曾丽金 莆田市城厢区动物疫病预防控制中心 福建莆田 351100
该次莆田市兽医系统实验室检测能力比对,要求在规定时间内领取比对试验盲样、主要试剂,完成实验室检测过程,出具检测报告和上报结果,现将城厢区兽医实验室参加比对测试的情况介绍如下。
1.1 试剂 禽流感病毒 H5 亚型(RE-11)血凝抑制试验抗原 (哈尔滨维科生物技术开发公司生产);事先准确配制的1%鸡红细胞悬液。
1.2 方法 采用血凝(HA)/血凝抑制(HI)方法(SN/T1182.2-2004), 按照 《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936-2003)进行。 结果判定:被检血清 HI效价≤3 log2 判为阴性;=4 log2 判为可疑 (可疑样品应重检,重检效价≥4 log2,判为阳性,≤3 log2 判为阴性);≥5 log2 判为阳性。
1.3 结果与分析 有2 份样品(编号5~6)禽流感病毒抗体检测结果为阴性,4 份样品(编号1~4)为阳性。 见表 1。
表1 H5 亚型(Re-11)禽流感病毒抗体检测数据统计
2.1 试剂 小反刍兽疫竞争ELISA 抗体检测试剂盒 (中国农业科学院兰州兽医研究所生产),2~8 ℃下保存、备用。
2.2 方法 试剂盒使用前, 各试剂应平衡至室温,将试剂盒配备的25 倍PBST 浓缩液用无离子水或蒸镏水作 1:25 稀释,配制成洗涤液(1×PBST)。 然后按照小反刍兽疫竞争ELISA 抗体检测试剂盒使用说明书进行检测。
2.3 结果与分析 测得相关样品OD450nm平均值为:阴性血清 1.292、 阳性血清 0.1375、 空白对照孔0.082、单抗对照孔 1.376;阴性对照血清 PI<40%,阳性对照血清PI>60%。 只有试验编号为20 号样品的小反刍兽疫抗体检测结果为阴性, 其余3 份都是阳性(见表 2)。
表2 小反刍兽疫抗体检测数据统计
通过本次兽医系统实验室检测能力比对, 发现实验室质量管理方面存在问题与不足。
一是仪器设备陈旧。 县级兽医实验室只做血清学检测,检测时间集中在春秋两季,其他时间很少开展检测工作, 仪器设备闲置率较高, 不经常维护保养,多道移液器出现明显的量差,仪器设备或多或少对检测结果产生一定的偏差。
二是培训不足。 县级兽医实验室专业技术人员参加专业技术培训的机会很少, 几乎都是边看检测说明书边操作,出现问题再回头查找原因,可以说是“摸着石头过河”成长起来的,这样的专业技术人员更专注检测前的准备工作。