气相色谱法测定蔬菜中有机磷类农药方法优化

□ 谢 茵 新疆伊犁州奎屯市农业农村局

蔬菜是人们生活饮食的必需品，但目前食品安全问题依然比较严重，农药残留是社会各界人士关注的重点。有机磷农药可有效去除蔬菜中病虫害，具有非常广泛的应用。但对人体健康、生态环境等会造成较大危害。开展蔬菜有机磷农药残留检测，是保证蔬菜安全的主要举措。我国对有机磷农药残留量有严格限制，并且其限量逐年降低，对测定的速度、精度、可靠性等提出了更高的要求。基于此，应用气相色谱法测定蔬菜中有机磷类农药就显得尤为必要。

1 测定蔬菜中有机磷类农药的现状和意义

我国有机磷农药使用量非常大，占全球总有机磷农药使用量的1/3，占全国农药总用量的1/2，受多种因素的共同影响，如果有机磷农药污染问题异常严峻，不但会破坏周围的生态环境，而且会给食品安全构成较大的安全隐患。因此，大力发展测定精度高、效率高、针对性强的蔬菜有机磷农药测定方法，对保护生态环境，提升食品安全等皆有重要意义。常用的测定方法有气相色谱法、气质联用法、高效液相色谱法等。其中气相色谱法是目前应用最广泛，操作最便捷的蔬菜有机磷农药测定方法，但在测定过程中，进样口温度、柱箱温度、升温程序等参数指标不同，得到的结果也不相同，甚至存在较大差距。因此，优化气相色谱法测定方法，得到分析有机磷农药的最优条件就有非常重要的现实意义。

2 气相色谱法测定过程分析

2.1 合理选择仪器和试剂

选择GC—2014c 气相色谱仪，由日本岛津提供，同时配备相应的FPD 检测器；DB—1 毛细管，由美国安捷伦公司提供；甲基对硫磷，二嗪磷，亚胺硫磷，杀冥硫磷，伏杀硫磷等标准样品100 mg/L，由当地农业部环境保护科研所提供；丙酮作为液相色谱纯。

2.2 测定方法

处理样品。将选择的蔬菜样品切碎，称取10.0 g 混合均匀，放置到50 mL 离心管中，然后加入25 mL 乙酸乙酯，充分振荡后浸泡2 h，样液经盛有10 g 无水硫酸钠的滤纸过滤之后，放入100 mL 比色管中，再用25 mL乙酸乙酯分3 次加入离心管中，洗脱3次，然后再将滤液合并放入比色管中，放置到旋转蒸发仪中恒温45 ℃，浓缩到1 ～2 mL，再用乙酸乙酯定容到5 mL，在漩涡混合器上充分混匀，并用0.45 μm 滤膜过滤后供气相色谱检测。

配制农药标准溶液。选择具有代表性的有机磷农药甲基对硫磷，二嗪磷，亚胺硫磷，杀冥硫磷，伏杀硫磷等标准样品溶液，其浓度为100 mg/L 1 mL，放入容量为10 mL 的容量瓶中，加入丙酮定容，贮存在—18 ℃冰箱中。再配置混合有机磷农药标准品，选择浓度为10 mg/L 的甲基对硫磷，二嗪磷，亚胺硫磷，杀冥硫磷，伏杀硫磷各0.25 mL 放入10 mL 容量瓶中，用丙酮进行定容，这五种农药的浓度都是0.25 mg/L[1]。

色谱条件。GC—2014c 气相色谱仪，色谱柱大小为30 mm×0.25 mm×0.25 μm，进样口温度为240 ℃，检测器温度为250 ℃，柱子温度程序升温为70 ℃，保持1 min，以30 ℃/min上升到220 ℃，保持6 min，再以10 ℃/min 升到240 ℃，保持2 min，载气设置为氮气15 mL/min，氢气80 mL/min，空气为120 mL/min。其中进样量为1 μL，不分流进样。定量方法选择的峰面积外标发定量。

检测仪器稳定之后，连续注入数针有机磷混合标样溶液，并计算各组分的相对响应值，等相邻两针的相对响应值变化小于1.5%之后，再按照溶剂、混合标样溶液、样品溶液、添加收样品溶液的顺序进行测定，通过外标法进行定量分析[2]。

3 探讨和结果

3.1 线性、检出限、定量限

将配制好的浓度为0.05、0.1、0.5、1.0 mg/kg 的混合标样用气相色谱仪分析，每个标样进样3 次，每次进样1 μL，取平均值绘制7个农药标准曲线，并计算回归方程。在0.04 ～0.8 μg/mL线性范围中，甲基对硫磷、二嗪磷、亚胺硫磷、杀冥硫磷与伏杀硫磷5 种有机磷农药的线性相关系良好，其中R2都 在0.999 ～1.0。检 出 限 数值在0.001 ～0.02 mg/kg。再通过10 倍噪声值，就可以计算出最低定量限，最低定量限数值在0.004 ～0.05 mg/kg，5 种有机磷农药标准曲线、检出限、定量如表1 所示。

通过表1 可看出，在此种优化条件下，气相色谱在测定蔬菜有机磷农药时具有很高的灵敏度、线性良好，无论是检出限还是定量限都能够达到国家规定标准[3]。

3.2 加标回收实验

需要采取空白加标法分析，在0.04、0.12、0.4 mg/kg 浓 度 下，进行加标回收实验，且每个浓度至少做3 个平行实验，测定结果表明，5 种有机磷农药的回收率范围在83.4%～113.4%，相对标准偏差在0.17%～6.95%，满足国家固定蔬菜有机磷农药测定的要求。

表1 5 中有机磷农药标准曲线、检出限、定量限表

4 结语

综上所述，本文结合理论实践，分析了气相色谱法测定蔬菜中有机磷类农药方法优化，分析结果表明，采用进样口温度控制在230 ℃左右，检测器温度控制在250 ℃左右；二阶程序升温分离来测定蔬菜中有机磷农药残留的方法，线性相关系数、最低检出限、最低定量限等都满足要求。而且分离效果好，线性范围宽，准确度高，为保证蔬菜的安全性，值得大范围推广应用。