胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法检测CEA和AFP的结果对比

谌秋华，陈燕玲，谢联斌

(中国人民解放军庐山康复疗养中心a.检验科；b.肿瘤科，江西 九江 332000)

癌胚抗原(CEA)是首先从结肠癌和胚胎组织中提取出的一种肿瘤相关抗原，属于细胞膜结构蛋白，存在于细胞浆中，可通过细胞膜分泌到细胞外进入血液中[1]。临床实践证实，CEA可以作为结肠癌、肺癌、乳腺癌以及其他多种恶性肿瘤的特异性标志物，在恶性肿瘤的鉴别诊断、病情监测、疗效评价等方面均具有重要的临床价值[2]。甲胎蛋白(AFP)是一种糖蛋白，属于白蛋白家族，在胎儿血液循环中的水平较高，出生后2～3个月时AFP被白蛋白替代，血液中水平较低[3]。AFP具有多种生物学功能，如免疫抑制、淋巴细胞诱导凋亡等，其与多种肿瘤的发生发展密切相关，可作为多种肿瘤的阳性检测参考指标[4]。本研究比较胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法对CEA和AFP的检测结果，旨在为临床血清肿瘤标志物检测方法的选择提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究210名受试者为中国人民解放军庐山康复疗养中心2015年7月至2020年4月期间收治的124例结直肠癌患者和在此期间来院进行体检的86例健康人群。其中男125例，女85例；年龄26～76岁，中位年龄47.4岁；消化系统肿瘤73例，呼吸系统肿瘤51例。本研究符合知情同意原则。

1.2 检测方法

1.2.1 胶乳增强透射免疫比浊法

清晨空腹收集受试者全血标本，收集血清后，应用全自动生化分析仪(日本HITACHI公司生产，型号：7180)进行胶乳增强透射免疫比浊法检测。CEA、AFP胶乳增强透射免疫比浊法检测试剂盒均购于北京九强生物技术股份有限公司，检测操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。检测仪器的状态和质量控制情况均良好。

1.2.2 电化学发光免疫分析法

清晨空腹收集受试者全血标本，收集血清后，应用电化学发光仪(德国ROCHE公司生产，型号：Cobas e 411)进行电化学发光免疫分析法检测。CEA、AFP电化学发光免疫分析法检测试剂盒均购于德国ROCHE公司，检测操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。检测仪器的状态和质量控制情况均良好。

1.3 观察指标

分别比较应用胶乳增强透射免疫比浊法、电化学发光免疫分析法检测血清中CEA、AFP的水平。将两种检测方法的CEA、AFP检测结果进行Pearson相关性分析。分别对两种检测方法检测血清中CEA、AFP水平诊断肿瘤的受试者工作特征曲线(ROC曲线)进行分析，统计ROC曲线下面积(AUC)。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两种检测方法检测结果比较

两种检测方法所得CEA、AFP值比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两种检测方法CEA、AFP值的比较

2.2 两种检测方法检测CEA、AFP的相关性分析

Pearson直线相关性分析结果显示，两种方法检测所得CEA、AFP值呈正相关(r=0.733、0.669，P<0.01)。见图1—2。

2.3 两种检测方法检测CEA、AFP诊断肿瘤的ROC曲线

分别将CEA、AFP纳入肿瘤诊断的ROC曲线分析中。胶乳增强透射免疫比浊法检测CEA、AFP的结果在诊断肿瘤中的AUC分别为0.674、0.655，差异均有统计学意义(P<0.001)，见表2、图3A。电化学发光免疫分析法检测CEA、AFP的结果在诊断肿瘤中的AUC分别为0.606、0.639，差异均有统计学意义(P<0.001)。见表3、图3B。

表2 胶乳增强透射免疫比浊法AUC统计结果

表3 电化学发光免疫分析法AUC统计结果

3 讨论

临床检验学中检测血清中CEA、AFP的方法较多，如酶联免疫吸附试验、电化学发光免疫分析法、胶乳增强透射免疫比浊法等。酶联免疫吸附试验的操作比较简单，费用较低，临床可广泛应用，特别适用于基层医院对肿瘤患者的筛查，但该方法的检测敏感性较低，准确度和稳定性并不十分理想，因此检测的结果与金标准之间存在一定的差距[5]。电化学发光免疫分析法起源于20世纪90年代，本质上是一种新型标记免疫分析方法，实验原理是基于抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段，通过将一些容易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，再通过这些标记物的增强放大效应来显示反应体系中抗原或抗体的性质与含量[6-7]。电化学发光免疫分析法的检测速度较快，检测结果的准确度较高，应用广泛，且实验的过程具有较高的自动化的特点，因此在临床相关指标的检测中应用较为广泛[8-9]。然而，电化学发光免疫分析法所使用的设备和试剂目前均需进口，因此价格较为昂贵，导致临床应用存在一定的局限性。胶乳增强透射免疫比浊法是将液相内的沉淀反应与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一种指标分析技术[10-11]。当抗原、抗体在特定的电解质溶液中进行反应时，将形成小分子免疫复合物(免疫复合物微粒)，导致反应液出现一定的浊度，经过相关的仪器检测后，可通过吸光度来进行分析(待测抗原量与反应溶液的浊度呈正相关关系)，与相应的标准曲线进行对照后，即可计算得出血清中相关检测指标的水平[12-13]。胶乳增强透射免疫比浊法具有操作简单、反应迅速、成本低廉的优势，检测过程不需要使用价格昂贵的仪器，实验试剂无需进口，因此在临床上值得推广使用[14]。

本研究结果中，分别应用胶乳增强透射免疫比浊法、电化学发光免疫分析法检测血清中CEA、AFP水平，检测结果显示两种检测方法检测得到的血清CEA、AFP浓度比较，差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果也显示，胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法检测血清中CEA、AFP的结果均具有明显正相关关系(r=0.733、0.669，P<0.01)。以上均说明胶乳增强透射免疫比浊法在血清CEA、AFP浓度的检测方面，其检测结果与电化学发光免疫分析法相比较基本相当。在临床肿瘤的诊断中，笔者分别将CEA、AFP纳入肿瘤诊断的ROC曲线分析中，分析结果发现：两种检测方法检测血清中CEA的结果在肿瘤诊断中的AUC值分别为0.674、0.606，差异均有统计学意义(P<0.01)；两种检测方法检测血清中AFP的结果在肿瘤诊断中的AUC值分别为0.655、0.639，差异均有统计学意义(P<0.01)。提示分别使用胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法检测血清中CEA、AFP的结果，在肿瘤诊断中的价值基本一致。

综上所述，胶乳增强透射免疫比浊法对血清CEA、AFP的检测结果与电化学发光免疫分析法的检测结果基本一致，且具有操作简单、成本低廉的优点，其检测结果可以为临床肿瘤的诊断提供参考。