玫烟色棒束孢菌对茶芽粗腿象甲杀虫效果初探

包强 肖蕾 周品谦 李耀明 欧高财 王沅江

摘 要：为明确玫烟色棒束孢菌对茶芽粗腿象甲的室内毒杀作用，试验以孢子浓度为2.5×107、5.0×107、7.5×107、1.0×108个/mL 的玫烟色棒束孢菌孢子悬浮液进行处理。结果表明：玫烟色棒束孢菌对茶芽粗腿象甲有明显致病性，随着孢子浓度的增大，茶芽粗腿象甲的致死率增大，推荐使用孢子浓度为（7.5～10.0）×107 个/mL的玫烟棒束孢菌悬浮液防治茶芽粗腿象甲。

关键词：玫烟棒束孢菌;茶芽粗腿象甲;致病性;防治

中图分类号：S571.1; S435.4文献标识码：A文章编号：1006-060X（2020）10-0072-03

Abstract： In order to evaluate the indoor effect of Isaria fumosorosea Wize on Ochyromera quadrimaculata Voss， four concentrations of Isaria fumosorosea suspension， （2.5×107， 5.0×107， 7.5×107 and 1 .0×108 spores/mL）， were used in the test. The results showed that Isaria fumosorosea Wize had obvious pathogenicity to the pest. With the increase of the concentration of the spore suspension， the lethal rate of Ochyromera quadrimaculata Voss increased significantly. We recommend （7.5-10.0）×107 spores/mL of Isaria fumosorosea suspension for the control of Ochyromera quadrimaculata Voss.

Key words： Isaria fumosorosea Wize; Ochyromera quadrimaculata Voss; pathogenicity; control

玫煙色棒束孢（Isaria fumosorosea Wize）曾被移入拟青霉属[1]，称为玫烟色拟青霉（Paecilomyces fumosoroseus），后移入棒束孢属[2]，是一类常见的昆虫病原真菌。其瓶梗单生或轮生于孢子梗上，瓶状或近球形，壁光滑，透明，长7～15 μm，宽1.5～2.0 μm;分生孢子单胞，多柱形或拟梭型，光滑，透明至肉色，长3～4 μm，宽1～2 μm，呈链状[3]，无厚垣孢子。该菌寄主范围较广，可寄生菜果茶等园艺作物上一些鳞翅目、鞘翅目、同翅目、膜翅目、双翅目害虫[4-5]。研究者发现玫烟色棒束孢对茶小绿叶蝉等茶树害虫有较强的致病力[6]。目前，国内外对玫烟色棒束孢相关研究报道集中在分类鉴定、生物学及致病力以及防治应用等方面[7-8]。玫烟色棒束孢在自然界一般存活在土壤和昆虫尸体中，当遇到新的寄主昆虫且环境适宜时产生分生孢子，形成新的侵染，并不断感染新的寄主，在自然生境中形成流行病，在害虫防治方面有一定优势。

茶芽粗腿象甲（Ochyromera quadrimaculata Voss）又名茶四斑小象甲，近年来在湖南石门县等湘北茶区为害程度呈上升态势，该虫一年发生1代，以幼虫在茶丛根际土壤中越冬[9-10]。据调查，在湖南3月下旬4月上旬始蛹，4月中旬成虫初见，4月下旬至5月中旬盛发。成虫主要取食芽下1～3叶，自叶尖、叶缘开始咬食下表皮及叶肉，残留上表皮，呈现多个黄褐色枯斑，据过婉珍[10]调查，发生严重茶园中芽被害率高达84%，百芽减重率约l5%，每年损失产量约7%。成虫有假死性，受惊坠地佯死潜逃。对于该虫的防治研究较少，主要集中在化学或人工防治上[11-13]，采用化学防治能够快速降低虫口基数，但容易造成环境污染和农药残留，影响茶叶的外销，同时对消费者的健康容易造成潜在危险。因此，探寻对茶芽粗腿象甲新的非化学防治方法十分必要。与化学防治相比，昆虫真菌杀虫剂不污染环境且具有流行性，对农林害虫化学防治具有很强的替代性，笔者应用玫烟色棒束孢对茶芽粗腿象甲进行室内杀虫效果研究，旨在筛选适合的孢子浓度，为利用玫烟色棒束孢田间防治茶芽粗腿象甲奠定基础。

1 材料与方法

1.1 供试菌药

玫烟色棒束孢，重庆重大生物技术公司生产，100亿个/g棒束孢孢子。

1.2 供试虫源

采自于常德市石门县雁池乡西山垭有机茶厂基地，在茶芽粗腿象甲成虫发生高峰期，采取茶树地面铺膜振落法捕捉成虫，带回实验室采用茶梢饲养于养虫笼中。1 d后选取健康活泼的成虫于室内生测。

1.3 孢子悬浮液的配置

用分析天平称取100亿个/g玫烟色棒束孢10.00 g放入灭菌三角锥形瓶，用量筒量取1 000 mL的0.05%吐温-80溶液摇匀配置成浓度1.0×108孢子/mL的孢子悬浮液母液，用移液管依次移取稀释配置7.5×107、5.0×107、2.5×107孢子/mL的孢子悬浮液，共计4个浓度。

