乳腺癌患者血清E-cadherin、sE-cadherin 水平与临床分期及化疗疗效的相关性

王 超，舒诚荣，曹爱玲，乐 玲

（咸宁市中心医院，湖北科技学院附属第一医院肿瘤科，咸宁 437100）

乳腺癌（breast cancer，BC）最常见于导管和小叶，从导管发展的癌症被称为导管癌，而从小叶发展的癌症被称为小叶癌［1，2］。此外，还有超过18 种其他亚型的乳腺癌；其中一些癌症，如原位导管癌，是从侵袭前病变发展而来的［3］。其治疗方法根据癌症分期和患者年龄不尽相同，主要包括手术、放疗、化疗、内分泌治疗和靶向治疗；其中手术类型从乳房保留术到乳房切除术各不相同［4］。但这些治疗都需在活组织检测确诊和确定癌症是否已经扩散后实施，尚未有有效的血清指标已表征这种癌症的分期和治疗效果。研究表明，56 %的小叶乳腺癌中上皮细胞钙粘附蛋白（E-cadherin）的CDH1 基因失活，84 %小叶乳腺癌中E- cadherin 表达完全丧失［5，6］。因而本研究旨在探讨E-cadherin 和可溶性上皮细胞钙粘蛋白（sE-Cadherin）在不同临床分期患者中的表达情况，并分析其化疗效果，详述如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象收集我院2017 年1 月～2018 年11 月接受治疗的患者资料，纳入标准：确诊为乳腺癌［7］，为首次接受治疗，KPS 评分大于60［8］；排除标准：合并其他脏器功能不全，患免疫系统疾病，患内分泌疾病，临床治疗不完整。将符合标准的100 例患者纳入研究，根据TNM 分期不同分为Ⅰ期组（n=29）、Ⅱ期组（n=41）和Ⅲ期组（n=30），一般资料见下表1，各组间资料差异不显著（P＞0.05）。

表1 患者一般资料

1.2 临床分期根据TNM 分期系统进行，其中T 表示肿瘤体积及周围受累范围情况，T0 至T4 情况逐步加深；N 表示淋巴结受累情况，N0 至N3 受累范围逐渐扩大；M 表示是远处转移情况。M0 表示无远处转移，M1反之。再将患者T、N 和M 分期情况进行汇总，分期从Ⅰ至Ⅳ期不等，如Ⅰ期为T1、N0 和M0，ⅡB 期为T2、N1、M0 或T3、N0、M0。

1.3 血清E-cadherin、sE-cadherin水平检测 在化疗前后检测患者E-cadherin、sE-cadherin 及其他指标水平。取患者清晨（8：00 前）空腹8 小时外周静脉血5 mL，加入抗凝管静置2 小时，后3 000 r/min 离心10 分钟取血清，-20℃保存待测。使用ELISA 法检测其中E-cadherin、sE-cadherin 和HMGB1 水平，按照试剂盒（均购于上海内含子生物）说明中步骤操作。

1.4 化疗及其效果评估

1.4.1 化疗治疗方式全部患者推荐使用蒽环联合紫杉醇（PTX）化疗（EC-P）方式，表柔比星（批准文号：H2012039，依比威药品）90 mg/m2，静脉滴注，21 天为一个周期；上述完成4 周期后，序贯PTX（批准文号：H20059378，海正辉瑞）175 mg/m2，在心电监护下3 hrs 静脉滴注，也为21 天一个周期进行4 个周期；全部方案完成为8 个周期。滴入PTX 之前30 min，给予苯海拉明（批准文号：H41021264，天津药业集团）20 mg，肌肉注射；给予盐酸昂丹司琼（4 mg/片，批准文号：H10960146，宁波天衡药业）2 片，口服。化疗进行7 天后，检测血常规，若血红蛋白大于等于80 g/L、中性粒细胞计数大于等于1.5*109L-1，、血小板大于等于7.5*1010L-1，则继续使用PTX 化疗；若不在上述范围内，改用粒细胞集落刺激因子（G-CSF，新瑞白，批准文号：S20150013，齐鲁制药），待骨髓抑制后继续化疗。

1.4.2 结果判断化疗前后，使用B 超采用最大直径法检查乳腺原发灶大小，病理完全缓解患侧原发肿瘤区无浸润癌细胞，临床完全缓解（CR）检查时肿瘤消失，临床部分缓解（PR）肿瘤最大直径*最大垂直径减少50%以上，病情稳定（SD）肿瘤最大直径*最大垂直径减少少于50 %或增加小于25 %，病情进展（PD）肿瘤最大直径*最大垂直径增加大于等于25 %。将全部患者按照化疗临床效果进行分组，临床完全缓解和部分缓解（CR+PR）一组，病情稳定和病情进展（SD+PD）一组。

1.5 数据分析删除无效数据（信息缺失比例＞20%）后导入SPSS 22.0 进行统计分析。计量数据以mean±SD 表示，采用配对t 检验进行组内比较，采用独立样本t 检验进行组间比较；计数资料以n（%）表示，经过半定量化处理后使用χ2或Fisher 精准概率法检验；依据数据是否服从二元正态分布分别采用spearman 或pearson相关分析各监测指标间的相关性。如无特殊说明，显著性水准α=0.05，所有P 值均表示双侧概率。

