江永青,汪红,王文娟
(九江学院附属医院,江西 九江 332000)
湿疹通常称为特应性皮炎,是表皮和浅表真皮的慢性炎症。儿童湿疹的发生率远远高于成人,在发病高峰时其发病率可达到28.7%[1]。湿疹临床可表现为慢性反复发作的皮肤瘙痒、干燥和疼痛,显著影响患者生活质量,甚至导致抑郁、社会隔离以及自我认同感下降等精神心理疾患,给家庭带来巨大的经济负担。湿疹的发病机制尚不明确,目前认为与自身免疫功能和皮肤屏障功能有关。研究表明[2-4],1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]是维生素D3的一种活性代谢产物,与多种免疫相关性疾病有关,如哮喘、荨麻疹、食物过敏等。然而,只有组织和器官中表达维生素D受体(VDR)才可以有效地发挥维生素D活性。本实验检测我院湿疹患儿1,25(OH)2D3,VDR,白介素-17(IL-17),白介素-17受体(IL-17R)表达水平,探讨1,25(OH)2D3对湿疹的作用机制,为湿疹的治疗提供理论基础。
选取2016年1月—2018年7月在本院就医的湿疹患儿108 例作为观察组,其中男57 例,女51 例,年龄(5.4±3.5)岁。选择我院外科手术患儿77 例作为对照组,皮肤组织无病变,其中男42 例,女35 例,年龄(6.2±4.1)岁。两组患儿性别、年龄等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。湿疹患者的诊断及分期均参照第四版赵辨主编的《中国临床皮肤病学》标准。纳入标准:临床医生诊断为湿疹;无严重心肺功能不全和肝肾功能不全;2 周内局部未外用皮质激素、维生素D3衍生物、钙调素抑制剂和免疫抑制剂;最近1 个月内没有系统地应用糖皮质激素、补骨脂素、阿维A和紫外线疗法;没有其他相关皮肤病;没有药物过敏史;患者及其家属知情同意。本研究经院伦理委员会批准。
采集两组患者静脉血5 mL,用美国化学发光分析仪BECKMAN UniCel Dx I800,用电化学发光法测定血清1,25(OH)2D3的含量。试剂盒由美国BECKMAN公司提供。取患者皮损处组织与对照组皮肤组织,采用实时荧光PCR仪(美国,A&B 7500 Real Time PCR System)检测VDR及β-actin表达。抽取两组患者外周静脉血5 mL,采用ELISA法检测IL-17及IL-17R浓度。根据试剂盒(上海酶联生物有限公司)说明书,在科华酶标仪ST-360上测量OD450值,绘制标准曲线,并计算样品浓度。
血清1,25(OH)2D3含量观察组(29.25±11.03)nmol/L,对照组(55.49±21.66)nmol/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
皮损处VDR观察组为(1.57±0.98),对照组为(3.21±2.12),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
与对照组相比,观察组患者外周静脉血IL-17及IL-17R的表达明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。
表1 两组IL-17及IL-17R表达水平比较
湿疹患者血清1,25(OH)2D3浓度与IL-17及IL-17R表达呈显著负相关(r值分别为-0.279,-0.311,P<0.05),与VDR表达呈显著正相关(r=0.298,P<0.05)。
湿疹可以引起剧烈瘙痒,造成湿疹样皮损,引起患者焦虑,降低生活质量。湿疹的发病机制复杂,目前认为湿疹的病因可能与自身免疫功能障碍、慢性皮肤感染、代谢紊乱、化学物质等多种内外因素有关[5]。1,25(OH)2D3是一种脂溶性类固醇衍生物,是维生素D家族中最重要的一员。维生素D可抑制固有免疫及炎症反应,调节皮肤屏障功能,这在湿疹的发病机制中至关重要。维生素D可以以多种方式影响免疫系统的调节。第一,它与皮肤细菌和病毒感染易感性相关[6]。湿疹患者缺乏先天免疫系统的效应个体,包括抗菌肽[7]。体外研究表明,抗菌肽可针对维生素D的活性代谢产物形成细胞诱导,从而提高皮肤对微生物的抵御能力[7]。第二,维生素D也直接通过增加皮肤肥大细胞产生的白介素-10(IL-10)来抑制皮肤炎症[8]。第三,维生素D缺乏,对全身免疫系统产生影响,从而导致过敏的发生。活性维生素D生物活性的表达依赖于维生素D受体的存在。研究人员在小鼠湿疹模型的试验中发现,低钙状态VDR未被激活,使湿疹的症状明显加重。在VDR激动剂处理的小鼠皮肤中,Foxp 3表达调控的T细胞数量明显增加,皮肤屏障基因和抗菌肽基因明显增强[9]。在皮肤屏障功能中,维生素D及其受体可以调节底层的增殖,调节棘层和颗粒层蛋白,并且可以控制角质层脂质的合成[10]。因此,维生素D可通过改变表皮屏障功能、免疫功能和细菌防御功能来调节过敏反应。IL-17是一种炎症细胞因子,主要由TH17细胞分泌。IL-17可以刺激活化辅助性T细胞、内皮细胞及成纤维细胞,分泌大量的包括白介素-6(IL-6)在内的多种炎症因子,从而促进炎症的发生[11]。同时,IL-17也能与细胞膜上的IL-17R结合并发挥复杂的免疫调节功能。IL-17可作为一个重要的调节因子来诱导自身免疫和炎性病变,这些疾病包括过敏性气道炎症、移植排斥、关节炎、自身免疫病、过敏性皮炎、葡萄膜炎和肠疾病[12]。在对肾移植患者Th17细胞相关免疫反应的观察中,研究者发现随着1,25(OH)2D3浓度增加,外周血单核细胞中IL-17表达下降[13]。然而,IL-17及其受体是否与湿疹中的维生素D和受体水平有关还有待研究。
如上所述,1,25(OH)2D3与湿疹密切相关。本研究证实,我国湿疹患儿1,25(OH)2D3及VDR明显低于健康儿童;IL-17/IL-17R的表达明显上升。湿疹患者血清1,25(OH)2D3浓度与IL-17及IL-17R表达呈显著负相关(P<0.05),与VDR表达呈显著正相关。