中草药制剂对禽流感H5亚型免疫抗体水平的影响试验

张俊文，姚学梅，金淑霞，王烈花，杨生娟，韩庆彦

（1.永靖县动物疫病预防控制中心，甘肃临夏731600；2.甘肃省动物疫病预防控制中心，兰州730030）

高致病性禽流感是危害养鸡业的主要传染病之一，发病急，死亡率高，国际兽疫局将其列为A 类疫病，我国将其列为一类动物疫病，是我国养鸡业危害最大、经济损失最严重的传染病。中草药制剂具有直接杀灭或抑制细菌和增强免疫力的功能，具有长期使用而无药物残留、无抗药性和无毒副作用的特点。为了证实中草药制剂对免疫禽流感血清抗体水平影响，评价中草药制剂的使用价值，筛选最佳中草药制剂，保证禽流感抗体能够达到一个较高的水平，对预防禽流感的发生具有很重要的作用，在永靖县幸源养殖有限公司开展本试验。

1 试验材料

1.1 试验药物：中草药复方制剂I 号，有效成分为：板蓝根30g、大青叶20、甘草5g、防风5g、柴胡5g、枳壳5g、桔梗5g、茯苓5g、虎杖5g、薄荷5g、荆芥5g、忍冬藤3g、牛角丝2g 等；中草药复方制剂Ⅱ号，有效成分为金银花50g、连翘15g、薄荷15g、荆芥10g、淡豆豉10g 等。

1.2 疫苗：重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活苗（H5N1Re-11 株+Re-12 株，H7N9H7-Re2 株），由肇庆大华农生物药品有限公司生产，批号为01924198；禽流感标准抗原、阳性血清（哈尔滨国生生物科技股份有限公司生产，批号分别为20200504、20200408）。

2 试验方法

2.1 试验动物及分组：选用110日龄海兰褐鸡2400 只，随机分为3 组（Ⅰ号制剂组、Ⅱ号制剂组、空白对照组），每组800 只。

2.2 免疫方法：该批蛋鸡在45日龄用重组禽流感灭活三价苗（H5N1Re-11 株+Re-12 株+H7N9、H7-Re2 株）进行了首次免疫；在试验开始时（即110日龄时），再次用重组禽流感灭活三价苗（H5N1Re-11 株+Re-12 株+H7N9、H7-Re2 株）颈部皮下免疫注射，注射后14d、40d 和70d 采集血液进行免疫抗体检测。

2.3 抗体效价检测：按《中华人民共和国国家标准－ 高致病性禽流感诊断技术》（GB／T18936－2003）进行，血凝抑制滴度以血清稀释倍数倒数的对数（log2）表示。

3 试验结果

3.1 试验组H5N1 Re-11 株抗体检测结果与Re-12 株抗体检测结果相近，在此仅介绍Re-11株检测结果。注射疫苗14d、40d 和70d 后，不同组H5N1 Re-11 株抗体检测结果分别见表1、表2和表3。

3.2 从表1中看出，注射禽流感疫苗14d 后，Ⅰ号制剂组抗体效价在7～9 之间，平均8.73；Ⅱ号制剂组抗体效价在8～9 之间，平均8.6；空白对照组抗体效价在6～7 之间，平均7.33。平均抗体效价Ⅰ号制剂组＞Ⅱ号制剂组＞空白对照组，试验组之间抗体效价滴度检验差异不显著（P＞0.05）； 试验组与对照组抗体效价差异均显著（P＜0.05）。

表1 注射疫苗后14d 抗体检测结果

表2 注射疫苗后40d 抗体检测结果

表3 注射疫苗后70d 抗体检测结果

3.3 从表2中看出，注射禽流感疫苗40d 后，Ⅰ号、Ⅱ号制剂组抗体效价仍在7～9 之间，平均分别为8.22 和8.2。平均抗体效价Ⅰ号制剂组＞Ⅱ号制剂组＞空白对照组，试验组之间抗体效价差异不显著，说明试验各组抗体效价水平基本一致。

3.4 从表3中看出，注射禽流感疫苗70d 后，Ⅰ号制剂组抗体效价在7～9 之间，平均8；Ⅱ号制剂组抗体效价在8～9 之间，平均7.8；空白对照组抗体效价在6～9 之间，平均7.07。平均抗体效价Ⅰ号制剂组＞Ⅱ号制剂组＞空白对照组，各组抗体效价滴度均比注苗后14d 明显下降，尤其是对照组离散度较大。

4 讨论分析

4.1 中草药添加剂作为天然添加剂参与机体代谢，在对疾病的抵抗方面，可作为维持保护屏障，使免疫系统发挥最佳功能。在饲料中添加不同组方中草药均对鸡群免疫效果均有明显促进作用，14d 抗体水平达到峰值，试验组40d、70d 测定结果虽有下降趋势，但与对照组相比较，仍高于对照组，并且抗体效价离散度较低。

4.2 采用复方中药对禽流感抗体水平的提高作用，主要是通过改善鸡体状况，增强免疫器官的的机能来实现。复方中药可以明显提高抗禽流感抗体水平，在禽流感的免疫防治中，可以作为免疫增强剂，如果在养鸡生产中合理应用，既可以提高免疫效果，提高疫苗的保护率，延长免疫期，又因为在鸡内无副作用，无残留等优点，符合绿色环保的要求，对人的健康不会产生不良影响，符合市场的需求，有着广阔的应用前景。