黄启东
广西梧州市岑溪市食品安全检验检测中心 广西梧州 543200
食品微生物检验的质量控制应能够贯穿于食品微生物检验的各个环节中,做好检验人员、培养试剂、仪器、环境及微生物检验过程、检验结果的全过程的监督与质量管理,规避质量风险,提高检验结果准确性[1]。为能够提高食品微生物检验的质量控制水平,还需不断加强质量控制各环节的规范性,优化质量控制要点,提高控制质量。可以从以下几个方面进行。
食品微生物检验中,人的作用应受到更多的重视,检验人员自身专业水平、知识技能与专业经验对检验结果的准确性、真实性具有直接影响,在具有较高专业能力、操作水平,对实验室检验安全操作知识,具备较强无菌操作观念的检验人员中,能够更主动的起到质量控制效果,更好的规避质量风险,提高食品微生物检验结果的准确性与真实。但也存在部分检验人员在实际操作中忽视操作规范,未严格遵守操作流程的情况,所以在质量控制措施中,需要做好检验人员的管理,提高检验人员专业知识及技能水平,做好岗前培训工作,提高操作规范性,并以实验室相关制度、安全操作知识等进行意识层面教育培养,提高检验人员的质量控制意识与自我管理能力,提高食品微生物检验结果准确性。
食品微生物检验中,实验室各类仪器设备、培养基、试剂等,也是造成检验结果差错、失真等问题的因素之一,例如检验设备量程不准确,不符合检验要求,将造成检验结果失真,或由于培养基未彻底灭菌,试剂添加剂量不合理等,皆会影响实际检验结果。因此在质量控制措施中,需提高对实验室仪器设备、培养基、试剂等应用的控制,如在仪器设备使用前,需要做好调式,保证设备精度、性能等满足检验项目的需求,做好日常管理维护与记录,提高设备应用的精准性。在培养基应用前需要做好灭菌工作,设备仪器操作以实际操作需求,在超净工作台或洁净室内完成操作,避免外源菌株感染[2]。在试剂的调配及使用中,需要对试剂调配质量及使用量进行控制,部分试剂超过可使用时限,再应用于检验中不能够发挥试剂作用,或影响检验结果,或由于试剂应用量不足或过量,也易造成检验结果准确性的影响。所以在食品微生物检验的质量控制中,做好实验室内仪器设备、培养基、试剂等检验项目需应用材料的质量控制与过程管理,能够较好的提高检验结果准确性,提高检验质量。
环境中微生物的存在对检验结果也造成影响,特别是在菌株接种过程中,受环境微生物影响,可能造成菌株的污染,从而难以保障检验结果的准确性。一般来说,食品微生物检验项目需要在洁净室内完成,洁净室内定期对空气细菌进行监测与消毒,能够提高洁净室内洁净度,减少环境中微生物对检验结果的影响。但不同检验项目在实验室沉降菌个数的要求上不同,而检验环境可能存在采用单一清洁消毒管理的情况,造成检验项目中环境条件不达标,检验结果不准确。因此在质量控制措施中,需要完善实验室内卫生管理制度,根据不同的检验项目,规范清洁、消毒实验室,保障实验室内洁净度符合检验需求。可设置不同的卫生管理级别,根据检验项目对洁净度的需求,采取不同标准的清洁、消毒、沉降菌监测,提高实验室环境洁净度及质量控制水平[3]。
食品微生物检验中,采样是检验前的重要步骤之一,采集的样本是否具有代表性影响着检验结果是否具有准确性,而采样环节中,影响检验质量水平的因素也较多,如样本包装是否缺损,食品样本是否新鲜,液体、粉状样本采集前是否混匀等,对于影响采样结果的多种因素,需要采取质量控制措施有效控制。如对采样过程进行操作规范的制定,其中包括采样前做好样本外观、包装状态的检查与记录,准确记录采样时间,取样时间,在采样过程中,需要均匀样本后采样,如以分层采样方法、计数抽样、多级抽样等方法,根据样本特性的不同选择适宜的采样方法。另外,为防止采样过程中的污染,在采样时需要做好消毒灭菌工作,如瓶装检验时可以酒精棉球烧灼瓶口灭菌,袋装样品可以酒精棉球消毒袋口灭菌后取样[4],保持采样全过程的无菌操作与采样后无菌保存,提高采样质量与检验结果准确性。
