猪支原体肺炎诊断

曾梅，李金良，曾洪良，吴让忠，徐树培，袁定胜

（1.四川省木里县动物疫病预防控制中心，四川 木里 615899；2.四川省畜牧科学研究院，四川 成都 610066）

猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种慢性接触性呼吸道传染病，又称猪地方性流行肺炎及猪气喘病等。猪支原体肺炎广泛分布于世界各地，是较难净化的猪病之一。该病可造成猪生长发育不良，导致继发感染，引发猪呼吸道综合征甚至死亡。其诊断如下。

1 材料和方法

1.1 试验动物 某养殖场35日龄左右三元杂交保育猪133 头。病猪喘气、呼吸短促，呈腹式呼吸，发哮鸣音，初步诊断为猪支原体肺炎。

1.2 主要仪器与试剂 MyCycler PCR 仪，JYSPCT型水平电泳槽，JY600E型通用电泳仪电源，口腔拭子基因组DNA 提取试剂盒，病毒RNA 提取试剂盒，一步法RT-PCR 扩增试剂盒（MMuLV），2×T5 Super PCR Mix，DL2000 DNA Marker。

2 试验方法

2.1 脏器剖解 无菌采取病猪气管、支气管、肺脏及肺门淋巴结，观察其呼吸系统是否存在病理变化。

2.2 影像学检查 病猪进行X线检查，取背胸位观察影像的对称性和特征影像，取侧位观察渗出。受检猪先进行背胸位X 线检查，再转动X 光机照射机头进行侧位检查。

2.3 PCR 病原鉴定 PCR 鉴定及测序根据DB32∕T1461-2009中猪肺炎支原体P36基因引物序列，合成两条引物，引物序列为P1：5-TTACAGCGGGAAGACC-3，P2：5-CGGCGAGAAACTGGATA-3，预计扩增片段长度约为427 bp。采集的病料参照报道的方法提取基因组DNA，进行PCR鉴定和测序。

3 试验结果

随机选取有典型咳嗽、气喘症状的病猪进行X 线检查，发现肺野有不规则的云絮状渗出阴影。观察到其肺脏水肿，左右肺膈叶、心叶及右肺尖叶呈灰红色，病理部位如鲜嫩肌肉，呈肉变样。取病猪部分肺脏病料-20 ℃低温保存，进行猪支原体肺炎实时荧光定量PCR 检测，结果显示猪支原体肺炎为抗原阳性。

综合以上检查结果，确诊该例为肺炎阳性。以整个猪群为单位，只要发现一头病猪，就可认为该猪群是病猪群，猪场为猪支原体肺炎阳性场。

4 小结

猪支原体肺炎多呈慢性或隐性感染。猪肺炎支原体在一般的培养基中很难生长，较难分离。X 线检查具有重要的诊断作用，通常可对隐性感染、早期感染或疑似病猪做出迅速诊断。