棉球裹住桃叶基部,使叶片保持新鲜,放入垫有滤纸的培养皿(Φ=9 cm)中进行观察。
1.2.3 毒力测定 将有蚜虫的桃叶分别浸入浓度为100.0、10.0、1.0、0.1 mg/mL的提取液中,进行毒力测定。
死亡率(%)=死亡虫数/供试虫数×100;
校正死亡率(%)=(处理死亡率-对照死亡率)/(1-对照死亡率)×100。
采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,用Duncan’s新复极差法(DMRT)进行差异显著性分析,并计算4种中药材提取物的毒力回归方程、致死中浓度(LC50)及95%置信区间。
由图1可知,4种中药材提取物原液对桃粉蚜均有不同程度的触杀活性,且校正死亡率随接触时间的延长而升高。其中,蛇床子和苍耳对桃粉蚜的触杀活性较强,在接触12 h时校正死亡率即可达75.00%以上。防风提取物在12 h和24 h的校正死亡率分别为46.06%和88.71%,增幅为92.60%。麻黄提取物的校正死亡率在两个触杀时间段内增加幅度较一致。4种中药材提取物在触杀时间为48 h的校正死亡率均接近100%。
由表2可知,不同浓度的4种中药提取物对桃粉蚜均有不同程度的触杀活性,且校正死亡率随提取物浓度的升高而提高。当浓度为10.0 mg/mL时,4种中药材提取物的24 h校正死亡率均在50%以上;当浓度为1.0 mg/mL时,只有麻黄提取物的48 h校正死亡率低于50%。总的来说,4种中药材提取物24 h和48 h的校正死亡率均为蛇床子>苍耳>防风>麻黄。方差分析表明,除了蛇麻子24 h的校正死亡率外,各提取物不同浓度24 h和48 h的校正死亡率均存在显著差异。
图1 4种中药材提取物对桃粉蚜的触杀活性
表2 不同浓度提取物对桃粉蚜的触杀活性
由表3可知,24 h对桃粉蚜毒力最强的是蛇床子提取物,LC50值为0.346 mg/mL;苍耳和防风提取物对桃粉蚜的毒力次之且二者的LC50值较为接近;麻黄提取物对桃粉蚜的毒力最弱,LC50值为1.278 mg/mL。48 h对桃粉蚜毒力最强的是苍耳提取物,LC50值为3.300×10-3mg/mL;蛇床子和防风提取物对桃粉蚜的毒力相当,LC50值分别为4.743×10-3mg/mL和4.767×10-3mg/mL。
表3 4种中药提取物对桃粉蚜的毒力
蛇床子、苍耳、防风和麻黄是常用的传统中药,主要含有苷类、醇类、酯类、香豆素类、多糖类、有机酸类、聚乙炔类等成分[19-22]。蛇床子可以防治多种蚜虫,其主要成分蛇床子素已被开发为生物农药应用于防治包括蚜虫在内的多种害虫[23]。多数菊科类植物含有丰富的具有杀虫作用的生物碱,其中苍耳对蚜虫、菜青虫、红蜘蛛等多种害虫具有显著的防治及杀灭作用[24,25]。防风提取物对斜纹夜蛾的生物活性有一定的影响[26]。
本试验是在室内条件下进行,可以保证提取药液与供试蚜虫充分接触,但与田间的实际环境条件有一定差异。因此,4种中药材提取物在田间对桃粉蚜的作用效果还需进一步研究。同一种植物在不同溶剂和萃取剂中所获得的提取物的种类和数量可能会有差异[27],加之本试验中应用的是粗提物,若要在田间进行药效试验,还有待进一步对其活性成分进行分离纯化。另外,为了降低生产成本,使小农户可以负担并采用安全的防控产品,继续探索利用廉价溶剂加工和提取植物杀虫剂成为了一个亟需解决的科学问题[28]。
4种中药材提取物原液对桃粉蚜均有不同程度的触杀活性,且桃粉蚜的校正死亡率随着接触时间的延长而升高;4种提取物对桃粉蚜的校正死亡率随提取物浓度的升高而升高,且24 h和48 h的校正死亡率均为蛇床子>苍耳>防风>麻黄;24 h对桃粉蚜毒力最强的是蛇床子,LC50值为0.346 mg/mL,48 h对桃粉蚜毒力最强的是苍耳,LC50值为3.300×10-3mg/mL。