血清白蛋白、CRP及GDF-15与川崎病患儿冠脉损伤的相关性

赵 玮

（齐齐哈尔医学院附属第二医院儿科，黑龙江 齐齐哈尔 161000）

1967年，日本Tomisaku Kawasaki医师首次对外发表关于对川崎病（kawasaki disease，KD）的认知，并以自己的名字命名该病，之后越来越多的学者对川崎病展开深入的认识与探究[1]。川崎病是一种在儿童中流行的急性、自限性血管炎性疾病，常侵及全身中小血管，以皮肤淋巴结及黏膜改变为主要病变，是导致儿童后天心脏病的主要诱因[2]。流行病学研究显示，该疾病在我国的发病率逐渐升高且呈季节性变化[1]。疾病进展过程中，心血管系统受累明显，冠状动脉相关损伤发病率显著，常表现在冠状动脉壁增厚、管腔扩张，严重者形成冠状动脉瘤，此外炎症因子介导的内皮损伤及损伤后修复已经明确，其中C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）是炎性因子之一，生长分化因子-15（growth differentiation factor-15，GDF-15）及血清白蛋白（serum albumin，ALB）均在川崎病发病及进展过程中发挥密切作用[3～5]。但目前临床关于CRP、GDF-15、ALB各指标与川崎病患儿冠脉损伤之间的相关研究较少。鉴于此，本研究探讨CRP、ALB、GDF-15水平与川崎病患儿冠脉损伤之间的相关性，旨在为临床冠脉损伤的预防及治疗提供科学依据。具示如下。

1 资料与方法

1.1 纳入对象

本次研究内容及设计思路均严格遵循我院医学伦理委员会相关规定，且均在获取患儿监护人的同意后，翻阅、整理患儿病历资料。整群抽样法，回顾性分析我院2017-06～2019-06期间收治的65例川崎病患儿的临床资料，将其中经冠状动脉超声检查明确冠脉损伤的35例患儿纳入冠脉损伤组，其中男性23例，女性12例；年龄2～14岁，平均年龄10.75±1.23岁；病程3～15d，平均病程9.23±2.52d。将其余未发生冠脉损伤的30例患儿纳入无冠状动脉损伤组，其中男性20例，女性10例；年龄3～14岁，平均年龄 10.45±1.10岁；病程 3～17d，平均病程9.35±2.61d。另外选取同时期内体检健康的30例儿童纳入对照组，其中男性18例，女性12例；年龄2～14岁，平均年龄10.61±1.31岁。三组受试者年龄、性别对比，均衡性良好（P＞0.05），研究有可比性。

1.2 入选标准与排除标准

（1）纳入标准：①川崎病患儿均符合《儿科学》[6]第8版中相关诊断标准：a.不明诱因持续体温升高，时间≥5d；b.眼部球结膜充血；c.口唇皴裂、潮红，杨梅舌；d.发病初期、足趾肿胀、发红；e.身体表面伴长血性红斑；f.可扪及淋巴结肿大；g.具备上述情况中任意5项即可判定；②患儿在院期间均采取阿司匹林联合大剂量丙种球蛋白治疗；③受试者年龄≤14岁；④对照组受试者儿童家属均知情同意本次研究并自愿签署知情同意书；⑤患儿临床资料完整；（2）排除标准：①合并猩红热、系统性红斑狼疮、麻疹等病情类似者；②合并可引起心肌损害的其他疾病，如风湿性心脏病、病毒性心肌炎等；③易过敏体质者。

1.3 方法

1.3.1 标本采集及检测（1）GDF-15检测。所有受试者均于清晨空腹状态下抽取3mL肘静脉血，3000r/min速度离心15min，抽取上层清液，保存在-70℃待检，常规配置检测所需标准品溶液、洗涤液，之后对标本进行复温、培养，检测OD值，并绘制曲线图，在标准曲线上找到GDF-15对应的值×稀释的倍数，所得最终值即为GDF-15含量；（2）ALB与CRP检测。所有受试者均于清晨空腹状态下抽取3mL肘静脉血，采用深圳市国赛生物技术有限公司生产的国赛Astep蛋白分析仪及其试剂盒，利用免疫比浊法检测血清中CRP含量；ALB：选择OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪，采用科华试剂及其配套的定标液进行检测，方法选用溴甲酚绿法，所有受试者的血液标本检测均由同一组检验科医师进行，操作规程严格按照操作指南进行，受试者血标本采集成功后，均标明姓名、年龄、性别，防止混淆。

