车前子在不孕症中的应用及机制研究进展

李钰玲 刘海燕 贲倩

不孕症之名首载于《周易》：“妇三岁不孕。”天癸乏源，冲任血海亏虚，则胞宫失养，乃致不孕；女性易忧思恼怒，肝气不疏，气血运行不畅则不易受孕。中医药治疗不孕症源远流长，具有独特的优势。车前子是临床常用中药，药理作用十分广泛，在古典医籍中运用于治疗不孕症早有记载。《名医别录》言：“养肺，强阴，益精，令人有子。”《本草经疏》曰：“入五子衍宗丸为生精种子要药；入金匮肾气丸则固精益阴。”《神农本草经百种录》载：“凡多子之药皆属肾，故古方用入补肾药中。车前子多子，亦肾精之药。子药健脾益气，补肾藏精，谓之助孕佳品。”种子的繁殖特性相似于人类的生殖功能，故有“子药—精子—生命”与“下丘脑—垂体—性腺轴”功能相似之说。《本草备要》言：“肾有二窍，车前子能利水窍而固精窍，精盛则有子。”车前子为利水之品，使水窍常开，小便利而湿热外泄，同时配以补肾之品，可使精窍常闭而无泄漏，精固则阴强，精盛则有子。《本经》谓之“主气癃、止痛，利水道小便，除湿痹。久服轻身，耐老” 。现代人多喜嗜辛甘厚味之品，因而很多女性体质偏于脾虚痰湿质，痰湿为阴邪，易阻滞气机，车前子为利水渗湿、化痰降浊药之物，使水湿得去，则痰湿瘀无容身之处，气血调和，冲任充盛，胞宫得养。由此可见，车前子在治疗生殖疾病方面发挥着重要作用。

1 车前子在卵巢储备功能下降不孕中的应用

《傅青主女科》载：“经水出诸肾，而本于肾。”中医学认为卵巢储备功能下降以肾虚为本，进而累及其他脏腑，常夹杂痰湿、血瘀等病理因素，导致“肾—天癸—冲任—胞宫轴”紊乱。阳松威等[1]研究发现，补肾中药能够抑制卵泡闭锁与消亡，提高卵泡数量和质量，增加卵泡充盈度，缓解卵巢组织病变程度。徐宁[2]以补肾健脾为治则拟四五二合剂，研究结果证实中药周期疗法联合电针治疗卵巢储备功能下降的临床疗效显著，可增加窦卵泡的生成，缓解中医症状。赵红艳[3]注重补肾疏肝法，车前子入肝、肾二经，种子药亦有加快重阴转阳阶段之意，使卵巢储备功能得以逆转, 经行正常, 得孕有子。

1.1 车前子多糖具有抗氧化活性

袁从英[4]研究发现，车前子多糖可以显著升高小鼠血液谷胱甘肽过氧化物酶活性, 清除体内过多的活性氧类物质自由基，提高细胞超氧化物歧化酶的活力、减少脂质过氧化产物的生成，说明车前子具有抗氧化、防衰老等作用，可延缓衰老进程。胥莉等[5]研究发现，车前子的总黄酮提取物和总多糖提取物均具有较强的体外抗氧化活性，且能有效抑制6-羟基多巴胺诱导的神经细胞死亡，是有效的天然抗氧化及神经保护物质。代国年等[6]实验发现，经车前子干预后，小鼠肝脏超氧化物歧化酶活性和还原型谷光甘肽浓度显著升高，过氧化氢和丙二醛浓度显著降低，这表明车前子能够减轻扑热息痛诱导的氧化应激作用,提高机体抗氧化应激系统防御功能，防止氧化产物堆积。

1.2 通过雌激素受体α和雌激素受体β介导激活基因转录

王晓帆[7]研究发现，车前子水提物通过雌激素受体α和雌激素受体β共同介导激活基因转录，使性未成熟小鼠子宫系数明显增加，亦对人乳腺癌细胞具有显著的促增殖作用，在体内、体外均发挥雌激素样活性作用。

