中草药鹿衔草活性成分的提取分离研究进展

2021-01-19 08:20:04尤子情刘知森曹雨希西杨伟东马琳
生物化工 2021年5期
关键词:醋酸乙酯鞣质柱层析

尤子情,刘知森,曹雨希西,杨伟东,马琳

(宝鸡文理学院,陕西宝鸡 721013)

鹿衔草(Pyrola calliantha H.Andres),又名鹿寿茶、鹿蹄草、破血丹、背金牛草等,为鹿蹄草科植物[1],广泛分布于我国江西、安徽、湖南等地[2]。《中华本草》记载,鹿衔草具有补肾、强筋壮骨、祛风除湿及收敛止血等功能[3],常用于治疗肾虚腰痛、风湿麻痹、筋骨萎软及外伤出血等[4]。由于其对心血管系统具有强心、降压和扩血管的作用,近年来引起许多研究人员的关注,关于鹿衔草的研究主要集中在其成分、生物活性以及产品开发上。鹿衔草主要化学成分包括黄酮、酚苷、醌、鞣质和多糖等物质[5],本文对鹿衔草主要化学成分的提取方法进行了总结,以期为鹿衔草的综合利用提供借鉴依据。

1 不同活性物质的提取分离

1.1 黄酮

郑绍军等人[6]采用硅胶柱层析分离,使用氯仿-甲醇梯度洗脱后,进行RP-18分离,再用甲醇-水梯度洗脱后,采用Sephadex LH-20分离纯化,首次从鹿衔草提取得到木犀草素、苜蓿素和山奈酚。蔡蕊等人[7]采用热回流法提取鹿衔草中的总黄酮,发现50%乙醇水溶液的提取效果较好;以1∶25(g∶mL)料液比,超声45 min,处理1次,提取温度80 ℃为提取条件时,超声提取效果最佳;热回流提取法所得总黄酮含量是超声提取法的2.15倍。石娟等人[8]采用70%丙酮水溶液高速破碎提取鹿衔草全草,分别使用氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取,减压蒸馏得到氯仿、醋酸乙酯和正丁醇萃取液,通过分析鉴定出2''-O-没食子酰基金丝桃苷、金丝桃苷、高熊果酚苷等物质。

1.2 酚苷

章 蕊 等 人[9]使 用 Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱成功分离出金丝桃苷、槲皮素-3-O-呋喃阿拉伯糖苷等成分,且分离效果较好,专属性好。王军宪等[10]使用70%丙酮水溶液提取鹿衔草全草,分别使用乙醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取并减压蒸馏得到萃取液,使用Toyopearl HW-40(coarse)进行柱层析分离,收集不同浓度的乙醇洗脱液,使用紫外可见分光光度法、高效液相色谱法、核磁共振、元素分析等方法,鉴定得到高熊果酚苷、肾叶鹿蹄草苷和6'-O-没食子酰基高熊果酚苷等物质。

1.3 醌

潘微薇等人[11]根据实验所得波谱数据以及鹿衔草主要成分的理化性质分析,利用硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析等方法,分离得到邻甲基苯醌。上海中医学院附属曙光医院中草药实验小组[12]通过水煎醇沉法得到邻甲基苯醌,并通过加入二氧化硫还原得到甲基氢醌,通过初步药理试验证明其具有广谱抑菌作用。

1.4 鞣质

蔡蕊等人[13]采用正交设计法,比较了热回流提取法、超声提取法和冷浸提取法提取鹿衔草鞣质的工艺,得出热回流提取法中,以水为溶剂、料液比 1∶8(g∶mL)、提取温度100 ℃、提取3次、每次提取1 h时效果最优;超声提取法中,料液比1∶10(g∶mL)、提取温度70 ℃、提取1次、每次1 h时效果最优;冷浸提取法中,料液比1∶12(g∶mL)、室温浸提2次、每次18 h时效果最优;其中热回流提取法提取含量更高、效率更优。孙文基等人[14]通过乙醇提取法,加入醋酸-醋酸钠缓冲溶液、甲醇进行提取,发现深紫鹿蹄草中鞣质含量最高。

1.5 多糖

高丹丹等人[15]使用95%乙醇回流提取2次,每次2 h,得到鹿衔草粗粉后,使用100 ℃水浴回流3次,每次2 h,得到浓缩液,80%醇沉后离心得到鹿衔草多糖。莫正昌等人[16]使用80%乙醇回流提取3次,每次1.5 h,采用硫酸-苯酚法测定多糖含量为45%。董晶晶等人[17]通过比较水提法、碱提法和酶提法,综合评分得出3种提取方法的多糖得率排序为酶提法>水提法>碱提法。

2 结语

鹿衔草的主要化学成分包括黄酮、酚苷、醌、鞣质和多糖等物质,当前对于黄酮类化合物和酚类化合物的提取分离研究较多,且技术比较成熟,但对于醌类、鞣质和多糖的研究还比较少,工艺也有待进一步优化。鹿衔草具有抗心律不齐、抑制肺炎球菌等作用,只有进一步了解鹿衔草中具体的化学成分及提取方法,才能更好的开展鹿衔草的药理研究。

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