蒲公英饮片质量评价及质量控制分析

王青青 王梦雅

1.江苏省中医院研究院，江苏 南京 210046；2.江苏省中西医结合医院，江苏 南京 210046

蒲公英属于菊科植物，具有利尿通淋、清热解毒和消肿散结的功效。蒲公英饮片在临床上得到广泛应用，为提高蒲公英饮片的质量，本研究对其质量评价及质量控制进行研究分析，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 主要仪器 选择安捷伦科技有限公司生产的高效液项色谱仪，型号为Agilent100、迪马公司生产的色谱柱，型号为ODS，规格为5 μm。梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司生产的电子天平，型号为MS105DU。

1.2 材料 实验用材料选择：甲醇、色谱纯、三乙胺、甲酸、磷酸、磷酸二氢钠、水纯化水、分析纯。实验用对照品为：中国药品生物制品鉴定所提供的咖啡酸。

1.3 方法 根据蒲公英中主要成分咖啡酸水溶性和预实验结果，确定咖啡酸的含量和得膏率作为指标，将加水量、提取次数、提取时间进行正交实验。并对水提工艺的的各项参数进行考察。

按照正交设计方案，称取9份蒲公英原料25 g，加入相应倍量的水，微沸之后回流提取，过滤并摇匀。从中提取5 mL，并通过0.22 μm微孔滤膜过滤，废去初滤液。对照品制备中，同样使用精密测量仪器进行咖啡酸称取，称取量为7.2 mg，放置到50 mL量瓶中，加入甲醇到相应刻度摇匀。精密量取2 mL，放置到10 mL量瓶中，再加入甲醇到刻度，摇匀。经过0.22 μm微孔滤膜过滤，废去初滤液，得到对照品。

2 结果

将咖啡酸的含量作为蒲公英饮片质量检验的指标，对超声状态下和回流状态下两种不同提取方法的蒲公英饮片中咖啡酸含量结果进行分析，得到的结果没有差异性，表明提取方法产生的影响不显著。按照上述方法进行操作之后得到，0.025 mg/mL的溶液，室温放置一段时间，并在2 h、4 h、8 h、16 h和24 h等阶段，分别进行测定和计算，结果证明咖啡酸峰面积RSD为0.2%。证明样品中咖啡酸的含量在24 h之内具有稳定性。按照建立方法，对不同产地的蒲公英药材进行炮制加工，制备成蒲公英饮片之后对含量测定，结果可以看出不同产地蒲公英制备的蒲公英饮片含量具有产一定，基本上在0.017%～0.065%之间，根据测定得到的结果，按照干燥品进行计算，得到咖啡酸的含量不少于0.015%。特征图谱如图1所示。

基于特征成分关联，对特征色谱中各特征成分进行了相关性分析，选择咖啡酸为基准峰，并将其保留时间设定为1，计算特征峰为1～14，相对保留时间分别为0.543、0.823、0.912、0.930、0.965、1.000、1.236、1.392、1.472、1.533、1.947、2.125、2.169、2.717。

2.1 蒲公英饮片质量评价 取材：中药药材产地广泛，不同的生长环境与独特的栽培技术，使不同产地的药材质量会产生一定的差异性。在实际制备和生产蒲公英饮片的过程中，要选择具有代表性的材料进行投料。全覆盖药材产地，要对当地的地理环境可能产生的影响进行分析。中药来源广泛，因为名称而产生混淆的情况时有发生，对此，本研究从纯正蒲公英的产地进行取材，确保品质的稳定性。本研究过程中选择的蒲公英材料来自于我国湖北、四川、河南和甘肃等地，使用DNA条形码技术对蒲公英的品质进行鉴定，从源头进行材料质量把关，测得蒲公英饮片的指标与成分含量均符合我国颁布的《中国药典》的要求，保证投料药材的代表性与广泛性，也保证了标准汤剂合理性和安全性[1]。

操作：本研究中的蒲公英饮片标准汤剂，严格按照国家中药管理总局发布的《规范》中规定的工艺参数和研究数据进行制备。花叶全草类药物头煎使用12倍量水，二煎使用10倍量水。蒲公英饮片的头煎时间为30 min，二煎的时间为20 min。这种操作方法不仅保留蒲公英饮片原汁原味，同时又合理地使用现代化设备，制备出的蒲公英饮片以传统的煎药工艺作为基础，同时提高药物的整体质量水平[2]。