1.3 调控生殖腺细胞凋亡关键基因表达水平

李静等[8]选用秀丽线虫模拟卵巢功能下降模型,实验表明五子衍宗方可使ced-3mRNA表达水平下调，ced-9mRNA表达水平上调，提示五子衍宗方通过调节线虫生殖腺细胞凋亡通路关键基因的表达水平而抑制生殖腺细胞的凋亡，从而改善卵巢功能受损秀丽线虫的生殖能力，发挥生殖能力保护作用。

由此可见，车前子具有抗氧化活性、类雌激素样作用，可以调控生殖腺细胞凋亡关键基因表达水平，对改善卵泡组织萎缩、缓解卵巢组织病变、改善卵巢储备功能下降发挥着重要的作用。

2 车前子在多囊卵巢综合征不孕中的应用

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)以脏腑功能失调为本，痰浊、瘀血阻滞为标，多涉及肝、脾、肾三脏功能异常。毛新等[9]探索PCOS合并痤疮患者中医体质分布情况发现，湿热质在临床中占一定比例。车前子性寒，其清热利湿之效对PCOS痤疮患者具有良好的效果。《医林纂要》记载：“车前子功用似泽泻，但彼专去肾之邪水，此则兼去脾之积湿。”车前子清热利湿泄浊，分化痰湿脂膜之浊，有化痰利水之功。研究提示使用益肾健脾通利化痰活血方能明显改善PCOS患者的月经状况[10]。曹颖[11]探索加减瓜石汤对改善阴虚胃热型PCOS患者的疗效，方中取车前子甘寒之性，利湿泄热，导热下行，使热邪从水道而去，实验已得到临床验证，疗效良好。

2.1 抑制α-糖苷酶的活性

PCOS以痤疮、排卵障碍、月经紊乱、不孕等为临床表现，常伴有不同程度的糖、脂代谢异常。彭庆华等[12]研究表明，车前子降糖活性的主要化学成分是环烯醚萜类，其中以京尼平苷酸含量最高。有动物实验证实，车前子对链脲佐霉素诱导的糖尿病小鼠模型具有良好的降血糖效果，并且能提升血清中胰岛素的含量和修复胰岛β细胞的损伤[13]。同样，兰继平等[14]发现车前子活性成分麦角甾苷对糖尿病模型小鼠具有良好的降糖效果，其作用与修复损伤的胰岛素细胞、减少炎症介质、增加机体的抗氧化能力有关。

2.2 增加胆固醇7a羟化酶的活性,增加胆汁酸的合成

栗艳彬[15]研究发现，车前子胶能显著降低实验组大鼠的血清总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇水平，减轻肝脏的质量，降低肝脏系数，说明车前子胶具有一定的降血脂作用。其机制可能是车前子改变胆汁酸的组成，使亲水性胆汁酸比例增加，从而反馈性抑制胆固醇7a羟化酶的活性，降低血脂。有研究发现，车前子主要能改善高脂小鼠的血脂、血糖和胰岛素水平，对高脂血症小鼠的可能作用机制在于磷脂酶A2活性酶的生物学效应、糖基甘油合成酶和肌醇必需酶1α、脂肪酸代谢和炎症的基因表达等[16]。

2.3 车前子多糖发挥抗氧化作用

刘素标[17]通过给高脂血症大鼠喂养车前子提取物，发现高脂血症大鼠的血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇的水平明显降低。说明车前子提取物具有降脂效果，其降脂的主要成分是车前子多糖，若倍量则降血脂效果显著增强。研究还发现其降脂作用机制可能与保护氧化酶活性而发挥抗氧化的作用相关。