1.3.2 冠状动脉内径D值检测患儿静息状态下平卧位，采用美国ATL-ULTRAMARK29彩超仪检测冠状动脉内径，观察期是否存在异常，对于配合度较低的患儿可给予5%水合氯醛灌肠，1mL/kg，准确记录。所有患儿的超声检查均由同一位影像师操作。

1.4 冠状动脉扩张判定标准

依据《儿科学》第8版相关判定标准：检测川崎病患儿主干内经，当出现下列情况者即判定为冠状动脉扩张：≤3岁：≥2.5mm；＞3岁且＜10岁：≥3mm；≥10岁且＜14岁：≥3.5mm；或冠脉内径/主动脉根部内径≥0.3。发生冠脉损伤的35例患儿中冠脉扩张≥2.5mm12例，平均扩张内径2.75±0.15mm，将其纳入A组；冠脉扩张≥3mm15例，平均扩张内径3.30±0.17mm，将其纳入B组；冠脉扩张≥3.5mm8例，平均扩张内经3.72±0.23mm，将其纳入C组。

1.5 评价指标

观察冠状动脉损伤患儿ALB、CRP、GDF-15表达情况，及ALB、CRP、GDF-15在冠状动脉不同损伤程度的表达情况，并分析上述指标与冠脉损伤程度之间的关系。

1.6 统计学方法

采用SPSS 23.0统计分析软件，符合正态分布的计量资料以表示，两组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验，多组间比较采用单因素方差分析；ALB、CRP、GDF-15与冠脉损伤程度之间的相关性分析采用双变量Pearson相关性检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组受试者ALB、CRP、GDF-15表达

3组受试者ALB水平对比，对照组最高，后由高至低依次为无冠脉损伤组、冠脉损伤组，3组受试者CRP、GDF-15参数水平对比，冠脉损伤组CRP、GDF-15参数水平最高，后由高至低依次为无冠脉损伤组、对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（见表1）。

表1 3组受试者ALB、CRP、GDF-15表达（，n）

表1 3组受试者ALB、CRP、GDF-15表达（，n）

images/BZ_79_274_2795_766_2856.pngimages/BZ_79_766_2795_1259_2856.pngimages/BZ_79_1259_2795_1752_2856.pngimages/BZ_79_274_2918_766_2980.png对照组（n=30）冠脉损伤组（n=35）images/BZ_79_766_2918_1259_2980.pngimages/BZ_79_1259_2918_1752_2980.pngimages/BZ_79_274_3041_766_3103.pngPimages/BZ_79_766_3041_1259_3103.png37.56±4.42 28.41±2.73 0.000images/BZ_79_1259_3041_1752_3103.png5.41±1.78 94.23±18.12 0.000 GDF-15（ng/mL）475.68±31.45 1665.23±42.36 1940.23±55.12 2970.114 0.000

2.2 不同冠脉扩张内径ALB、CRP、GDF-15表达对比

3组不同程度冠脉扩张内径的患儿ALB水平对比，A组最高，后由高至低依次为B组、C组，3组CRP、GDF-15水平对比，C组最高，后由高至低依次为B组、C组，差异有统计学意义（P＜0.05）（见表2）。

表2 不同冠脉扩张内径ALB、CRP、GDF-15表达对比（，n）

表2 不同冠脉扩张内径ALB、CRP、GDF-15表达对比（，n）

images/BZ_80_271_847_764_922.png冠脉扩张内径（mm）A组（n=12）C组（n=8）images/BZ_80_764_847_1257_922.pngimages/BZ_80_1257_847_1749_922.pngimages/BZ_80_1749_847_2242_922.pngimages/BZ_80_271_996_764_1071.pngPimages/BZ_80_764_996_1257_1071.pngALB（g/L）28.78±2.85 15.23±1.12＜0.001images/BZ_80_1257_996_1749_1071.pngCRP（mg/L）93.45±18.95 135.23±26.12＜0.001images/BZ_80_1749_996_2242_1071.pngGDF-15（ng/mL）1845.69±45.23 2206.58±70.36＜0.001

2.3 ALB、CRP、GDF-15各指标与冠脉扩张内径之间的相关性分析

经双变量Pearson相关性分析检验证实，冠脉扩张内径与ALB呈负相关（r＜0，P＜0.05），与CRP、GDF-15呈正相关（r＞0，P＜0.05）（见表3）。

表3 ALB、CRP、GDF-15各指标与冠脉扩张内径之间的相关性分析r（P）

3 讨论

川崎病常累及全身中小血管的炎性反应性疾病，冠状动脉病变在其发病过程中具有关键意义，也是诱发患儿后天心脏病的主要原因之一。往往发病一段时间后，超声相关检查才可发现冠状动脉相关病变，而此时已经错过治疗的最佳干预时机，鉴于此，对冠状动脉的早期诊断与评估，对促进患儿预后显得尤为重要[6,7]。

