银屑病小鼠抑郁样行为学检测与分析

何 磊，陈丽莉，陈 军，陆海涛，王 皓，郭 建，吴景良，秦树存，李保强，段昕所

银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病，可累及心血管等多个系统[1]。银屑病严重影响着患者的身心健康，甚至可以出现抑郁等精神症状[2]，增加了社会和家庭的经济负担。最新的研究表明10%以上的银屑病患者患有临床抑郁症[3]，其较正常人群更容易出现抑郁症状[4]。虽然银屑病与心肌梗死、脑卒中和心血管死亡有关，但是患银屑病抑郁的患者患这些疾病的风险更高[5]。因此，本研究拟使用体重变化率、糖水偏好实验、悬尾实验系统评估银屑病小鼠模型抑郁行为学改变，从而探讨银屑病对心理健康的影响。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 健康SPF 级雄性 C57BL /6J 小鼠20 只，10 月龄，体重18 ～25 g [北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物使用许可证号：SYXK（京）2016-0006]。实验期间喂养于泰山医学院动脉粥样硬化研究所实验动物中心。动物饲养于标准动物房：12 h 昼夜交替，室温（24±2）℃，空气湿度50%±10%，除造模及必要的断水断食外，小鼠均可自由进水进食。实验前动物先适应性饲养1 周。本实验遵循实验动物3R 原则。

1.1.2 主要试剂与仪器 5%咪喹莫特（四川明欣药业有限公司），凡士林（河北兰炼飞天石化有限公司），小鼠水迷宫实时测试系统（TopScan 美国CSI）。

1.2 方法

1.2.1 银屑病小鼠模型制备 参考 van der Fits 等[6]银屑病样动物模型制备方法。将小鼠通过腹腔注射4%水合氯醛（0.1 ml /kg）进行麻醉，并将其背部约 2 cm × 2 cm 毛发剃除。 C57BL/6J 小鼠20 只按体重分成2 组：正常对照组10 只， 外用凡士林；银屑病模型组 10 只，背部脱毛后给予5%咪喹莫特62.5 mg每日1 次外涂，为期1 周。

1.2.2 体重变化率 于造模前及造模后第7天上午9:00 测量小鼠体重，计算体重变化率，体重变化率（%）＝（造模后测量体重－造模前体重）÷造模前体重×100%。

1.2.3 糖水偏好实验[7]实验前禁水 24 h，进行基础糖水/纯水消耗试验，给予每只小鼠 1 瓶纯水及 1 瓶1% 蔗糖水，12 h 后调换一次糖水和自来水的位置，24 h 后进行称重，计录小鼠总液体消耗量、糖水消耗量。糖水偏爱率＝糖水消耗量÷总液体消耗量×100%。

1.2.4 悬尾实验[8]将小鼠尾部( 距尾尖约 1.5 cm)用医用胶布固定在水平木板上， 小鼠头部距离实验台10 cm 左右，小鼠保持倒悬状态 2 min 后， 连续观察 4 min 内实验小鼠倒悬活动状态， 记录小鼠身体下垂、完全不动的总时间。

1.3 统计学方法

实验结果均采用 SPSS 统计软件进行数据处理。实验数据均选用t检验。实验结果均以平均数 ± 标准差（x¯±s）表示，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

观察体重变化率显示，银屑病模型组小鼠体重明显下降，而正常对照组小鼠体重升高（P＜0.001）（图1），提示银屑病小鼠存在抑郁样表现。

图1 银屑病对小鼠体重的影响

图2 银屑病对小鼠糖水偏好实验及悬尾实验的影响

糖水实验结果显示，银屑病模型组小鼠总进水量减少，糖水饮水量减少，消耗率明显下降（P＜0.001）（图2A-2C），提示银屑病小鼠存在抑郁样表现。

悬尾实验结果显示，银屑病模型组小鼠悬尾不动时间延长（P＜0.05）（图2D），提示银屑病小鼠存在抑郁样表现。

3 讨论

银屑病与心理疾病密切相关[9]。国内外研究表明，银屑病患者具有较高的抑郁患病率，我国的发病率高达13.9%[10]，严重影响患者的生活质量[11]。快感缺乏、自主行为学和体重变化都是临床中评定诊断抑郁症的汉密尔顿抑郁量表中的观察项目[12]。快感缺失是指体验快乐的能力下降，是抑郁症的核心症状，也是重要的诊断指标之一。体重变化率是评价小鼠抑郁症模型常用的指标，由于快感缺失等原因，导致抑郁小鼠进食量减少，从而出现体重下降。糖水偏好实验，是抑郁症模型行为学评价的经典实验，实验的原理是通过抑郁患者所表现出的快感缺失。糖水消耗实验通过比较一定时间内小鼠饮用糖水量的改变，反应快感缺失的程度。抑郁小鼠快感缺失的程度增加，则对糖水的兴趣降低，从而导致糖水消耗率降低。本研究采用糖水偏好实验、悬尾实验系统评价银屑病对小鼠行为学的影响。这两种经典的方法被广泛应用于小鼠抑郁行为的评价，包括抑郁行为机制的研究，如小清蛋白神经元对抑郁样行为的调控[13]；不同疾病对抑郁行为的影响，如分析黄褐斑小鼠模型在肝郁证的行为学变化[14]，先天性白内障对小鼠行为学影响[15]；抗抑郁药物的筛选，如沃顿胶改善小鼠脑损伤后的抑郁情绪[16]。本研究表明，银屑病模型组体重明显下降，银屑病模型组小鼠糖水消耗明显减少，悬尾实验中银屑病模型组小鼠悬尾不动时间延长，表明银屑病小鼠存在抑郁症状，也从动物实验的角度再次证实了银屑病对心理健康的影响。综上所述，银屑病小鼠存在抑郁样行为表现，提示临床上需进一步观察银屑病患者心理状态，同时为进一步探讨银屑病伴随心理疾病的研究提供新的理论依据。