2 结果

2.1 不同临床分期患者血清E-cadherin、sE-cadherin水平患者血清E-cadherin 水平随着临床分期升高而明显降低（P＜0.01），sE-cadherin 和HMGB1 水平则随着临床分期升高而明显升高（P＜0.01），见表2。

2.2 血清E-cadherin、sE-cadherin 水平与临床分期相关性血清E-cadherin 水平与临床分期呈负相关，sE-cadherin 水平与临床分期呈正相关（P＜0.05），相关系数分别为-0.357 和0.382，见表3。

表2 不同临床分期患者血清E-cadherin、sE-cadherin水平

表3 血清E-cadherin、sE-cadherin水平与临床分期相关性

2.3 血清E-cadherin、sE-cadherin 水平与化疗疗效相关性化疗后，CR+PR 组E-cadherin 水平明显高于化疗前（P＜0.01），sE-cadherin 和HMGB1 水平明显低于于化疗前（P＜0.01），而SD+PD 组合与化疗前无明显差距（P＞0.05）但明显异于CR+PR 组（P＜0.01），见表4。

表4 血清E-cadherin、sE-cadherin水平与化疗疗效相关性

2.4 血清E-cadherin、sE-cadherin 水平与化疗疗效相关性血清E-cadherin 水平与化疗疗效呈负相关，sE-cadherin 水平与临床分期呈正相关（P＜0.05），相关系数分别为-0.310 和0.326，见表5。

表5 血清E-cadherin、sE-cadherin水平与化疗疗效相关性

3 讨论

在世界范围内，BC 是威胁女性生命安全的主要癌症类型，约占全部病例的四分之一［9，10］。BC 的症状包括乳腺肿块、乳腺形状变化、乳头溢液，或皮肤改变、乳头乳晕异常和腋窝淋巴结肿大等；在疾病远处传播的患者中，可能存在骨痛、淋巴结肿大、呼吸短促或皮肤发黄等现象；但是一些症状，如皮肤浅凹和乳头凹陷，其症状不明显不易及时发现，因而需要更灵敏的指标表征［10，11］。

本研究分别检测不同癌症临床分期患者血清E-cadherin、sE-cadherin 和HMGB1 指标发现，相较于Ⅰ期患者，Ⅲ期组患者血清E-cadherin 水平明显更低，且与临床分期呈负相关。E-cadherin 是一种由肿瘤抑制基因CDH1 编码的钙黏蛋白，CDH1 基因的突变与胃癌，乳腺癌、结肠直肠癌、甲状腺癌和卵巢癌相关；E-cadherin 表达和功能的丧失被认为通过增加增殖、侵袭和/或转移促进癌症的进展。Favaretto 和Kato 等人［12，13］认为，E-cadherin 是上皮癌的生物标志物。报道显示，正常组织中E-cadherin 阳性表达明显高于肿瘤增生组织和癌组织，说明随着组织癌变，其中E-cadherin 表达逐渐减少，与本文血清E-cadherin 水平随着TNM 分期增加而减少的结果一致［14］。

其后我们对比了不同T N M 患者血清中s Ecadherin 和HMGB1 含量，我们发现其二者水平均随着TNM 分期增加而增加，即呈正相关。sE-cadherin 是E-cadherin 的细胞外一游离形式分布的降解片段，微量存在于血清中；近年研究表明，sE-cadherin 在肿瘤患者血清中含量升高，说明其可能在肿瘤发生、发展和扩散中扮演重要角色，与本文研究结果一致［14，15］。而HMGB1 是一种重要的染色质蛋白，由免疫细胞通过无前导分泌途径分泌，作为其细胞因子介质在炎症和损伤机制中起作用；另外巨噬细胞移动抑制因子可以通过激活HMGB1 / TLR4 /NFκB 轴促进乳腺癌转移［16］。因而TNM 分期越高的患者，血清内HMGB1 含量越高。

我们随后将全部接受化疗的患者按照化疗效果进行区分，CR 和PR 作为效果明显的一组，而SD 和PD 作为效果不理想的一组，对比两组血清指标我们发现，血清E-cadherin 水平与化疗疗效呈负相关，sE-cadherin和HMGB1 水平与临床分期呈正相关，这提示化疗效果越好的患者血清E-cadherin 含量越高，sE-cadherin 含量越低，这与其各自在机体内作用结果一致。

虽然本文发现乳腺癌患者血清E-cadherin 和sEcadherin 变化趋势，但由于收集的患者资料时间和完全度问题，未进行化疗后随访，因而未能分析血清指标变化与患者无进展生存期（PFS）、总生存期（OS）和无病生存期（DFS）之间的关系。因而下一步，我们需要对取得联系的患者进行随访，直至其联系丢失或因癌死亡。随后统计随访数据，分析血清E-cadherin 和sE-cadherin是否为影响乳腺癌患者化疗后PFS、OS 和DFS 等指标的危险因素。

综上所述，不同TNM 分期患者血清E-cadherin、sE-cadherin 水平不同，E-cadherin 水平与临床分期呈负相关，sE-cadherin 与临床分期呈正相关；化疗前后检测血清E-cadherin、sE-cadherin 水平可帮助表征乳腺癌预后和复发情况，为临床诊断和治疗提供依据。