车前子具有抑制α-糖苷酶的活性、增加胆固醇7a羟化酶的活性、增加胆汁酸的合成、抗氧化活性等不同作用机制，可达到降糖、降脂的疗效，改善PCOS所致的不孕症。

3 车前子在输卵管阻塞性不孕中的应用

中医学认为湿、热、寒诸邪是输卵管阻塞不孕的主要病因，因其阻滞气机、影响气血运行而致瘀阻冲任，胞脉、胞络不通是该病病机根本。导致输卵管阻塞的因素很多，其中最主要的是盆腔感染，这种感染往往是慢性炎症，炎症逐渐破坏了管腔的粘膜，形成瘢痕，引起输卵管堵塞、管壁僵硬、扭曲、周围黏连，改变输卵管与卵巢的关系，影响输卵管运卵、拾卵等功能。王珍珍[18]拟王氏逐瘀通脉汤，取车前子利水之性，同时又滋补肾经，补泻兼施，刚柔并济，治疗气滞血瘀型输卵管阻塞不孕症较对照组有明显优势。许瑞青[19]用化瘀通络种子汤治疗输卵管阻塞性不孕，方中车前子已证实有广谱抗菌作用，对金黄色葡萄球菌及各种杆菌均有抑制作用，该方临床疗效良好。

3.1 车前子多糖抑制炎性因子

现代药理研究发现，车前草不同药用部位均有较好的抗炎作用[20]。李芬芬等[21]研究表明，车前子精制多糖可显著抑制炎症细胞的吞噬活性，降低炎症细胞因子分泌量，具有一定的抗感染作用。赵宏等[22]通过体外实验研究了车前子多糖-B9对细菌脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型的影响，结果发现车前子多糖-B9能抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞一氧化氮的分泌，亦证实车前子具有抗感染的作用。

3.2 车前子水提液抗炎、抗氧化、消除自由基

冯娜[23]用车前子水提纯液给小鼠灌胃，发现对二甲苯致耳廓肿胀、蛋清致气囊滑膜炎有明显的抑制作用，能降低皮肤及腹腔毛细血管的通透性及红细胞膜的通透性。其抗炎机制可能是通过抑制炎性因子的释放、抑制脂质过氧化和消除自由基的途径来减轻炎症反应。Kim等[24]研究车前子抗炎作用机制，发现车前子水提物对环氧合酶-2的半抑制浓度值为8.61 μg/mL，其中桃叶珊瑚苷为车前子水提液中的主要抗炎成分。

车前子可改善免疫状态、增加局部吞噬细胞，利于盆腔粘连组织的消散和吸收，并改善输卵管结构和促进拾卵功能的恢复，对治疗输卵管阻塞等炎性不孕发挥着重要的作用。

4 车前子在子宫内膜容受性不孕中的应用

中医认为肾精充足、肾气旺盛则子宫内膜得以生长。反之，若肾气虚弱、肾精不足则男女之精无以植入胞宫。因此，肾虚是子宫内膜容受不良的主要病机。相关研究表明，补肾中药可以增加子宫内膜厚度,改善子宫内膜形态，增加子宫血流，进而改善子宫内膜容受性，提高临床妊娠率[25]。李兆惠[26]从临床实践中创温阳化浊方增加妊娠率取得了满意的效果，方中车前子，清利湿浊，助气化疏利，阳气畅通则内膜血脉疏通畅达，以改良内膜环境，提高内膜容受性，以助摄纳孕胎。何成瑶教授拟妇科调经2号方，一取车前子性甘寒滑利之性，用通于闭之中，用泻于补之内，利水而不耗气，水窍开，精窍闭；二取车前子入肾经以补肾益精，在改善子宫内膜容受性上取得了不错的疗效，又可增加子宫内膜厚度，提高临床妊娠率[27]。

4.1 车前子苷缓解平滑肌痉挛

近代药理研究发现，车前子含有黄酮类成分，其提取物车前子苷具有缓解子宫平滑肌痉挛作用，可降低子宫平滑肌的敏感性与兴奋性，从而提高子宫内膜容受性[28]。

4.2 上调S100A11蛋白的基因表达

近年来研究显示，子宫内膜中低水平的S100A11能够使子宫内膜细胞中一系列和胚胎容受相关的基因表达发生改变，从而无法形成接受状态，导致子宫内膜与侵入性胚泡间无法同步协调作用[29]。S100A11作为子宫内膜容受性标志性因子之一，五子衍宗丸能够上调因促性腺激素释放激素长方案控制性超促排卵所致下降的S100A11蛋白的基因表达，从而改善小鼠妊娠率及胚胎着床率[30]。