食品样本采集后,检验微生物需要在无菌环境下根据操作要求规范操作,如在菌落总数的测定中,需要在洁净室及超净工作台中操作,预先打开净化系统进行紫外线灭菌,保持操作环境无菌状态,进入洁净室需还需检验人员做好自身消毒清洁,更换专门的服装,佩戴无菌手套,保持操作环境中不受人员进入影响造成环境细菌污染。在具体检验过程中,需选择适宜的稀释度稀释样品,同时做一个空白对照组,用于评估检验是否具备准确性。样品稀释、摇匀后,以移液枪取稀释液移至琼脂平板上,水浴加热混匀琼脂与菌液,保持平板薄厚适宜,菌落在平板上均匀分布。当检验的项目中存在微小颗粒时,可能造成检验结果中微小颗粒与菌落混淆难以分辨菌落分布结果,所以检验过程中可多作一个平板,在不进行菌落培养的状态下4℃内放置以做对照检验。检验质量的控制需要从检验操作的各个环节中进行,如倾注培养基,在琼脂及菌液量的选择上,以15ml ~20ml 教我适宜,在菌落菌液分布的要求上,菌液加入培养皿后,需快速倾注、选择培养皿,控制样本稀释至倾注时间为15min 以内,避免细菌死亡、繁殖等影响检验结果。
食品微生物检验中,做好检验过程中的质量控制是提高检验结果准确性的有效措施,因此在检验过程中,需提高质量控制意识,规范操作,保障检验质量。如以有证标准物质、次级标准物质做内部质量控制,采取不同的检验方法或重复检验方式提高检验结果准确性,对留存样品进行再次检验等方式,皆能够提高检验准确性与检验质量。
参考菌株起到验证实验方法准确性,实验操作科学性的作用,是评估食品微生物检验结果的重要工具。食品微生物检验中,质量控制可从参考菌株质量及参考菌保存两个要点中入手,为检验结果评估提供参考依据。在参考菌株的选择上,应以形态、染色反应、血清学特性典型而稳定的菌株为主,菌株应来源于专门机构。实验室在参考菌株的申购与保存、使用中需要做好记录,专人保管。如采用冷冻干燥法保存菌株,保持菌株性能不受到改变,或以冷冻保存法,将细菌混悬于脱脂牛奶、脱纤维羊血中,液氮或低温保存,也能够提高保持质量,但该方法细菌多次转种,可能发生变异。为提高检验质量,在参考菌株的保存中,传代培养次数应少于五次,且每次检验中如有变异、污染、菌株老化等情况,需及时销毁,避免重复多次使用影响检验结果的评估。
检验结果的质量控制可通过原始记录的检验展开,对原始记录中的数据进行识别与数据信息追溯,检查是否有数据措施存在,数据是否客观反映检验结果,是否存在数据缺漏等,形成对检验结果的核验。另外,还可通过空白对照组、标准参考菌株等评估检验结果的准确性,或通过检验项目的过程监督记录,反应检验过程是否存在操作失误,结果是否失真。以规范化的过程监督与数据信息记录,能够形成对检验质量的监督,提高检验质量与结果准确性。
食品微生物检验是一项专门技术,能够形成对食源性致病菌的检验,评估食品卫生是否达到标准,为提高食品安全作出保障。在食品微生物检验中,受到多种因素的影响,可能造成检验结果的不准确,如检验人员操作不规范,检验环境洁净度不符合标准,检验仪器设备精准性不高,采样不具有代表性等,都影响检验结果准确性与真实性。因此在食品微生物检验中,还需要采取质量控制措施,规范检验操作,做好实验室卫生管理,做好检验过程监督,提高检验质量,形成数据记录与追溯,做好检验结果质量控制。