品质：此次研究采用标准化工艺，对蒲公英饮片标准汤剂进行制备，并且测定其中咖啡酸的含量，得到蒲公英饮片标准汤剂物质传递的规律，从整体上把控了蒲公英饮片的质量。指标成分转移率考察结果和指纹图谱具有较高的相似度，考查结果证明对此次研究过程中制备的蒲公英饮片总体质量有均一性和稳定性，研究得到的数据有参考价值。

标准化蒲公英饮片制备和出膏率考察结果更是为后续蒲公英饮片药物大量生产工艺优化提供参考指标，能够有效缩短研发时间，并提高药物整体品质。

2.2 蒲公英饮片质量控制 合理选择提取溶剂：咖啡酸是蒲公英中最为重要的一种成分，根据《中国药典》中对蒲公英的要用价值进行分析中可以看出，咖啡酸成分的含量会影响到蒲公英的价值。而且，在单味药物配方中，蒲公英经过水蒸气提取、浓缩、干燥和制备成饮片，在实验探究的过程中，如果提取溶剂为水，则咖啡酸的含量可能会受到水分的影响而出现含量变化。《中国药典》规定蒲公英饮片中咖啡酸的含量在0.02%以上，本研究得出的蒲公英饮片中咖啡酸含量在0.04%以上，得膏率为20%以上。由此可以看出，合理选择提取溶剂，不仅可以保证蒲公英饮片配方中咖啡酸含量高，又可以确保水溶性成分增多，是一种合理的提取方法[3]。

明确评价工艺指标：根据蒲公英饮片制备领域实验研究可以看出，如果有两项评价指标同时存在，那么在蒲公英饮片质量评定中，主要采用的方法为两项指标加权评价方法。这种评价方法能在两项指标变化趋势不一致的情况下，突显出优越性。但是，在选择工艺指标时，主要是根据以往的工作经验确定的。因为不同的药材在《药典》中有不同的规定，无论是药理活性成分还是总体提取物对于最终产品的药效会产生不同的影响[4]。根据本研究能看出，在实验中没有引入权重概念，主要是因为蒲公英饮片中咖啡酸的含量以总提取物的含量指标变化趋势具有一致性。由此可以看出，本研究所采用的方法是一种有利于提高得膏率的方法，对于蒲公英饮片的质量能起到较好的控制效果。

科学规定咖啡酸含量：根据相关领域的资料研究可以看出，不同产地蒲公英其中含有的咖啡酸的含量会有较大的差异性。一般情况下，蒲公英中的咖啡酸含量会从0.10%～0.36%不等，所以，不同产地的蒲公英饮片作为有原料生产值得的配方中，咖啡酸含量也会参差不齐。制定完善的含量控制标准，是确保蒲公英饮片质量的重要手段。

3 讨论与结论

在本研究中，经过测量得到原材料中咖啡酸含量为0.02%，多批样品测定结果表明咖啡酸的含量均在0.04%以上。制备工艺最终得到蒲公英饮片的咖啡酸含量为0.04%，提取工艺的得到率为36%。所以，从理论上分析，蒲公英饮片和蒲公英原材料中的咖啡酸含量基本持平。实验数据与理论折算有较大的差异性。而且，因为蒲公英中咖啡酸具有溶于水的特性，在高温条件下的正交试验中，具有不稳定性。当温度回流到100摄氏度左右时，也会有其他成分转化成为咖啡酸。根据相关规定可以得出，蒲公英咖啡酸不能低于0.02%，本研究所得到的蒲公英饮片中咖啡酸的含量不低于0.4 mg/g[5-7]。

在研究的过程中，实验虽然严格按照相关标准和规定进行操作，并将水溶剂作为蒲公英饮片的溶剂，在微沸腾状态下提取1 h之后制备得到成品。但是，其中包括咖啡酸在内的酚酸类有效成分仍有不稳定性，并且遇光会分解。本实验制备蒲公英饮片标准汤剂按照《药典》与相关技术要求中规定的工艺参数与数据进行制备，花叶全草类药物头煎加水量为12倍，二煎加水量为10倍，饮片头煎时间为30 min，二煎时间为20 min。这种药物煎煮方法不仅能保留重要汤剂原本的特性，而且也运用了现代煎药设备，制备的蒲公英饮片汤剂基于传统工艺，也实现了工艺优化升级的目的。虽然其中咖啡酸的含量已经超过《中国药典》中关于蒲公英饮片中咖啡酸含量的规定，但是不能完全排除其他成分转化影响。所以，其中是否有其他成分损失，蒲公英饮片配方的实际应用质量仍有待进一步研究[8]。

综上所述，本研究通过实验探究的方法，制备蒲公英饮片，并对其质量进行分析，探讨出合理的蒲公英饮片质量控制办法，为今后相关领域的研究提供参考。