4.3 增加着床分子的蛋白表达

白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor，LIF)通过JAK/STATA途径发生磷酸化增强子宫内膜上皮细胞与纤连蛋白的结合，促进胚泡的早期植入[31]。同源框基因A10(Homeobox A10，HOXA10)可能通过对孕激素的直接调控而间接调控γ氨基丁酸pi受体mRNA的表达，从而调控子宫内膜容受性[32]。郭孟佳[33]研究发现，温阳化浊方增加高龄小鼠子宫着床分子 LIF、HOXA10的蛋白表达，使子宫免疫状态转向利于胚胎着床的方向，提高子宫内膜容受性。

车前子可通过车前子苷缓解平滑肌痉挛、上调S100A11蛋白的基因表达、增加着床分子LIF、HOXA10的蛋白表达等机制改善子宫内膜容受性，从而增加受孕几率。

5 车前子在子宫内膜异位症不孕中的应用

“离经之血不循其道”，久而成瘀。“两精相搏合而成形”，因瘀阻胞宫、冲任不通，两精不易结合，故导致不孕。司雨[34]在治疗卵巢子宫内膜异位囊肿不孕患者时，善用以车前子为佐药的五子四物汤，其中车前子疏利肾气、通利下窍，使方药补而不滞，临床发现可显著改善患者瘀血的状态，达到抑制异位子宫内膜生长的目的。杨艺[35]自拟除湿破瘀逐血汤，方中加入车前子意在加强利湿之力, 行瘀血之功，复煎液保留灌肠, 使药力接近病变部位，使局部瘀血、水肿得以消散，周围纤维组织逐步溶解，肿物体积逐渐缩小，从而有效改善子宫内膜异位症患者的血流变，为受精卵着床提供条件。

5.1 车前子多糖具有免疫调节作用

子宫内膜异位症发病与免疫因素有关，可表现为抗体增加及炎症介质的变化。植物中的多糖成分是一种良好的免疫调节剂。谢小梅等[36]采用环磷酰胺造模免疫抑制小鼠，对精制车前子多糖进行免疫活性研究，发现其可显著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性，促进淋巴细胞转化、溶血素分泌、脾脏T淋巴细胞分泌白细胞介素-2，具有较好的免疫增强作用。陈一晴[37]考察大粒车前子多糖对巨噬细胞RAW26.7细胞增殖及一氧化氮生成的影响，结果提示大粒车前子多糖可以促进一氧化氮的生成，说明大粒车前子多糖是巨噬细胞免疫调节物质。冯娜等[38]实验发现，车前子多糖可显著增加免疫力低下小鼠的吞噬指数，具有改善、调节及增强机体免疫功能的作用。

现代药理实验发现车前子胶亦可提高小鼠迟发型变态反应程度，使免疫力低下小鼠的溶血素水平升高，且对体重、脾指数和胸腺指数均有增加的作用[39]。故车前子可通过改善血液循环、发挥免疫调节作用，缓解子宫内膜异位症以提高妊娠率。

6 总结

综上，车前子的中药功效及化学成分在治疗不同原因的不孕症中发挥着多种作用，能明显增强疗效，改善生殖能力，满足更多女性的生育要求。车前子应用于不孕症的临床疗效确切，值得临床工作者在进一步研究及推广。目前车前子仍具有很大的发展潜力，尤其随着反复流产、胚胎停育等疾病发病率的逐渐上升，车前子的抗病毒、保肝肾等作用在内分泌及其他因素所致不良妊娠结局方面值得进行更深入的探索和更广泛的应用。