川崎病属于急性血管炎综合征，主要致死原因为心血管损伤导致的冠状动脉瘤、心力衰竭等。川崎病还属于自身免疫性疾病，机体内免疫细胞活化造成免疫系统功能紊乱，在疾病进展过程中发挥举足轻重的作用[8,9]。GDF-15属于反应性应激蛋白，具有抗炎、抵御缺血/再灌注损伤、抗心力衰竭等作用，正常情况下，其在心肌细胞中呈低表达；当机体发生病变，心肌细胞遭受应激，GDF-15表达出现应激性升高[10,11]。在体外进行心肌细胞培养过程中发现，炎症因子经一氧化氮依赖的信号通路诱导GDF-15呈高表达，属于内源性抗炎因子，高水平的GDF-15能够抑制巨噬细胞活化与炎症反应[12]。GDF-15在机体内主要发挥如下生理作用：（1）当患儿罹患川崎病后，机体免疫系统高度活化，巨噬细胞趁机释放诸多炎症因子，如CRP、白细胞介素、肿瘤坏死因子等，此时GDF-15在上述多种细胞因子作用下，经一氧化氮介导的信号通路，在巨噬细胞中呈现高表达，进而使白细胞浸润与巨噬细胞的活化作用均受到明显抑制，从而改善血管内皮损伤程度，最终抑制川崎病诱发的血管炎；（2）GDF-15经过P53途径，加速外周血中淋巴细胞凋亡，使免疫细胞活化时存活的时间缩短，利于清除淋巴细胞克隆，最终缓解机体免疫性反应；（3）GDF-15还可促进血管重塑：①GDF-15能够显著上调血管内皮生长因子；②P53表达受抑制，通过上述两种作用途径，显著改善血管损伤[13,14]。鉴于此，GDF-15可为川崎病的诊断及治疗提供新的靶点。CRP是反映机体感染与损伤的敏感性指标，在机体发生炎性刺激时，由肝细胞合成，在川崎病疾病进展过程中，随着冠状动脉损伤程度，其表达水平不断升高。CRP选择性结合免疫细胞表面免疫球蛋白，能够促进吞噬与免疫调节作用，并在此过程中发生炎性反应，诱发并加重炎性缺血性损伤[15]。ALB主要由肝脏合成并释放，正常情况下，机体内细胞外液中含量较多的蛋白，当机体蛋白摄入能力下降，肝脏合成能力受损，其水平表达较低，诱发机体出现低蛋白血症。本研究结果显示，CRP、GDF-15水平在川崎病患儿中呈高表达，ALB呈低表达，3组不同程度冠脉扩张内经的患儿ALB水平对比，A组最高，后由高至低依次为B组、C组，3组CRP、GDF-15水平对比，C组最高，后由高至低依次为B组、C组。表明，ALB、CRP、GDF-15与冠脉损伤之间密切相关。

为进一步分析明确ALB、GDF-15、CRP与冠脉损伤程度之间的相关性，经双变量Pearson检验分析得出，冠脉扩张内径与ALB呈负相关，与CRP、GDF-15呈正相关。其原因可能为，随着冠脉不断扩张，冠脉损伤程度不断加剧，机体应激性免疫反应及炎症反应被应性激活，CRP、GDF-15水平不断增高；心血管受累不断加重，当心肌损伤严重，造成大量自然杀伤细胞在损伤部位聚集、活化，之后自然杀伤细胞顺着肝窦积聚在血管内皮，导致肝细胞损伤，最终造成ALB合成下降，血清中ALB水平不断下降[13]。鉴于此，可考虑通过检测川崎病患儿机体中CRP、GDF-15及ALB水平，来预测川崎病患儿冠状动脉损伤情况。但本研究仍存在一定的不足之处，本次研究采取回顾性分析，在收集患儿资料时，不可控制因素较多，且因时间限制，符合本次研究设计的样本数量较少，上述种种原因导致本次研究数据可信度不高，希望未来能够就此开展较多的大样本、多中心的前瞻性研究，来加以佐证，旨在为更多川崎病的预防及治疗提供参考。

综上所述，CRP、GDF-15水平在川崎病患儿中呈高表达，ALB呈低表达，ALB、CRP、GDF-15表达水平与川崎病患儿冠脉损伤程度之间密切相关，临床可通过检测川崎病患儿ALB、CRP、GDF-15表达水平，评估患儿是否发生冠脉损伤及其损伤程度，并对其及时采取干预性治疗，以提高患儿预后。