郑从坤
(湖南省耒阳市三都镇畜牧水产站,湖南耒阳421800)
猪繁殖呼吸障碍病毒又称为猪蓝耳病毒(PRRSV),其感染仔猪和保育猪可导致患畜出现明显的呼吸症状,感染母猪则出现繁殖障碍性疾病[1]。猪圆环病毒病又称为皮炎肾病综合征,由圆环病毒2 型(PCV2)感染所引起,引起仔猪出现呼吸症状、腹泻和皮炎等,同时可导致母猪出现繁殖障碍[2]。PCV2 和PRRSV 均为重要的免疫抑制性病毒,猪群感染这两种病原后不但会出现严重的临床症状,病猪先天性免疫和获得性免疫性能也受到抑制,导致其更容易受到其它病原感染,继发其它疫病往往导致病畜死亡[3-4]。
猪链球菌(SS)在猪场无处不在,但该病原为机会性致病菌,猪群被感染后不表现明显临床症状,猪群一般为隐性感染,当猪群免疫力下降时,猪链球菌可导致患畜出现败血症、脑膜炎和关节炎等,甚至猪链球菌2 型可感染人,对人畜健康造成巨大的威胁[5-6]。在小型养殖场或散养场中,由于某些猪场饲养水平较低,猪群受到多种病原威胁,导致多病原混合感染现象较为常见,但混合感染较为复杂,导致传统的临床和病理诊断较为困难,误诊或少诊往往延误病情,造成巨大的经济损失。本文以一例保育猪PRRSV、PCV2 和SS 混合感染为例,对其诊断与治疗过程进行阐述,旨在为该类病原混合感染疫病的防控提供借鉴。
2019 年10 月初,耒阳市三都镇畜牧水产站接到当地某猪场保育猪发病情况报告后,特派本人前往现场调查情况。该场为小型散养场,从外地购买仔猪(24 日龄)进行育肥,在购入仔猪后1 周左右,部分猪群开始发病,其主要临床症状包括消瘦、皮毛杂乱、咳嗽、腹泻等,少部分发病猪四肢关节肿大或耳廓发紫。出现疫情后,养殖户对全部猪群进行抗生素用药,其中包括阿莫西林和青霉素,但效果不好。
将死亡不久的病猪进行剖检,病变明显的器官主要是肺脏、肾脏和淋巴结等,其中肺脏有明显充血,呈现弥漫间质性肺炎症状,腹腔内有大量积液,肾脏表明有大量的针尖状出血点,关节腔内有清亮的积液,此外,病猪全身性淋巴结(腹股沟淋巴结、腹股沟淋巴结和肠淋巴结等)均不同程度的充血或肿大,而其它器官出血病变较轻微。
经过初步临床诊断,笔者判定为蓝耳病毒、圆环病毒和其它病原混合感染,确诊还需要进一步试验室诊断。
无菌采集病猪病变明显的腹股沟淋巴结、肺脏、脾脏和肾脏等组织,剪取少量组织混合,与适量生理盐水混合,充分研磨后,反复冻融促进病毒从组织中释放到上清,其后高速离心,取上清。
用商品化试剂盒提取组织上清核酸(RNA 和DNA)。对于DNA 病毒(PCV2 和猪伪狂犬病毒(PRV)检测,可直接以提取核酸作为模板,按照相应病原检测说明书对进行操作,对于RNA 病毒(PRRSV、猪流行性腹泻(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪瘟病毒(CSFV))的检测,则需要将核酸样品中RNA 反转录为cDNA 后,再根据相应说明书进行操作。最后检测结果显示,样品为PCV2 和PRRSV 混合感染。
将组织切开,用接种环蘸取少量组织液在鲜血琼脂培养基表面进行划线,其后将培养基置于37℃培养箱内,36 h 后观察培养基表面是否存在菌株,并通过革兰氏染色法对菌株形态学进行初步鉴定。结果显示,菌株在鲜血培养基表面以成对排列,为圆形隆起,呈针尖状,此外,菌落周围形成透明的溶血圈。进一步革兰氏染色鉴定结果显示菌株为革兰氏阳性菌,为链状。进一步药敏试验结果表明菌株对恩诺沙星、氟苯尼考、氧氟沙星等抗生素敏感,对环丙沙星、阿莫西林、链霉素和林可霉素和复方新诺明等耐药。
结合临床与实验室诊断结果,可以确诊本案例中保育猪发病由PRRSV、PCV2 和猪链球菌混合感染所致。
基于以上检测结果,我们采取以下紧急措施:对猪场进行消毒,在饲料中添加适量的黄芪多糖,饮水中加多维,降低猪群的应激;对未发病猪群紧急免疫接种PRRSV 和PCV2 弱毒疫苗;对全场猪群肌肉注射氟苯尼考(20 mg/kg·d),连续用药3d。实施以上紧急措施后,猪群发病情况得到有效控制,生产成绩提高。
在生猪养殖过程中,特别是在某些饲养条件较差的散养场或小型养殖场中,猪多种病原混合感染现象较为常见。对于该类疫病的诊断依靠养殖经验或者临床诊断往往不可靠,需要进行实验室诊断,只有确诊发病原因后才能针对性进行治疗,最终减少养殖企业(户)的经济损失。而对该类疫病的防控主要是杜绝病原进入猪场,即在外购仔猪或引进种猪时加强对病原的监测,在养殖过程中加强卫生管理,提高猪群的免疫性能,定期对猪群实施免疫接种相应疫苗等。