1.4 浸渍法接种

共计4个浓度处理，每个浓度处理重复3次，以0.05%吐温-80溶液为对照。采用浸渍法接种，每个处理试虫6头。接种方法：依次将试虫浸入到不同浓度孢子悬浮菌液中3 s，对照浸沾0.05%吐温-80溶液后，分别用灭菌的滤纸吸干虫体表面多余的菌液。接种后把试虫置于一次性灭菌过自制塑料盒（盖子表面用纱布自制通气部位）中，用基部包有湿润脱脂棉的新鲜茶梢置于培养箱（25℃，95%湿度，L∶D=1∶1）饲养，每2 d更换一次新的茶梢。

1.5 调查与统计方法

接菌处理后调查药后虫体存活情况，分别计算死亡率、校正死亡率。如发现死虫及时将其移出塑料盒，并置于无菌培养皿内保湿培养观察死虫尸体上是否长出菌丝。死亡率、校正死亡率的计算公式如下：

1.6 数据处理方法

采用SPSS 17.0软件中单因素方差分析对试验数据进行处理。利用邓肯氏新复极差法对试验数据进行多重比较分析。

2 结果与分析

2.1 致病性

茶芽粗腿象甲成虫浸渍感染玫烟色棒束孢，其玫烟色棒束孢孢子萌发，在体表形成芽管，芽管分化形成附着胞，穿过虫体皮肤侵入体内长成菌丝，菌丝在体内大量繁殖，当外界条件适宜时菌丝穿出表皮，产生分生孢子（见图1），使害虫新陈代谢紊乱致死。

2.2 室内防治效果

从表1可知，玫烟色棒束孢处理的茶芽粗腿象甲死亡率上升，随着浓度增大需要半数死亡时间缩短，致死率升高。2.50×107个/mL孢子浓度处理在药后9 d出现死亡，死亡率5.56% ± 4.53%，7.50×107个/mL孢子浓度在药后20 d致死率达到80%，半致死亡时间为20 d，1.0×108个/mL孢子浓度下药后20 d死亡率达到了100.00% ± 7.86%，差异显著;药后25 d，2.50×107个/mL孢子浓度处理的茶芽粗腿象甲死亡率达到53.33% ± 4.54%，超过半数。

3 结论与讨论

昆虫真菌杀虫剂与化学防治相比，不污染环境，且具有流行性，对农林害虫化学防治具有很强的替代性。研究结果表明，玫烟色棒束孢菌对茶芽粗腿象甲有致病性，随着孢子悬浮液浓度增大，茶芽粗腿象甲致死率增大，7.50×107个/mL孢子浓度在药后20 d致死率达到80.00%，半致死亡时间为20 d，1.0×108个/mL孢子浓度下药后20 d死亡率达到了100.00%，差异显著，故采用（7.5～10.0）×107个/mL孢子浓度防治茶芽粗腿象甲可行，在未来玫烟色棒束孢防治茶芽粗腿象甲的田间应用上奠定了基础。

玫烟色棒束孢进入寄主昆虫的致病过程复杂多样，加之玫烟色棒束孢在茶园生态环境中的作用还不是完全清楚，可能会限制其在其害虫防治方面的有效应用。另外，玫烟色棒束孢-茶芽粗腿象甲-茶树间的相互作用方式如何有待于进一步解决，未来需要一方面加大对玫烟色棒束孢生物特性、致病机理及相关基因、菌株改良进行研究，另外一方面扩大其实践应用等技术方面研究的探讨，从而实现其在茶园对茶芽粗腿象甲防治上的应用。

参考文献：

[1] Samson R A. Paecilomyces and some allied hyphomycetes[J]. Studies in Mycology，1974，6：1-119.

[2] Luangsa-Ard J J，Hywel-Jones N L，Manoch L，et al. On the relationships of Paecilomyces sect. Isarioidea species[J]. Mycological Research，2005，109（5）：581-589.

[3] 韩燕峰. 中国拟青霉属的系统学及部分菌株的致病性研究[D]. 贵阳：贵州大学，2007.

[4] 梁 丽，田 晶，马瑞燕. 玫烟色棒束孢研究进展[J]. 山西农业大学学报（自然科学版），2013，33（4）：362-368.

[5] Murillo-Alonso K T，Pe?a-Chora G，Hernández-Baltazar E，et al. Conidia production by Isaria fumosorosea on solid substrates and its pathogenicity towards Bemisia tabaci[J]. Biocontrol Science and Technology，2015，25（2）：175-184.

[6] 蒲蛰龙，李增智. 昆虫真菌学[M]. 合肥：安徽科学技术出版社，1996.

[7] 陈巍巍，冯明光. 玫烟色拟青霉的研究與应用现状[J]. 昆虫天敌，1999，21（3）：3-5.

[8] Zhou F C，Ali S，Huang Z. Influence of the entomopathogenic fungus Isaria fumosorosea on Axinoscymnus cardilobus（Coleoptera： Coccinellidae）under laboratory conditions[J]. Biocontrol Science and Technology，2010，20（7）：709-722.

[9] 汪荣照，陈 星. 茶芽粗腿象生物学特性的初步观察[J]. 蚕桑茶叶通讯，2002（2）：10-11.

[10] 过婉珍. 茶芽粗腿象成虫食叶量的测定[J]. 中国茶叶，2000，22（1）：19.

[11] 汪荣灶，方仁香，方兰香. 耕作对茶芽粗腿象控制作用初步研究[J]. 江西植保，1997，20（1）：7-10.

[12] 汪荣灶. 茶芽粗腿象成虫的药效试验[J]. 蚕桑茶叶通讯，1997（4）：33-35.

[13] 汪荣灶，祖剑云. 茶芽粗腿象综合防治措施[J]. 蚕桑茶叶通讯，2001（3）：10-11.

（责任编辑：张焕裕）